二 动物细胞融合技术 知识点题库
植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是（ ）
A . 诱导融合的方法完全相同
B . 所用的技术手段基本相同
C . 所采用的原理完全相同
D . 都能形成杂种细胞
下列关于生物工程相关知识的叙述有几项是正确的（ ）
①在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制性内切酶，露出的黏性末端可以不同
②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，就能产生单克隆抗体
③若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞中
④植物体细胞杂交，能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种是二倍体
⑤基因治疗主要是对具有缺陷的体细胞进行全面修复
⑥诱导细胞融合之前，需将抗原反复注射给实验小鼠，目的是获得产生单一抗体的效应B细胞
①在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制性内切酶，露出的黏性末端可以不同
②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，就能产生单克隆抗体
③若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞中
④植物体细胞杂交，能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种是二倍体
⑤基因治疗主要是对具有缺陷的体细胞进行全面修复
⑥诱导细胞融合之前，需将抗原反复注射给实验小鼠，目的是获得产生单一抗体的效应B细胞
A . 1项
B . 2项
C . 3项
D . 4项
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，正确的是：( )
A . ①过程促融剂常用聚乙二醇，不可用灭活的病毒
B . ②过程中筛选出杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体
C . ③过程中利用了DNA分子杂交的原理
D . ④过程中培养液中需要添加动物血清、抗生素等物质
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
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（1） 制备单克隆抗体过程中要用到和技术。
-
（2） 在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是。
-
（3） 哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。
自然界中有一种含有叶绿体的原生动物﹣﹣眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活．某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案．结合实验方案回答：
实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的．实验步骤如下：
（1）①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是
（2）③过程所用的酶是
（3）④过程除了用电激之外，还可以用、 等作为诱导因素．
（4）在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和 争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量 导致培养物迅速死亡．
（5）在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是 ．
下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：
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（1） 由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中和两大技术．
-
（2） 图中，向小鼠注射包含了多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低．与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它的并能大量制备．
-
（3） 图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有种类型．
-
（4） 图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出，筛选②的目的是筛选出．筛选时所用的培养基是特定的培养基．
科学家们用磷脂制成双分子层的微球体，里面包裹着抗癌药物，外面带上单克隆抗体，制成“生物导弹”．下列有关叙述不正确的是（ ）
A . 单克隆抗体的制备应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术
B . 单克隆抗体的化学本质是蛋白质，特异性强、灵敏度高
C . 选择培养基上培养出的杂交瘤细胞都能够经专一抗体检验呈阳性
D . 理论上利用“生物导弹”技术治疗癌症疗效高，毒副作用小
基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞（ ）
A . AAaa
B . AaBb
C . Aabb
D . BBbb
下列叙述正确的是（ ）
A . 要获得转基因植物，可选用植物的体细胞作受体细胞，然后通过组织培养技术获得；如果要获得转基因动物，可选用动物的体细胞作受体细胞，然后通过动物细胞培养技术获得
B . 通过转基因方式获得的抗虫棉具有永久抗虫的能力
C . 用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定相同的；用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端一定是不相同的
D . 诱导动物细胞融合除可以用离心、振荡、电激等物理方法，聚乙二醇处理等化学方法外，还可以采用灭活的病毒进行处理
下图表示抗人体胃癌细胞的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述错误的是( )
A . 图中甲可能是人体胃癌细胞的特异性抗原
B . 用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
C . 丙、丁分别表示杂交瘤细胞和能分泌抗胃癌抗体的杂交瘤细胞
D . 丁的大规模培养可以在培养基中进行，也可以在小鼠腹腔内进行
下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（ ）
A . 植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍
B . 动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径
C . 利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品
D . 胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力
以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。
-
（1） 上图中过程①的完成采用的方法有：，依据的生物学原理。
-
（2） 过程④要用到的酶有，过程⑥采用的方法叫。
上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。
分子量(kb)
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
酶M
+
+
+
酶N
+
+
酶M+酶N
+
+
+
+
+
凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）
-
（3） 该质粒长度为kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有、个。
-
（4） 氨苄青霉素抗性基因的作用是。
地球上的植物每年产生纤维素超过70亿吨，其中40%-60%能被土壤中的某些微生物分解利用。工业生产中可利用纤维素分解菌将纤维素分解，随后接种酵母菌转化成新的能源物质一一乙醇，进一步利用接种醋酸杆菌产生醋酸，食用醋的主要成分。工业生产这两种成分的基本工艺流程如图所示。请回答：
-
（1） 在发酵罐I内，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是由三种复合酶组成，其中酶可将纤维糖分解为葡萄糖。
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（2） 在过程②筛选纤维素分解菌时，常常采用平板划线法和法进行纯化。两种方法的共同点是，用来筛选纤维素分解菌的培养基中含有Na2HPO4和KH2PO4 ， 其作用有。（答出两点）
-
（3） 发酵罐II内的发酵温度应为，发酵一定时间后，观察到发酵罐内液而不再有，说明发酵基本完毕。发酵罐II内和发酵罐III内除了严格控制温度、pH外，发酵罐Ⅲ内还需要提供。
-
（4） 若II罐中的酒全部流经III罐制成醋，III罐中CO2的产生量是____。A . 甲罐的两倍 B . 与甲罐的相等 C . 甲罐的一半 D . 几乎为零
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（5） 单核细胞的体外扩增过程中需要先用到胰蛋白酶处理，其目的是。在体外培养过程中，单核细胞具有细胞贴壁和的特性。
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（6） 体外培养DC细胞时，培养液的pH值需要用来维持，此外，动物培养液中需要添加等天然成分，还需要添加一定量的，以防止培养过程中的污染。
-
（7） 体外培养的CIK细胞，最多传代培养到第代，原因是。
-
（8） 制备用于非细胞治疗的单克隆抗体时，需要用到的技术有（答出两项即可）。最后得到的单克隆抗体的优点具有。
牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是
A . H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌
B . 应选用原肠胚做雌雄鉴别
C . 鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植
D . 用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
今年我国猪肉价格持续上升与非洲猪瘟有着密切联系。该疫病传染性强，致死率高，且目前没有特效药和疫苗，故及时检出病猪后扑杀为当前工作之首要。
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（1） 非洲猪瘟病毒是一种DNA病毒。请在答题纸的图中用方框标出DNA的基本单位。若以图中的甲链为模板转录RNA，其碱基序列是。（写在答题纸图空格中）
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（2） 下表为某培养基配方，该培养基可用于培养微生物。试分析该培养基是否可用于猪瘟病毒培养？（是/否），为什么？。
KH2PO4
NaHPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
琼脂
营养成分溶解后，
自来水定容至1000mL
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
15g
抗原抗体检测目前普遍用于评价人和动物的免疫功能。现常见的检测样品种类包括检测抗原和抗体两种。
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（3） 对送检样品进行抗原、抗体检测依赖于（抗原与抗原/抗原与抗体/抗体与抗体）发生的特异性结合。检测时用的抗体可以利用的方法来制备。
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（4） 某同学体检时检测出乙肝病毒抗体，经了解，该同学之前并未接种过相应的疫苗，他获得的免疫来自于_________。A . 人工免疫 B . 天然免疫 C . 先天免疫 D . 后天获得免疫
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（5） DNA疫苗是直接将编码保护性抗原的基因，通过体外重组与质粒结合，直接注射，从而使动物体获得免疫力。若将来研发出猪瘟病毒的DNA疫苗，接种疫苗的猪是否可以称为转基因猪？（是/否），为什么？。
干扰素是治疗癌症的重要药物，传统方法必须从血液中提取，每升人血液中只能提取0.5ug，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下图的方式生产干扰素。试回答相关问题：
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（1） 若要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素，首先要构建基因表达载体，将目的基因与载体结合，图中所示的目的基因是。
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（2） 通常情况下，对供体和受体母牛选择后，要用激素进行 (同期发情处理/非同期发情处理)。
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（3） 为了实现干扰素的批量生产，早期胚胎进行移植之前要进行质量检测，并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为(XX/XY)。为了提高胚胎利用效率，可在胚胎发育适当阶段进行胚胎分割，胚胎分割可以看作动物 (有性/无性)繁殖的方法之一。
如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究，分析回答下列问题。
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（1） a过程表示基因工程，则其核心步骤是。该过程所使用的工具酶有。
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（2） b过程可增加ES细胞的数量，若想从早期胚胎中获得更多的ES细胞，可将早期胚胎培养至(时)期。d过程移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫不会对其发生。用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。
-
（3） 上述研究过程中使用的技术有(至少3个)。若要培养试管动物，除以上技术外，还需要运用技术。
下列四项中与克隆在本质上最相近的是（ ）
A . 将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔的子宫内，并最终发育成两只一样的兔子
B . 将人的抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的烟草新品种
C . 将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
D . 将人的精子与卵细胞在体外受精，待受精卵在试管内发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿”
幽门螺杆菌（Hp）是一种革兰氏阴性微需氧菌，一般定植在胃黏膜上皮细胞表面，能产生高活性的脲酶，可分解尿素产生NH3和CO2 ， 以保护Hp免受胃酸和胃蛋白酶的侵袭。Hp是引起慢性胃炎、胃溃疡、胃癌的重要因素，Hp会因为胃黏膜上皮细胞的快速更新、脱落而脱落，随粪便排出。临床上可以通过13C或14C呼气试验和检测粪便抗原等方法判断感染情况。回答下列问题：
-
（1） 14C呼气试验检测是否感染Hp时，口服含14C的尿素胶囊，短时间内用特定仪器检测呼出气体中含14C的含量，其原理是利用了酶的高效性和性。14C检测无辐射，更适用于儿童和的检测。粪便抗原的检测原理是，并利用对抗体进行标记或显色。
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（2） 用于粪便抗原检测的单克隆抗体，在制备过程中涉及的细胞工程技术主要有动物细胞融合和。利用灭活病毒诱导细胞融合的原理是利用病毒表面含有的糖蛋白的作用和酶的催化作用，促使细胞互相凝集，引起细胞膜的蛋白质分子和磷脂分子重新排布，细胞发生融合。
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（3） 对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，最常用的是法，即稀释到每mL培养液中只有3~10个细胞，然后在多孔细胞培养板的每个孔内加入细胞稀释液0.1mL，使绝大多数孔中的细胞数不超过个，从而实现单克隆培养。
下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）
①核移植中细胞核和细胞质来源
②动物细胞融合中的两个细胞
③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体
④植物体细胞杂交中两个体细胞
A . ①②③④
B . ③
C . ①②③
D . ②③
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