二、培养特定微生物群体 知识点题库

（1） ①是制备培养基时中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过 ， 防止瓶口的微生物污染培养基．

（2） 该纯化醋酸菌的接种方法是 ． 完成步骤④的操作，接种共需要次的灼烧处理．

（3） 纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产，则可以采用的方法保存菌种，但这种方法保存的时间不长，原因是 ．

（4） 将醋酸菌加入果酒中，乙醇为醋酸菌的生命活动可提供 ， 将温度控制在℃，可以获得较多果醋．

（1） 微生物的培养和鉴别技术是一项基本技术．为了从样本中获取细菌的单菌落，可用法及法将样本接种于表面，经过选择培养、鉴別等步骤获得．培养基进行灭菌时，应该采用的方法是．为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在的平板进行计数．

（2） 泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康．亚硝酸盐在特定条件下会转变成，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质正常情况下，随着腌制时间的延长，亚硝酸盐含量的变化趋势是．

（1） 液体培养基中除了把葡萄糖作为 外，还应该含有．

（2） 样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐．进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：．

请再设计并完成下列实验，来验证你的观点．

①配制 的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）；

②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况．实验过程应在条件下进行．

③预期实验结果：．

（1） 在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。

（2） 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬间消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是。

（3） 密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能。在照射前，适量喷洒，可强化消毒效果。

（4） 水厂供应的自来水通常是经过（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。

（5） 某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。

（1） 在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是。

（2） 用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落。

（3） 菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是。

（4） 研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明。

（1） 回答生物技术实践的相关问题：

①醋酸菌如果在充足、氧气充足的情况下，可以直接将葡萄糖变成醋酸；由于醋化醋杆菌不能直接利用淀粉等多糖类，所以，淀粉需要过程才能用来制醋，为了提高产量，往往筛选高产菌株，筛选出的高产菌株使用（工具）接种到上，放置于4 ℃的冰箱内进行保存备用。在酿醋前，将菌种放在锥形瓶内进行震荡培养，可用进行搅拌；

②植物的组织培养是快速繁殖的一种方法，将剪下的部分枝条先放在发芽培养基中培养，使之长出更多的，再进行培养后移入生根培养基中，待生根后，将幼苗移至中进行锻炼

（2） 已知拟南芥植物多次培养后依然具有全能性，常用拟南芥进行多方面的研究和应用，原生质体培养就是常用的技术之一，

①原生质体的制备：选取生长到3-4周的拟南芥叶片，先用70%的酒精消毒后，用冲洗5次，将叶片切成0.5-1mm的小片放置于盛有的培养皿中，另取一培养皿，加入灭菌后的酶液，将叶片放入酶液，震荡酶解3小时，酶解后过滤出大组织块，滤液中是酶和原生质体混合物，将滤液可以通过方法进行分离。影响原生质体纯度的因素有（写2种）

②筛选出具有活性的原生质体，可将处理后的目的基因通过法导入到受体细胞，原生质体只有再生出后才能进行细胞增殖，拟南芥的全能性的表达程度主要取决于该植物的。

（1） 葡萄酒的传统制作过程中，一般不需要人为添加菌种，原因是。

（2） 葡萄酒的工业生产过程中，需要添加纯净的菌种，为了获得纯净的菌种常用法进行接种纯化；若菌种的数目不够，可使用特定的（填“液体”或“固体”）培养基培养菌体，以获得足够数目的菌体。

（3） ①过程刚榨取的葡萄汁比较浑浊，常采用的解决方法是使用果胶酶处理，该类酶包括多聚半乳糖醛酸酶、（答出2种）等。其能解决果汁浑浊问题的原理。科研人员从某种微生物中分离到了一种由两条不同肽链构成的酶，采用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳对其进行鉴定时，蛋白质在凝胶中的移动速度和自身的带电性质（填“有关”或“无关”）。

（4） 为了提高②过程中所用微生物的利用率，可用法对微生物进行固定，该过程常用的固定材料是。

（1） 若想尽快找到诺氟沙星分解菌，应从中进行取样。

（2） 配制培养基时，研究人员认为培养基中的碳源和氮源均应来自于。但经过多次实验发现，在该培养基上并没有诺氟沙星分解菌生长，而添加适量的蛋白胨后，发现有诺氟沙星分解菌生长。添加的蛋白胨为诺氟沙星分解菌提供的营养成分是。如何判断液体培养基中有诺氟沙星分解菌呢？写出检测思路：．

（3） 培养过程必须严格进行无菌操作，需进行消毒处理的有（至少说出2种）。

（4） 在将样品稀释涂布到选择培养基之前，研究人员将其与富含诺氟沙星的液体培养基混合，并将其固定在摇床上振荡培养2天。这样做的目的是，由此可以推断诺氟沙星分解菌的细胞呼吸方式为。

（1） 在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是。

（2） 在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有，从功能上看，③中的培养基属于培养基，在④中，可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。

（3） 研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

（4） 上述实验的各个环节都必须做到严格的操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指。

（1） 制曲的目的是让黑豆上长满曲霉等微生物。为了弄清微生物的具体种类，需从曲料（制曲阶段黑豆表面部分）中分离、纯化微生物，常用的接种方法有（答出两种方法即可），纯化所得的优良菌种常用法进行长期保存。

（2） 黑豆蒸熟或煮熟后更容易制曲，从蛋白质结构角度分析，其原因是。拌盐阶段需控制食盐的用量，其原因是（答出两点即可）。

（3） 豆豉风味的形成与腐乳类似，据此推测豆豉的鲜美口味主要在阶段形成。

（4） 小作坊制作的豆豉中，有时出现肉毒菌毒素，从而引起食物中毒。为避免肉毒菌等有害杂菌的污染，现代工业化的豆豉生产在制曲阶段可采取的措施有。