第一部分 微生物的利用 知识点题库

（1） 实验步骤：

①配制以 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 ．

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 ．

③将接种针用 法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入 （固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖．

（2） 上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上 附近进行．

（3） 上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于 培养基，如果在培养基中加入碘，则该含有碘的培养基从功能上属于 培养基．

（4） 上述中能够高效分解淀粉的细菌的代谢类型是  ．

（1）

检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为 ．如图所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是 ．

（2） 用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？ ． 为什么？ 

（3） 有三种材料或用具需要清毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手．其中需要消毒的是　 ，需要灭菌的是 ．

（4） 已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？ ．

（1） 配置（固体、半固体、液体）培养基，为了得到该类型培养基，通常要加入（成分）．还要注意该培养基的碳源应为．

（2） 将接入已灭菌的培养基平板上．

（3） 立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是．

（4） 菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小．若观察到有些菌落的周围出现现象的即为候选菌．经分离、纯化后即可获得高效菌株．

（1） 实验室常用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养细菌，牛肉膏能提供的主要营养有 。一般用琼脂培养基培养酵母菌。

（2） 如图，该小组采用的是  分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的操作时，总是从上一次的末端开始，这样做的目的是 。

（3） 该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是。除了上述的活菌计数法外， 也是测定微生物数量的常用方法。

（4） 该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是： 。

（1） 配制好的培养基灭菌通常可以使用法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是。这种培养基从功能上看属于（(填“选择”或“鉴别”)培养基。

（2） 同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是。

（3） 同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小，原因可能有。

（4） 步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使，提高营养物质利用率。

（5） 步骤⑤后取样测定石油含量的目的是。

（1） 制作果酒需要的微生物是酵母菌，在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至性。果酒配制过程中，若要检测果酒中活体酵母菌的密度，一般采用法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目。

（2） 固定化酵母细胞在啤酒生产中发挥了重要作用，酵母细胞固定化的大致程序为：活化酵母细胞→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

①“活化酵母细胞”是指。

②在制备固定化酵母细胞过程中，若固定化得到的凝胶珠颜色过浅且呈白色，说明。

③两图是用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液前、后的示意图，你认为固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图，你的判断理由是。

（1） 细胞生命活动所需的主要能源物质是。癫病发作时，ATP大量消耗，细胞的增强。通过“模型鼠”实验发现，酗酒容易诱发癫痫发作，因为酒精可引起神经系统高度兴奋，容易使神经元突发的行为。

（2） 图1实验设置的对照组处理方法是。该实验结果表明。

（3） 为了测试肠道菌群是否对防止癫痫发作有重要作用，研究者分析了生酮饮食对两种类型小鼠的影响。该实验的自变量为。研究发现：若没有肠道菌群，生酮饮食（选填“能”或“不能”）有效地抑制癫痫发作。当恢复肠道菌群后，生酮饮食则能够明显提高。通过分析该结果，可得出的结论。

（4） 研究者继续进行实验：①给无菌小鼠接种多个不同菌种。②然后再给这些鼠饲喂等量生酮饮食。数天后，利用法对小鼠肠道菌群进行分离鉴定。结果发现饲喂生酮饮食后，其肠道菌群多样性降低，但AKK菌和Pb菌比例上升。继续用两种菌做实验，得到如图3所示的结果。由此可知：若接种，可以促使生酮饮食更有效地防止癫痫发作。通过上述实验，为寻找新的干预措施来改善癫痫患者发病程度和发病率带来了希望。

（1） 微生物的培养和接种等环节都需要严格做好无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，下列所列举的实验材料和用具中，需要灭菌的是(填数字)，需要消毒的是(填数字)。

①培养基    ②接种环    ③实验者的双手   ④培养皿    ⑤酒精灯

（2） 接种微生物的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是___________。

（1） 将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有。若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入(显色剂)筛选出能产淀粉酶的微生物。该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是。 

（2） 某同学在使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。为了调查某河流的水质状况，某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是。然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0.1 mL稀释液。经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。 

（3） 用平板划线法分离水样中的细菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有(答出两条)。若将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，分析其原因是。 

（1） 为了筛选到AFB1降解菌，可选择在中采样；从功能上看，1号培养基属于；在此过程中，鉴定不同菌落降解AFB1能力的方法是。

（2） ③号操作的目的是，相对于1号培养基，2号培养基中特有的成分是，该成分的作用是。

（3） 一个菌落是由个菌体分裂形成，因此，为了得到相对纯净的菌体，通常采取的方法是。

（4） 菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的发酵液进行离心，发现上清液中 AFB1 的残留率明显低于菌悬液的。经检测发现上清液中存在多种蛋白质，为验证蛋白质 K 是降解 AFB1 的有效成分，科研小组设计了实验过程，如下表。表中①、②、③分别表示（用“+”或“-”表示）。如果验证成功，则④与⑤的大小比较关系是。

不同处理或测定	试管甲	试管乙
培养过降解菌的上清液	①	②
一段时间后，分别加入含AFB1的培养基
蛋白质K水解酶	+	③
测定培养基中AFB1含量	④	⑤

表中“＋”表示添加，“-”表示不添加，甲乙试管所加物质的量均相同。

（1） 筛选白色链荐菌时可以观察菌落特征，菌落特征包括菌落的形状、大小、等方面，筛选步骤需要使用（填“固体”或“液体”）培养基；得到菌种后，为了增加白色链霉菌的数量，应转移到（填“固体”或“液体”）培养基中培养。

（2） 与固定化酶技术相比，固定化细胞技术的优势是，固定化细胞常采用图中的是（填序号）方式。

（3） 从反应柱下端收集到的某批次糖液变质，检查发现原因是酵母菌污染。生产设备中的残留糖液为酵母菌的入侵和迅速繁殖提供了这一主要营养物质。除了酵母菌，芽孢杆菌也是主要的污染微生物，必须在固定化细胞灌柱前对反应柱做的处理是

（1） 回答与产淀粉酶的枯草杆菌育种有关的问题：

Ⅰ.为快速分离产淀粉酶的枯草杆菌，可将土样用制成悬液，再将含有悬液的三角瓶置于80℃的中保温一段时间，其目的是。

Ⅱ.为提高筛选效率，可将菌种的过程与菌种的产酶性能测定一起进行：将上述悬液稀释后涂布于淀粉为唯一碳源的固体培养基上培养，采用显色方法，根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产酶及产酶性能。

Ⅲ.为了获得高产淀粉酶的枯草杆菌，可利用现有菌种，通过后再筛选获得，或利用转基因、等技术获得。

（2） 回答与植物转基因和植物克隆有关的问题：

Ⅳ.在用农杆菌侵染的方法进行植物转基因过程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生长，二是筛选转化细胞。当选择培养基中抗生素浓度时，通常会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行抗生素的检测。

Ⅴ.为提高培育转基因植株的成功率，植物转基因受体需具有较强的能力和遗传稳定性。对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测，可通过观察细胞内形态是否改变进行判断，也可通过观察分裂期染色体的，分析染色体组型是否改变进行判断。

Ⅵ.植物转基因受体全能性表达程度的高低主要与受体的基因型、培养环境、继代次数和长短等有关。同时也与受体的取材有关，其中受体为时全能性表达能力最高。