（1） 为了从土壤中筛选能有效降解有害有机化合物A的细菌，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌），从功能看该培养基为培养基，在对该菌进行分离、纯化、计数过程中，常采用法接种。实验过程中还需配制空白培养基作为对照，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示，造成这种结果的原因可能是。

（2） 某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。在用该材料提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题，你将如何解决这一问题?。在果汁生产中，为了提高果胶酶的使用效率和产品纯度，一般需要将酶用法进行固定化处理。

（3） 用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用洗涤红细胞，用破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会，降低分离效果。

（1） 取乳腺癌（MCF7）组织块，运用技术获得MCF7细胞用于后续实验。用重组的人蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1 MAb）。

（2） 提取正常组织细胞和MCF7细胞的总蛋白，设置空白对照，加入NRP-1 MAb进行蛋白质免疫印迹，实验结果如下：

该实验结果说明了。

（3） 将MCF7细胞制成单细胞悬液，等量注入4组裸鼠右前腋下，接种后3天开始给药，共给药7次。每隔5天测算一次肿瘤的体积，如下图所示：

对照组注射，从上图中可以看出。

（4） 结合题干信息，综合以上研究请你推测NRP-1 MAb抑制肿瘤的作用机理是。

（5） 注射不同剂量NRP-1 MAb 33天后，剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：

从该结果中可以看出。综合比较（3）和（5）的实验结果，可见中高剂量和低剂量的NRP-1 MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现了不一致性。

（6） 基于以上研究，科学家们对该抗体的用药方式有两种观点：谨慎用药和适宜浓度用药。你支持哪个观点，并说出理由。

（1） 样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是。

（2） 血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是，若要尽快达到理想的透析效果，可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液。

（3） 血红蛋白的纯化是通过法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。

（4） 电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

（5） 一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是。

（1） 微生物培养过程中都需要培养基，微生物不同，所需要的培养基也不同。一般培养细菌的是培养基；培养真菌的是培养基；培养酵母菌的是培养基。这些培养基一般都含有四类物质。

（2） 植物体中含有多种有用的物质，不同物质需要用不同的方法提取，一般提取玫瑰精油用    法，提取橘皮精油用法，而胡萝卜素的提取用法。

（3） 最近引人瞩目的新冠肺炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，由包膜和 RNA 组成，包膜中含有三种糖蛋白，若现在要将新冠肺炎病毒组成成分进行分离，你认为最可能用到的方法是。

（1） 血红蛋白提取和分离一般分为四步，即样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

①样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心，在洗涤红细胞时，离心速度过高和时间过长会使等一同沉淀，达不到分离的效果。洗涤干净的标志是。

②在的作用下，洗涤好的红细胞破裂，释放出血红蛋白。

③粗分离过程中，透析的目的是。

（2） 在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是。

（3） 在装填色谱柱时不得有气泡存在，因为。

（1） 在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、。培养枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培养，目的是。

（2） a-e中蛋白酶产量最高的菌株是（用字母回答），判断依据是。

（3） 利用凝胶色谱法分离提取到的部分蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的到适当高度进行洗脱，结果先洗脱出来的是的蛋白质。

（4） 质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量，设计了如图2所示实验。如果实验结果是，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察实现。

（1） 常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是（填编号）。

编号	①	②	③	④
物品	培养基	接种环	培养皿	涂布器
灭菌方法	高压蒸汽	火焰灼烧	酒精擦拭	臭氧

（2） 称取1.0 g某土壤样品，转入99 mL无菌水中，制备成菌悬液，经后，获得细胞密度不同的菌悬液。甲、乙两位同学分别取菌悬液涂布在固体培养基上，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：。

（3） 为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径的菌落，纯化后获得相应突变菌株。

（4） 在脂肪酶的分离过程中采用凝胶色谱法，此方法是根据分离蛋白质的有效方法；也采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是。

（5） 在制备该酶的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是（答出1点即可）。

（1） 在对样品进行处理时要用洗涤红细胞，洗涤干净的标志是；再加入使红细胞破裂从而释放出血红蛋白。

（2） 将收集的血红蛋白溶液在透析袋中进行样品的粗分离，透析的原理是。

（3） 通过法将样品进一步纯化的过程中，色谱柱不能有气泡存在，原因是。

（4） 电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。图示为几种蛋白质通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱，据图分析，相对分子质量最大的蛋白质是，该样品在凝胶色谱柱中最后流出的蛋白质应该是。