第二节 发酵工程的无菌技术 知识点题库

（1） 无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染．常用的灭菌方法有灼烧灭菌、灭菌和灭菌．

（2） 在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决方法是．

（3） 进行兰花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、外植体消毒、、培养、移栽、栽培．花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是．培养过程中若控制离体组织细胞能分裂但不分化，常用的两种激素及使用顺序为．

（4） 橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为该方法会导致原料和有效成分等问题．

（1） 该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌，划线时在培养基上共画了4个区域，则需要次灼烧接种环．在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是 ．

（2） 如果是用试管培养微生物，在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是 ． 接种时需在酒精灯火焰旁操作的原因是： ．

（3） 检测自来水中大肠杆菌，可选用伊红美蓝培养基，伊红美蓝培养基从功能上属于培养基，若其中加入蛋白胨，蛋白胨能提供的主要营养有 ． 该研究小组在统计菌落数目时，为防止因培养时间不足而遗漏菌落数，应培养至时，再计数．

（1） 皮肤感染金黄色葡萄球菌后，皮肤角质形成细胞分泌IL﹣33抵御感染属于免疫．

（2） 科研人员用金黄色葡萄球菌感染小鼠，观察小鼠背部皮肤溃烂情况和皮肤角质形成细胞中IL﹣33的表达情况，结果如图1．

由图可知，感染后第天皮肤溃烂面积最大；皮肤溃烂面积变化与IL﹣33 表达量变化趋势．

（3） 已有研究证实，角质形成细胞通过表达REG3A抵御病菌．为了检测REG3A的免疫功能，科研人员将等量的金黄色葡萄球菌分别与不同浓度的REG3A混合，采用法，统计3小时后金黄色葡萄球菌活菌的数量，结果如图2．

结果表明随着浓度的增加，REG3A抑菌效果．

（4） 科研人员为了研究REG3A和IL﹣33的关系，利用技术培养角质形成细胞并检测细胞中REG3A及IL﹣33表达量，结果如图3．

综合上述结果，推测小鼠机体抵御金黄色葡萄球菌感染的调控机制如图4，请填写相关内容．

①②③④．

（1） 在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。   

（2） 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬间消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是。   

（3） 密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能。在照射前，适量喷洒，可强化消毒效果。   

（4） 水厂供应的自来水通常是经过（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。   

（5） 某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。

（1） 该实验中,制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤是计算→称量→溶化→.所用培养基在为微生物提供等营养物质的基础上,还需要满足微生物对pH,以及氧气的需求。

（2） 对培养基灭菌常用的方法是.取水样前无菌操作的目的是.

（3） 某同学将0.1mL水样涂布到一个牛肉膏蛋白胨培养基上,经过37℃、24h培养后,平板上的菌落数为38个,该结果不能用于判断所取水样是否符合饮用水标准,原因是.

（4） 若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将水样涂布到培养基上,统计平板上菌落的数目。

（1） M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制的生长，加入了链霉素的培养基属于培养基。

（2） M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有（答出两点即可）。

（3） 若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是。挑选出能产生的菌落即为产生淀粉酶的微生物，该方法可以筛选出产生淀粉酶的微生物的原理是。

（4） 甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：。

（1） A组同学制作泡菜。在泡菜腌制的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是。

（2） B组同学制作腐乳。在制作腐乳过程中，在腐乳表面往往会有一层致密的皮，这层皮实际上是毛霉的，对人体无害；加盐的作用除了能使豆腐块失水变硬外，还有，避免豆腐块变质。

（3） C组同学制作蓝莓果酒与果醋。某同学对自己的发酵装置定时通过充气口充气，该同学是在制蓝莓果。另一位同学在蓝莓果汁中直接加入某品牌活性酵母后，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，通入无菌空气的目的是。

（4） 在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变，然后再变为。

（5） 牛奶常用的消毒方法：，培养基常用法灭菌，涂布器常用法灭菌

（6） 倒平板后需要将平板（怎样放置），目的是：

（1） 制作果酒需要的微生物是酵母菌，在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至性。果酒配制过程中，若要检测果酒中活体酵母菌的密度，一般采用法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目。

（2） 固定化酵母细胞在啤酒生产中发挥了重要作用，酵母细胞固定化的大致程序为：活化酵母细胞→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

①“活化酵母细胞”是指。

②在制备固定化酵母细胞过程中，若固定化得到的凝胶珠颜色过浅且呈白色，说明。

③两图是用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液前、后的示意图，你认为固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图，你的判断理由是。

（1） 居民小区、办公场所、商场产生的废弃口罩可作为生活垃圾中的其他垃圾进行收集转运。为避免环境污染和病原体的传播，废弃口罩必须先进行严格的处理。

（2） 细菌大多分布在距地表约3～8cm的潮湿土壤层，因此土壤取样时，一般。熔喷布主要成分为聚丙烯纤维（PP，组成仅含有C、H两种元素），用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末外，还应加入。对培养基灭菌常用法。在接种到鉴别培养基之前，可以通过的方法增加目的菌的浓度。

（3） 在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，可使目的菌落周围会出现透明圈，如下图所示，D表示透明圈直径，d表示菌落直径。为保证筛选出的细菌分解PP的能力最强，应当选择的菌落作为目的菌群。

（4） 已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与，工厂化降解PP时，常采用法来固定目的菌，采用该方法的原因。

（1） 为检测自制生产的酸奶中的乳酸杆菌含量是否达标，检验人员进行了相关实验。

①配置培养基：培养基中除含水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外，还需添加维生素和。

进行梯度稀释。

②稀释样品：取1mL待测酸奶，用进行梯度稀释。

③接种培养：用稀释涂布平板法接种，培养时控制的气体条件是。

④观察计数：菌落周围出现的就是乳酸杆菌的菌落，选择菌落数在的平板计数。每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，目的是。

（2） 生产上不能用含有抗生素的牛奶发酵成酸奶，原因是。

（1） 从微生物的营养构成看，细菌培养基所含的主要营养物质一般有。

（2） 上述培养A细菌的培养基从物理性质看，属于。培养基一般采用法进行灭菌。

（3） 在微生物的数量测定上，同一浓度的同种菌液，用稀释涂布平板法与显微直接计数法相比往往偏低，其原因是。

（4） 在A细菌的培养过程中，发现了另一种B细菌，甲同学为探究其原因，认为应在培养基上接种A细菌后，还要用空白培养基做对照，他的设计目的是。

（5） 在B细菌周围A细菌的生长繁殖受到抑制，乙同学认为是B细菌产生了不利于（抑制）A细菌生存的物质。下图是该同学设计的部分实验思路，请你在实验③的基础上，继续完成关于A细菌生长繁殖受到抑制原因的探究实验思路： （用序号、文字和箭头作答）。

（1） 某黄酒酿制工艺流程如下图所示，图中加入的菌种a是，工艺b是（填“消毒”或“灭菌”），采用工艺b的目的是。

（2） 以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有（答出两种即可）。

（3） 研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如下图所示。推测是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是。

（4） 某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路。