第2节 酶活力的测定 知识点题库

下列不能用来表示酶活性高低的是（ ）

萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶．α﹣淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活，而β﹣淀粉酶不耐热，在70℃条件下15min后失活．实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）．

主要试剂及仪器：麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等．

实验步骤：

步骤一：制作麦芽糖梯度液．取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2min，取出后按试管号顺序排列．

试剂	试管号
	1	2	3	4	5	6	7
麦芽糖标准液（mL）	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸馏水（mL）	2.0	1.8	1.4	1.0	X	Y	Z
斐林试剂（mL）	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

步骤二：萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液．

步骤三：将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却．

步 骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液（忽略其中含有的少量麦 芽糖）和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温 10min．

步骤五：取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管，然后向E、F试管分别加入　         ， 　                              ， 观察颜色变化．

结果分析：将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较，获得该试管中麦芽糖浓度，并计算出α﹣淀粉酶催化效率．

请分析回答：

能源紧缺的现状下，可利用纤维素解决能源问题，利用纤维素解决能源问题的关键，是高性能纤维素酶的获取．请完善实验方案，并回答相关问题．

【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性．

【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小；用呈色反应表示葡萄糖的生成量．

【实验材料】三种微生物（A、B、C）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同．

【实验步骤】

（1）取四支试管，分别编号．

（2）按照如表所列添加相应试剂．

试管号 试剂（ml）	1	2	3	4
蒸馏水	1.4	1.4	1.4	X
pH7.5的缓冲液	0.2	0.2	0.2	0.2
纤维素悬浮液	0.3	0.3	0.3	0.3
微生物A提取液	0.1
微生物B提取液		Y
微生物C提取液			0.1

（3）将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时．

（4）检验葡萄糖的生成量，在上述四支试管中分别加入 ，摇匀后，进行水浴加热．

（5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色深浅．

【实验结果】

	1	2	3	4
颜色深浅程度	+	+++	++	﹣

【分析讨论】

①表格中实验添加试剂的量X、Y分别是 、 ．

②该实验中的对照组是 号试管，实验的自变量是 ，因变量是  ， 无关变量是 　（至少3个）

③实验组试管均呈现的颜色是 ，但深浅不同．

④将上述四支试管放入37℃的水浴，保温目的　 

⑤你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是微生物 ．

我国的水果生产发展迅速，但由于收获的季节性强，易造成积压滞销，腐烂变质．将水果加工成果汁、果酒、果醋等，不仅可以解决水果丰收季节时的产、 销、运输和保存等多方面的问题，而且提高了水果的附加值，满足不同人群的需求．果胶酶能够催化果胶分解，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更容易，也 使得浑浊的果汁变得澄清．请回答下列有关问题：

（1）每当到了丰收的季节，苹果堆满了仓库，但如果交通不便，就会有很多苹果因保存不当或不能及时运出，而渐渐腐烂变质，苹果腐烂的原因是 ； ．为了减少损失，提高产品的经济效益，人们想到了榨取果汁，要想使果汁尽可能榨出来，应加入果胶酶，在该物质的作用下，将果胶分解成可溶性的 ．

（2）探究温度对果胶酶活性影响的实验步骤：

①用搅拌器制苹果泥；

②取6个烧杯编号1、2、3、4、5、6，依次注入适量的30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃的水，恒温水浴；

③每一烧杯中放入两支试管，分别装有等量苹果泥和果胶酶，保温3min；

④向每组烧杯中的苹果

泥试管中加入相应的等量的果胶酶，振荡试管，反应一段时间；

⑤过滤，比较获得苹果汁的体积．

a．③过程中将苹果泥和果胶酶分别装在不同试管中，用相同温度恒温处理然后再混合，这样处理的目的是 ．

b．有人认为该实验缺乏对照，应补充一组果汁和蒸馏水相混合的实验，你认为有没有必要？原因是 ．

某兴趣小组进行了如下实验：

【实验目的】比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性

【实验原理】略．

【实验材料】三种微生物淀粉酶提取液（提取液中酶蛋白浓度相同）等

【实验步骤】

a．取四支试管，分别编号；

b．按表内要求进行操作；

	试管1	试管2	试管3	试管4
蒸馏水	2	2	2	A
pH=8缓冲液	0.5	0.5	0.5	0.5
淀粉溶液	1	1	1	1
甲生物提取液	0.3
乙生物提取液		0.3
丙生物提取液			0.3
总体积	3.8	3.8	3.8	B

c．将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时；

d．在上述四支试管冷却后滴入碘液；

e．观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅

【实验结果】（注：“+”显色，“++”显色更深；“﹣”不显色）

	试管1	试管2	试管3	试管4
颜色深浅程	++	﹣	+	C

回答下列问题：

为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性，某生物兴趣小组以三种微生物提取液（提取液中淀粉酶浓度相同）为材料进行了如下实验：

		试管1	试管2	试管3	试管4
实验操作	蒸馏水（mL	2	2	2	A
	pH=8缓冲液	0.5	0.5	0.5	0.5
	淀粉溶液（mL）	1	1	B	1
	甲生物提取液（mL）	C
	乙生物提取液（mL）		D
	丙生物提取液（mL）			E
	37℃的水浴，保温1小时
	总体积（mL）	3.8	3.8	3.8	3.8
	滴加等量的碘液
实验结果	颜色深浅程度	++	﹣	+	F
	注：“+”显色，“+”越多显色越深；“﹣”不显色

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：

研究酶的化学性质和作用机理，有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践．请回答下列问题：

某兴趣小组进行了如下实验：

实验目的比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性

	试管1	试管2	试管3	试管4
蒸馏水	2	2	2	A
pH=8缓冲液	0.5	0.5	0.5	0.5
淀粉溶液	1	1	1	1
甲生物提取液	0.3
乙生物提取液		0.3
丙生物提取液			0.3
总体积	3.8	3.8	3.8	B

实验原理略．

实验材料：三种微生物淀粉酶提取液（提取液中酶蛋白浓度相同）等．

实验步骤：

a．取四支试管，分别编号；

b．按右表内要求进行操作；

c．将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时；

d．在上述四支试管冷却后滴入碘液；

e．观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅；

实验结果（注：“+”显色，“++”显色更深；“﹣”不显色）

	试管1	试管2	试管3	试管4
颜色深浅程	++	﹣	+	C

回答下列问题：

谷物中淀粉酶活性是影响啤酒发酵产酒的重要因素．某科研小组设计实验比较小麦、谷子、绿豆萌发前后淀粉酶活性，过程及结果如下．请分析回答：①谷物的萌发：取等量小麦、谷子、绿豆的干种子，都均分为两份，一份置于适宜条件下培养，至长出芽体为止．②酶提取液的制备：分别制备三种谷物的干种子和萌发种子的酶提取液．③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中，加入1mL1%的淀粉溶液，25℃保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．④吸光度的测定：在试管中加入斐林试剂、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光光度计依次测定各试管的吸光度．⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对，计算出淀粉酶活性，结果如下：

名    称	小麦	谷子	绿豆
未萌发谷物的淀粉酶活性/U•g﹣1	0.0289	0.0094	0.0074
萌发谷物的淀粉酶活性/U•g﹣1	5	1.7645	0.0395

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β﹣葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶

Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率．经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因．

某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究．原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8．在40℃、pH7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了126%、150%．回答下列问题：

以下是有关酶的两个实验，根据表格内容分析回答：

表1

操作步骤	操作方法	试管A	试管B	试管C
1	加淀粉溶液	2mL	2mL	2mL
2	加淀粉酶溶液	1mL	1mL	1mL
3	温度处理	60℃	100℃	O℃
4	加碘液	2滴	2滴	2滴

关于探究果胶酶最适用量的实验，叙述错误的是（   ）

为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如下图。据图回答下列问题：

将普通大麦经过一系列处理，最终可以得到麦芽汁浸出液。在麦芽汁浸出液中加入一定量蛋白胨、葡萄糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：

某工程人员在适宜的温度和pH下，利用苹果泥和一定浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如图。对实验失误可能的原因分析及改进方法都合理的是（   ）

某小组为了解某种加酶洗衣粉对蛋白质的水解作用，将相同大小的蛋白块置于等量相同适宜浓度的洗衣粉溶液中，蛋白块消失所需的时间与温度的关系如图所示。下列有关叙述正确的是（   ）

下列有关酶的叙述，错误的是（  ）

操作顺序的先后是实验成败的关键，下列操作先后顺序正确的是（    ）