组织培养基的成分及作用 知识点
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备MS培养基主要成分包括：
（1）大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等
（2）微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等
（3）有机物、植物激素（有时需要加）
大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
植物激素的影响：常用的植物激素：生长素、细胞分裂素
生长素：产生于嫩的芽、叶和发育的种子，有促进细胞生长的作用。
细胞分裂素：主要产生于根尖，有促进细胞分裂的作用。
①生长素和细胞分裂素的作用：
| 使用顺序 | 实验结果 |
| 先使用生长素，后使用细胞分裂素 | 有利于细胞分裂，但不利分化 |
| 先使用细胞分裂素后使用生长素 | 细胞既分裂也分化 |
| 同时使用 | 分化频率高 |
生长素>细胞分裂素：有利于根的分化，抑制芽的形成
生长素<细胞分裂素：有利于芽的分化，抑制根的分化
生长素=细胞分裂素：促进愈伤组织生长
组织培养基的成分及作用 知识点题库
玉米（2N=20）是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品．下面图甲表示玉米深加工流程，图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式，请回答下列问题．
（1）玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用，纤维素酶是由3种组分组成的复合酶，其中的可将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素分解菌能合成纤维素酶，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是 ；其实验流程是：土壤取样→选择培养→→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．
（2）使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌，对培养基的要求是 ． 如果还要对土壤中该类微生物进行计数，则接种方法是
（3）玉米胚芽油不易挥发，宜选用压榨法或法从玉米胚芽中提取．
（4）在育种过程中，若改变图乙过程所使用的培养基中的 ，则可能不会形成愈伤组织，而是形成胚状体．若愈伤组织没有形成根，但分化了芽，其原因可能是 ．
（1）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：
（2）腐乳制作主要菌种是它能产生 两种酶将水豆腐中两种主要大分子有机物分解成人体能吸收的具鲜味的小分子有机物．
（3）分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O．若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述 成分，并加 入物质．该培养基能否培养月季花药，为什么？
（4）提取胡萝卜素的过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是 ．胡萝卜素粗品鉴定的方法是
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（1） Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的基因（填“含有”或“不含有”）启动子．若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因（基因序列未知），需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是．在PCR体系中需加入其中的（填“全部”或“任意1种”或“其中2种”）引物，若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为种．
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（2） 在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有基因，其中是驱动基因转录的酶识别和结合的位点，而能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为．图示将目的基因导入受体细胞的方法是．
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（3） 步骤Ⅳ中产生的细胞团称为，步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中的浓度比例，以便获得幼苗．
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（1） 愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得、和小分子有机物等营养物质．
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（2） 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具有根、茎和叶的植物体．这一过程必须给予光照，其原因是利用光能制造，供试管苗生长发育．
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（3） 题干中培养出试管苗的方法是，培养成的试管苗属于体；然后用秋水仙素处理获得二倍体植株，这种育种方式的最大的优点是：．
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（4） 确定花粉发育时期最常用的方法是：．
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（1） 选取四倍体兰花叶片时，要选择的叶片作为外植体；外植体消毒过程中主要使用的两种消毒试剂是（标明浓度）．
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（2） 植物激素中和是启动细胞分裂的关键性激素；①阶段产生更多生长素的前提下， （填激素名称）的作用呈现加强的趋势．
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（3） 与正常细胞相比，愈伤组织细胞在结构上具有的特点，②过程的实质是．
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（4） 实验室提取植物芳香油的方法有蒸馏、压榨和等．
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
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（1） 从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
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（2） 影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到培养基上；
②。
③。
预期实验结果和结论：
④。
⑤。
⑥。
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（1） 许多国家都对熟肉制品中亚硝酸盐的含量做出了明确的规定，如我国规定肉制品中亚硝酸盐的残留量不得超过30mg/kg。
Ⅰ.检测肉类制品中亚硝酸盐的残留量可使用光电比色法。将熟肉制品后置于烧杯中，加水搅拌使得亚硝酸盐充分转移至溶液中。过滤，用水清洗残渣和烧杯，再次过滤，合并滤液。往滤液中加入适量NaOH和ZnSO4溶液，目的是。用少量水淋洗沉淀2-3次，将在容量瓶中定容。对样液进行显色，并测定OD值。实验过程中应使用相同光程的比色杯，若制作标准曲线时的比色杯光程大于测样液时的比色杯光程，则测出的样液中亚硝酸盐含量会。
Ⅱ.为了分析熟肉制品中所含微生物的种类，可用固体培养基培养并鉴定熟肉制品中的微生物。在配制固体培养基时，按配方将营养物质、琼脂等加至大烧杯中，混合均匀，加热至琼脂融化后，再通过转移至三角瓶中准备灭菌。若培养基中含有葡萄糖，则对应的灭菌压力条件为。
Ⅲ.肉毒杆菌是熟肉制品中常见的致病菌，其分泌的肉毒杆菌毒素是一种毒性极强的生物毒素。肉毒杆菌通常在罐头食品等密封环境中生存和繁殖，据此推测下列生物中与肉毒杆菌代谢习性最接近的是（A．假丝酵母B．醋化醋杆菌C．乳酸菌D．大肠杆菌）。
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（2） 铁皮石斛是一种珍贵的兰科药用植物，具极高的中药学价值。铁皮石斛的种子小而多，不含胚乳，因此自然繁殖率低，但市场需求量大，导致自然资源日渐枯竭。科研人员尝试通过以下两种方法实现铁皮石斛的快速繁殖。回答下列问题：
Ⅰ.方法一：提高种子萌发率。以MS培养基为基础，添加适宜浓度、种类和的激素则有利于种子的萌发。与LB培养基相比，MS培养基的区别是含更多的蔗糖和。在配制MS培养基时，若所需添加的微量元素太少不利于称量，可将其配成浓度为配方的5–10倍的，用时稀释。种子萌发后可发育为幼苗。
Ⅱ.方法二：诱导愈伤组织形成。取野生石斛的叶、茎等组织作为，需先进行清洗和处理。诱导愈伤组织时中要提供适宜的培养基、温度、光照等条件。愈伤组织可被进一步诱导为试管苗，这一过程中BA和NAA的作用为（A．NAA促进石斛根系发育，BA有抑制作用；B．NAA和BA均促进石斛根系发育；C．BA促进石斛根系发育，NAA有抑制作用；D．NAA和BA均抑制石斛根系发育）。
Ⅲ.定植前还需进行炼苗，主要是逐渐降低环境中的，以便幼苗适应自然环境。
Ⅳ.研究表明，若用含激素的MS培养基培养幼苗，得到的植株发育不佳，叶片全部枯黄，无花芽形成；若愈伤组织在含X激素的MS培养基上预培养2周，再转入正常的生根、发芽培养基中，得到的植株有极高的花芽形成率。已知种子中也存在一定量的X，据此推测X激素最可能是。
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（1） 欲以田间取得的材料制备植物细胞原生质体，去壁前要对植物组织进行清洗和消毒，植物组织上的消毒液要用洗去。去壁时通常采用含有酶的溶液处理植物组织，处理液的渗透压要正常植物细胞。获得的原生质体呈形。
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（2） 在诱导丛状苗生根时，为提高生根效果，需适当减少某种植物生长调节剂，二是适当改变培养基的浓度。需减少的植物生长调节剂是，生根培养基的浓度比发 芽培养基的。通常选择幼嫩的植物组织作为组培材料，原因是。（写出1点即可）
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（3） 采用诱变育种方式对植物耐盐性状改良时，通常用一定强度的γ射线照射愈伤组织，愈伤组织细胞因而易发生基因突变，组培培养基中需要添加来筛选耐盐植株。
外植体→①愈伤组织→②胚状体→脱毒苗→草莓植株
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（1） 外植体能够形成幼苗所依据的原理是 。培育脱毒苗时，一般选取 作为外植体，其依据是 。
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（2） 研究表明，多倍体草莓产量高于二倍体，利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种：一是使用 (药剂)处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多倍体植株；二是利用 (药剂)诱导草莓体细胞融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多倍体植株，这种育种技术被称为植物体细胞杂交技术。
