1.1 DNA重组技术的基本工具 知识点题库
图甲乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Ne r表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是（ ）
A . 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团
B . 在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
C . 用PstⅠ和Hind III酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
D . 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是
A . 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
B . 1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
C . 1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ
D . 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ
下列有关基因工程中运载体的说法正确的是
A . 在进行基因工程操作中，被用作运载体的质粒都是天然质粒
B . 所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体
C . 质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子
D . 作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因
矮牵牛花色丰富，易于栽培，是世界上销量最大的花卉之一，科研人员尝试通过增加更式控制色素形成的基因（CHS基因）使红花矮牵牛花瓣颜色加深．
（1）科研人员按如一步骤进行操作：
第一步：首先从红花矮牵牛的 细胞中提取mRNA，经逆转录获得CHS基因．
第二步：将CHS基因与质粒构建重组质粒，该过程需要使用 酶和 酶．
第三步：通过 转化法，将其导入植物细胞中．
第四步：将筛选出的成功导入CHS基因的细胞利用 技术培育获得转基因的矮牵牛植株，该技术的原理是 ．
（2）实验结果与预期结果相反，许多转基因植株的花色为白色，为探究其原因，研究人员从白花转基因植株和红花植株的细胞中分别提出总RNA，然后以 作为探针进行 ，结果发现转基因植株中CHS基因的RNA量减少，由此推测，生物体外源CHS基因的转入并未增加CHS基因的表达，甚至连细胞的 基因表达也受到抑制从而使花色为白色．
（3）对上述现象的解释有两种观点，第一种观点认为可能由于 酶未能识别基因首端的 部位，从而不能进行转录，第二种观点认为由于某种原因细胞内转录出了部分的含量．
科学家在某种植物中找到了抗枯萎的基因，并以质粒为运载体，采用转基因方法培育了抗枯萎病的金茶花新品种，下列有关说法正确的是（ ）
A . 抗枯萎病的金茶花与原金茶花之间形成了生殖隔离
B . 质粒是能自我复制的小型细胞器，因此适合做运载体
C . 抗枯萎基因最终整合到植物的染色体组中，该技术应用的原理是染色体变异
D . 通过该方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子不一定含抗病基因
切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注人小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理及表达过程是（ ）
A . 基因突变 DNA→RNA→蛋白质
B . 基因工程 RNA→RNA→蛋白质
C . 细胞工程 DNA→RNA→蛋白质
D . 基因工程 DNA→RNA→蛋白质
下列能打破生殖隔离的界限，定向改变生物培育新品种的育种方式是（ ）
A . 基因工程育种
B . 杂交育种
C . 诱变育种
D . 多倍体育种
科学家运用基因工程技术向皮肤细胞中植入基因，将人体皮肤细胞改造成几乎可与胚胎干细胞相媲美的干细胞．自然状态下，这种变异类型可以（ ）
A . 产生新的基因
B . 发生在减数分裂过程中
C . 发生在有丝分裂过程中
D . 在秋水仙素作用下提高发生率
关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是（ ）
A . 限制酶可以使特定碱基对之间的氢键断裂
B . 试管苗、试管牛都属于无性生殖
C . 脱毒苗是利用基因工程技术将脱毒基因导入植物细胞培养成的新品种
D . 植物体细胞杂交，能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定不是单倍体
已知限制性核酸内切酶BglⅡ和BamHⅠ的识别序列和切割位点分别为A↓GATCT和G↓GATCC．下列有关叙述，不正确的是（ ）
A . 这两种酶的识别序列都为6个脱氧核苷酸对
B . 用这两种酶切割质粒和含目的基因的DNA分子所产生的黏性末端可形成重组DNA分子
C . 用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，仍可以被这两种酶切开
D . 这两种限制酶识别的序列都为回文序列
下列关于酶的说法，正确的是( )
A . 限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质
B . 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C . 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D . DNA连接酶可将单个核苷酸加到某个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键
基因工程技术必需的工具酶包括（ ）
①限制酶②DNA连接酶③DNA聚合酶④运载体.
A . ①
B . ①②
C . ①②③
D . ①②④
RNase P是一种核酸内切酶，由RNA和蛋白质组成。无活性的RNase P通过与前体tRNA特异性结合被激活，激活的RNase P剪切前体tRNA，所得的成熟tRNA进入细胞质基质中发挥作用。以下关于RNase P分析不正确的是（ ）
A . 通过破坏磷酸二酯键剪切前体tRNA
B . RNase P能够催化tRNA基因的转录
C . RNase P可能存在于细胞核或某些细胞器中
D . pH、温度都会影响RNase P的活性
科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖控制基因（prG），该基因能激发许多动物的细胞进行分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的途径。下图一是将无限增殖控制基因（prG）直接导入B细胞获得单克隆抗体的思路；图2是通过细胞核移植技术构建重组质粒来制备单克隆抗体的思路。请回答以下问题：
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（1） 图一中的酶A是指，酶B是指。
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（2） 图一中的II所指的细胞是，将重组质粒导入细胞“II”，然后进行“检测”，检测的目的是。III所指的细胞具有的特点是。
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（3） 图二中构建重组细胞时，选用了细胞甲的细胞质是因为，图中的乙细胞是。重组细胞进行体外细胞培养获得的细胞群称为。
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（4） 利用杂交瘤技术制备单克隆抗体时，促进细胞融合常用的融合剂是。诱导后需进行两次筛选，第一次筛选的目的是，第二次筛选的目的是。
下图表示某种酶切割目的基因的过程，相关叙述不正确的是（ ）
A . 图示用到的酶为限制性核酸内切酶，这类酶主要从原核生物中分离纯化出来
B . 图示限制酶切割后形成的末端是黏性末端，有的限制酶可切割形成平末端
C . 该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间
D . 限制酶的名称往往是根据发现者姓名来命制的
新冠肺炎病毒是一种RNA病毒，其表面的S蛋白是主要的病毒抗原，下图是利用基因工程生产2019-nCoV病毒疫苗的部分流程图，回答下列问题：
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（1） 获得S基因的方法为：提取病毒的RNA并利用特定的酶对其进行切割获得控制合成S蛋白的RNA片段，并以该片段为模板，通过逆转录过程得到相应的DNA片段即为S基因，该步骤中用于切割RNA的酶（填“是”或“否”）限制性核酸内切酶，理由是。
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（2） 扩增S基因时需要根据设计一对引物，为了使扩增后的S基因能够与载体相连，需要在引物的一端连上特定的。
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（3） 构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，该步骤一般用两种不同的限制酶切割质粒和目的基因，目的是。
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（4） 步骤②常需要用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是。
下列关于基因工程的叙述中，正确的是（ ）
A . 基因工程的原理是基因突变
B . 基因工程改造生物体性状具有盲目性
C . 基因工程可以使植物体表达出动物蛋白
D . DNA连接酶也可用于切断目的基因的DNA
基因工程是将目的基因通过一定过程，转入受体细胞，经过受体细胞的分裂，使目的基因的遗传信息扩大，再进行表达，从而培养成工程生物或生产基因产品的技术，有关说法不正确的是（ ）
A . 不同基因可独立表达且遗传密码具通用性
B . 基因工程是分子水平上定向变异
C . 基因工程实施必须具有工具酶、目的基因、运载体、受体细胞
D . 用基因工程的方法培养的抗虫植物也能抗病毒
以下生物工程中相关工具的叙述中，不正确的是（ ）
A . 限制酶可用于获取目的基因
B . 质粒改造后可用作基因工程的载体
C . DNA聚合酶可用于目的基因与运载体连接
D . 质粒上基因的表达遵循中心法则
以下关于基因工程的说法，正确的是（ ）
A . 限制酶可以切割DNA和RNA
B . T4DNA连接酶只能“缝合”两个双链DNA片段间的黏性末端
C . 载体的作用是将外源基因导入受体细胞，使之稳定存在并表达
D . 切割质粒的限制酶均能特异性地识别6个核苷酸对
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