观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验
(一)原理:①DNA主要分布在细胞核内,RNA大部分存在于细胞质中
②甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
③盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
(二)步骤:
1、取口腔上皮细胞制片:
①载玻片上滴一滴0.9%NaCl溶液(维持细胞的形态)
②用消毒牙签取口腔上皮细胞,放在载玻片上的液滴中
③烘干载玻片(固定细胞在载玻片上)
2、水解:(改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色,有利于DNA与染色剂结合。)
①在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸溶液,将烘干的在载玻片放入小烧杯中
②在大烧杯中加入30℃的温水
③将小烧杯放在大烧杯中保温5min
3、冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s(避免多余盐酸影响染色,防止细胞被水流冲走。)
4、染色:
①用吸水纸吸去载玻片上的水分
②用吡罗红甲基绿染色剂染色5min
③吸去多余染色剂,盖上盖玻片
5、观察:先低倍镜观察,再高倍镜观察。(观察时应选择染色均匀、色泽浅的区域,有利于观察染色结果)
注意:盐酸的作用:①改变细胞膜的通透性,从而加速染色剂进入细胞②使染色质中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合
观察时应选择染色均匀、色泽浅的区域,有利于观察染色结果