题目

答案：【1】1【2】4【3】3（15分）自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将__________________筛选出来。（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，右下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是____________。（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用________________的原理，使荧光素酶基因数量呈______________方式增加。（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是________________。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的____________或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意____________________________。（6）荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素一荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。[实验材料]1×10－8mol／L ATP标准液、缓冲溶液、70 mg／L荧光素溶液（过量）、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70 mg／L的荧光素酶溶液。[实验结果]见下图。[实验分析与结论]①实验过程：为使结果更加科学准确，应增设一组___________________________作为对照。除题目已涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有__________（至少写出一个）。②实验结果：由图C可知，____________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。（7）食品卫生检验中，可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量，进而测算出细菌的数量，判断食品污染程度。测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量____________。