2014天津高三上学期人教版高中生物月考试卷

1．基因工程技术引起的生物变异属于：(    )

A．染色体变异

B.基因突变

C.基因重组

D．不可遗传的变异

2．华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有(  )

①转基因  ②核移植  ③体外受精  ④体细胞克隆  ⑤胚胎移植

A．①③

B．①④

C．②⑤

D．③⑤

3．植物组织培养的用途中不正确的是：(    )

A.快速繁殖

B．生产新品种

C.生产生物碱

D．生产白细胞介素-2

4．下列有关生物工程方面的叙述中，正确的是：(    )

A．叶肉细胞离体培养时，经再分化过程可形成愈伤组织

B．培养流感病毒时应选用无菌的培养基

C．在青霉菌体内获取青霉素属于基因工程的实例

D．基因工程、细胞工程都能克服远缘物种杂交障碍

6．韩国“首席科学家”黄禹锡曾因发表有关人类胚胎干细胞论文的造假行为，被处以最高处分——撤销教授职务。胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，可以分袈、分化形成各种组织干细胞。再进一步分化形成各种不同的组织细胞。下列相关叙述错误的是(    )

A．治疗性克隆可以克隆器官，治疗疾病

B．神经干细胞具有细胞周期，能够分化形成神经细胞

C．造血干细胞分化形成白细胞的过程是不可逆的

D．如果通过转基因技术，成功改进了某血友病女性的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常。当她与正常男性结婚，婚后所生予女的表现型都正常

7．下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述正确的是(    )

A．超数排卵技术要使用一定的激素如性激素、孕激素等

B．滋养层细胞发育成胎膜和胎盘是在囊胚期

C．卵裂期胚胎中细胞数目及所有细胞体积之和在不断增加

D．胚胎移植实际上是由提供胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同完成的

8．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是

A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作

B．基因工程原则上合成的是自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可合成自然界不存在的

蛋白质

C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作

D．基因工程完全不同于蛋白质工程

9．下列对动物核移植技术的描述不正确的是(   )

A．哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植

B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核

C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞

D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了100%的复制

10．获能的精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜完成受精作用的过程中，为阻止其他精子入卵而产生的生理反应是(  )

①透明带反应    ②卵细胞膜反应  ③顶体反应    ④排卵

A.①④

B．②

C．①②

D．①③

11．在用基因工程技术构建抗除草荆的转基因烟草过程中，下列操作错误的是(  )

A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸

B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C.将重组DNA分子导入烟草原生质体

D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

12．若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAG，它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是(  )

A．该正常基因中有4个CCTAGG序列

B．产生的DNA片段可用核糖核酸连接酶连接起来

C．用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键

D．若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG，用该酶处理后将产生5个片段

13．mRNA上的终止密码子不编码氨基酸，与之相对应的DNA片段位于：(  )

A．编码区下游的非编码区中

B．基因编码区内

C．基因的最末端

D．基因编码区最末端的内含子中

14．酶是生命活动过程中的重要有机物，下列有关酶的叙述错误的是(  )

A．胰蛋白酶是动物细胞工程中常用的工具酶

B．RNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶作用的化学键相同

C．基因工程的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶

D．PCR技术中使用耐高温的Taq酶扩增DNA片段

15．下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是(  )

A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合，形成重组DNA

B．限制性核酸内切酶将一个DNA分予片段切成两个片段需消耗两个水分子

C．Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶

D．用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种

16．如图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒A。若已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导A细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与载体结合，并被导入受体细胞的结果是(  )

A．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细菌

B．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能生长繁殖的细菌

C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培养基上不能生长繁殖的细菌

D．在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培养基上能生长繁殖的细菌

17．下面是获得抗虫棉的技术流程示意图。有关叙述错误的是(   )

A．重组质粒构建过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶

B．图中愈伤组织分化产生的再生植株基因型一般都相同

C．卡那霉素抗性基因中含有相关限制酶的识别位点

D．转基因抗虫棉有性生殖的后代不能稳定保持抗虫性状

18．某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是(   )

A．步骤①所代表的过程是逆转录

B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶

C．步骤圆可用CaCl，处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态

D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原一抗体特异性反应实验

19．我国科学家发现控制水稻产量的基因OsSPL14，将其植入我国南方水稻后，其产量增加了10%左右。下列有关叙述正确的是(  )

A．导入了OsSPL4基因的水稻有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质

B．该技术用到了三种工具酶：限制酶、DNA连接酶和载体

C．用DNA连接酶连接目的基因和质粒，其产物必定是载体与OsSPL14基因形成的重组DNA分子

D．植物细胞作为受体细胞时，可用氯化钙处理

20．下列有关细胞工程的叙述，错误的是(  )

A．将两个动物细胞融合产生新细胞，这体现了细胞膜具有一定的流动性

B．各种组织干细胞分化形成不同组织细胞是基因选择性表达的结果

C．胚胎干细胞有细胞周期，神经干细胞分化形成的神经细胞没有细胞周期

D．用胡萝卜韧皮部经组织培养形成的个体，若有变异，其变异类型可能为基因突变、基因重组和染色体变异

21．下列不属于克隆的是(  )

A．植物体通过体细胞进行的无性繁殖

B．将某肿瘤细胞在体外大量培养繁殖

C．扦插和嫁接

D．将鸡的某个DNA片段导入小鼠的细胞中，并得以表达

22．已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链，可以推断该处：(  )

A．A+T的比例较高

B．C+G的比例较高

C．位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位

D．位于基因的尾端，是转录停止的信号

23．下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH I或EcoR I或Pst I的酶切位真。现用Pst I和EcoR I两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是(    )

A.1为EcoR I，2为BamH I，3为FcoR I，4为PstI

B.1为BamH I，2为EcoRI，3为EcoR I，4为Pst I

C.1为EcoRI，2为Pst，  3为Pst I，4为BamH I

D.1为BamHI，2为EcoRI，3为PstI，4为EcoRI

24生态农业是指运用生态学原理，在环境与经济协调发展的思想指导下，应用现代科学技术建立起来的多层次、多功能的综合农业生态体系。如图为桑基鱼塘生态系统，它是我国南方各省农村比较常见且行之有效的生态系统。下列有关说法不正确的是(    )

A．该系统具有结构协调，合理种养，资源高效利用，内部良性循环，稳定持续发展的特点

B．该生态系统实现光合产物的分层多级利用

C．桑树的凋落物、桑葚、蚕沙撒鱼鱼塘中，经鱼塘内食物链的作用实现了能量的重复利用

D．该体系中获得蚕丝、食品、鱼类，以沼气等，茬经济上和保护农业生态环境上大有好处

25．水稻的花药通过无菌操作，接入试管；经过如下过程培育试管苗。据图分析下列叙述正确的是(  )

A．a、b、c、d中的植物细胞都具有全能性，且全能性的表达程度相同

B．a、b、c的培养基中都有琼脂、有机物、水、植物生长调节剂等物质

C．水稻花药经a-d发育成试管苗的过程涉及有丝分裂：减数分裂等细胞分裂方式

D．调节培养基中，各种营养物质的比例就能诱导b中的愈伤组织分化成试管苗

26.下列关于细胞工程的叙述，较为合理的是(  )

A．植物甲、乙两品种的体细胞杂交获得的杂种植株与甲、乙两种杂交后代的染色体数目相同

B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需蛋白酶的处理

C．聚乙_二醇可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

D．小鼠骨髓痛细胞和未经抗原免疫饷小鼠B淋巴细胞敲合可制备单克隆抗体

27．下列有关基因结构的叙迷，正确的是(  )

A．真核细胞的基因中，编码区也含有不能编码蛋白质的序列

B．原核细胞盼基因中，，编码区的外显子是连续的

C．非编码区是两个基因之间没有遗传效应的区段

D．终止密码子的作用是阻碍RNA聚合酶的移动方式

28．英国伦敦大学医学院通过生物技术，成功对一对丈夫家族有乳腺癌发病史的夫妇的后代进行胚胎筛选，并排除了后代携带致癌基因的隐患。该“设计婴儿”的培育流程如下：通过人工方式得到15个受精卵一所有受精卵生长3天时，抽取一个细胞进行基因检测，剔除含致癌基因的胚胎一选取不含致癌基因的健康胚胎植入妻子子1宫，一个健康的“设计婴儿”得以孕育。下列关于该项“设计婴儿”培育过程中所用技术的叙述，不正确的是

A．通过人工方式获得15个受精卵，需要用到超数排卵和人工受精的手段

B．检测受精卵中是否含有致癌基因，可以用“基因探针”进行检测

C．需要利用基因工程技术对受精卵中的致癌基因进行“基因敲除”

D．将受精卵培养到8-16个细胞阶段可移植入子宫；

29．运用“人工膜技术”制作的携有单克隆抗体的磷脂微球体药物如图所示。当药物被注射到实验鼠血液中一段时间后，首先在某种癌细胞内检测到药物已进入。据此认为，药物进入细胞的方式最可能是(  )

A．药物分子透过微球体与细胞膜的自由扩散

B．抗体与细胞识别后诱发膜融合或细胞内吞

C．药物分子通过识别细胞膜载体的主动运输

D．抗体与细胞识别后诱发微球体的主动侵染

30．下列关于胚胎工程的叙述，正确的是(  )

①胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割

②超数排卵技术要使用一定的激素如促性腺激素

③胚胎移植实际上是产生胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程

④试管婴儿的培育过程属于克隆技术

⑤移植用的胚胎一般取发育到桑椹胚或囊胚时期的

⑥卵裂期胚胎中细胞数目和每个细胞体积在不断增加

A．①②③

B．③⑤⑥

C．②③⑤

D．④⑤⑥

31．现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例，下列说法正确的是(  )

A．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性

B．用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病

C．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到动物细胞培养技术

D．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该要长期给他使用免疫抑制药物

32．下图是一个农业生态系统模式图，关于该系统的叙述，错误的是(  )

A．微生物也能利用农作物通过光合作用储存的能量

B．沼气池中的微生物也是该生态系统的分解者

C．沼渣、沼液作为肥料还田，可以提高农作物对土壤中有机肥料的吸收效率

D.多途径利用农作物可提高该系统的能量利用效率

33．如图为某哺乳动物生殖过程示意图(b为卵细胞）。下列相关叙述中不正确的是(   )

A．动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖

B．动物个体②的产生表明，高度分化的动物细胞核也具有发育成完整个体的潜在能力

C．按照动物个体②的产生方式，后代的性别比例仍为1：1，但这对于动物的进化则是不利的

D．图中a、b、c三种细胞的产生方式，仅c为有丝分裂

34．在植物组织培养过程中，容易获得突变体的主要原因是(  )

A.培养的细胞一直处于不断的分裂状态

B．培养基营养丰富，易于植物生长

C．纺锤丝的形成容易受抑制

D．DNA复制容易受抑制

35．A种植物细胞和B种植物细胞的结构如图所示（仅显示细胞核），将A.B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是(  )

A．二倍体：基因型是DdYyRr

B．三倍体；基因型是DdYyRr

C．四倍体；基因型是DdYyRr

D．四倍体；基因型是DDddYYyyRRrr

36．在下列过程中，可以采用植物组织培养技术的是(  )

①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株

②利用花药离体培养得到单倍体植株

③利用基因工程培育抗棉铃虫的植株

④利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株

⑤无子西瓜的大量繁殖

A.①②③

B.②③④

C.①②④⑤

D.②③④⑤

37．豆科植物和固氮菌互利共生，当把它们分开时，两者的生长都要受到损害，这体现了生态工程什么原理(   ）。

A．系统的结构决定功能原理

B．整体性原理

C．系统整体性原理

D．协调与平衡原理

38．大部分有性生殖的动物，进行的都是体内受精，受耩卵在母体内孕育成一个新个体。下列关于体内受精和早期胚胎发育的叙述，正确的是(  )

A．同种动物的雄性个体和雌性个体进行减数分裂的时期差不多

B.防止多精入卵的第一道屏障是卵细胞膜反应，第二道屏障是透明带反应

C．一般情况下，卵细胞膜内可以有多枚精子，透明带只能有一枚精子

D．早期胚胎细胞的分化最早出现在囊胚期

39．高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，下列有关叙述错误的是(  )

A．题图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团。

B．高等哺乳动胚胎发育经历的时期是受精卵卵裂期桑椹胚_囊胚期原肠胚期_幼体

C．高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束

D．进行胚胎分割时，应选择囊胚期或桑椹胚胚胎进行

40．下列动植物克隆所用技术与原理不相符的是(  )

A．胰蛋白酶处理­――酶的专一性

B．离体植物体细胞培养成愈伤组织——脱分化

C．动物细胞培养——细胞的全能性

D．克降羊的诞生――细胞核的全能性

41．转生长激素基因牛的绝大多数体细胞中都含有人的生长激素基因，但只有在牛的乳腺细胞中才会表达，这最可能与构建基因表达载体上的卿种结构修饰有关(  )

A．标记基因

B．启动子

C．终止子

D．人的生长激素基因

42．下列关于基因工程的叙述，正确的是(  )

A．形成重组DNA分子过程在细胞内进行

B．具有某些标记基因，便于对其进行切割

C．DNA连接酶能够连接被限制性核酸内切酶断开的化学键

D．重组DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的检测与表达

43．经测定某化合物含C、H、O、N、S元素，该化合物不可能具有的…项功能是(   ）

A．与抗原发生特异性结合

B．用于基因工程获得黏性末端，

C．可连接上抗癌药物制成生物导弹

D．细胞中蛋白质合成的直接模板

44．运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有（　　）

A．抗虫基因

B．抗虫基因产物

C．新的细胞核

D.相应性状

45．基因工程程中，需使用特定的限制酶切割目的基因帮质粒，便于重组和筛选。已知限制酶l的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶II的识别序列和切点是↓GATC－。根据图示，判断下列操作正确的是：（　　）

A．质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割

B．质粒用限制酶lI切割，目的基因用限制酶I切割，

C．目的基因和质粒均用限制酶I切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

46．透明带反应发生在(  )

A．排卵时

B．精子与放射冠接触时

C．精子与透明带接触时

D．精子触及卵细胞膜的瞬间

47．在细胞正常分裂的情况下，雄性果蝇精巢中可能含有两个Y染色体的细胞是：(　)

A．减数第一次分裂的初级精母细胞

B．有丝分裂中期的精原细胞

C．减数第二次分裂的次级精母细胞

D，有丝分裂前期的精原细胞

48．右图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合）。若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于8001x时，都不能增殖。下列叙述中正确的是

①实验开始时必须用纤维素酶和果胶酶除去不利于质生质体融合的物质

②要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，可在大于800 lx光照下培养，收集增殖分化的细胞团

③从理论上分析考虑，将融合细胞的培养液放在夫干800lx光照下培养，有3种基因型的融合细胞不能增殖分化

A．①②③

B．②③

C．①②

D．①③

49．英国科学家利用生物工程技术，发明了～种名为“我的皮肤”的生物活性绷带，为皮肤烧伤病人带来福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞标本，再让其在特殊膜片上增殖，5~7天后，将膜片敷到患者伤口上，膜片会将细胞逐渐“释放”，到伤口处，并促进新生皮肤层生长，达到愈合伤口的目的。下列有关叙述中，不正确是(  )

A．人的皮肤烧伤后容易引起感染，主要是由于非特异性免疫机能受损导致的

B．种植在膜片上的细胞样本最好选来自本人的干细胞

C．膜片能否将细胞顺利“释放”到伤口与患者自身皮肤愈合，与两者细胞膜上的糖蛋白有关

D．若采用异体皮肤移植会导致排异反应，主要是由于机体特异性免疫产生相应的抗体

50．北极比目鱼中有抗冻基因。慕编码的抗冻蛋白的氨基酸序列中某区域为11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（　　）

A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程中对比目鱼基因组测序

B．将多个抗冻基因编码区依次相连成新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白

C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选

D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达

5．关于桑椹胚和囊胚的比较，以下说法不正确的是(   )

A．桑椹胚的各细胞结构功能基本相同

B．囊胚期细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变

C．囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的

D．囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的

4．（6分）胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体l是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题；

l)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于_________，为一次获得多个细胞B，往往需要向

共体2内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是________________________.

2)通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是________________.

3)应用3中的细胞D取自囊胚的_______，细胞C取自牛胎儿的________________.

4)应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是_________

的（“相同”或“不同”）。

1．（6分）下图列举了几种植物的育种方式，请据图回答相关问题。

(l)（甲+丁）育种方式称为_______________________________________________

(2)通过丁种方式可以获得脱毒苗，培养过程中c常常取用茎尖的原因是______________。

(3)乙方式通常用射线处理植物的愈伤组织能获得较好效果，原因是___________________。

(4)若a为白菜体细胞，b为甘蓝体细胞，通过（甲+丁）方法培育出的新植株既有白菜生长期短的优点，又有甘蓝易于储存的特性，从分子水平来说，这是由于_____________。

(5)通过甲、丁方法培育出的新植物体能结种子，是因为______________________。

(6)甲、丙两种育种方式与传统杂交育种相比，其优点是___________________。

3．（8分）2n/4n嵌合体胚胎是指用四倍体(4n)胚胎与二倍体胚胎(2n，或胚胎干细胞(ES细胞）进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：

(l)受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵母细胞达到_________时期，才具备受精的能力，而精子需经过___________过程才能和卵母细胞结合，

(2)2N的ES细胞来自胚胎发育过程的__________期，本实验中从功能上说明了该细胞________

(3)2n/4n嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：____________________

(4)ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？_______________________________________

（4分）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst I、Sma I、EcoRI、Apa I等四种限制酶切割位点。请回答：

1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶____________，对____________进行切割。

2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有_________，作为标记基因。

3)图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_______________________过程。

7．（5分）回答下列有关基因工程的问题。

(1)四种质粒含有El和E2两种限制酶的识别位点，表示抗青霉素的抗性基因，表示抗四环素的抗性基因，这四种质粒除抗性基因外长度相等。若将两端用E1切开的基因与用El切开的质粒X-l混合连接，连接后获得的质粒类型有_________。（多选）

A. X-1        B. X-2        C. X-3        D. X-4

(2)若将上图所示Xl、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有_________、___________.

(3)如果X-1，用El酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片断：那么质粒(X-2基因的

长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为___________对碱基。

(4）若将外源的基因两端用E2切开，再与用EZ切开的。x-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X-4的细胞数与含X-I的细胞数之比为1：3，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？____________。

2．（6分）人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题。

(1)制各单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_________，使小鼠产生分泌相应__________的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的____________免疫。

(2)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基瞟呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌岭和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________

成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______________________________________。

(3)此过程生产的单克隆抗体可以与_________。特异性结合，从而诊断早孕。

6．（12分）多聚半乳糖醛酸酶(PG)，能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实交红变软，但不利于保鲜，可利用基因工程的方法以其进行改造。请据图l回答：

提取目的基因

①若已获取PG的mRNA，可通过______获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反义转录，结构A上应具有________酶结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图2-甲所示，请在图2-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是_____________________________________.

(2)用含目的基因的农秆菌感染番茄原生质体后，可用培养基进行筛选。培养24-48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞__________现象来鉴别细胞壁是否再生。

(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与_____________互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄__________，则可确定转基因番茄成功。

(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用__________技术手段使子代保持转基因的优良性状。

(5)改造过程需要的工具酶有_______________，如果在此过程中形成的是平末端，则起“缝合作用的酶是_________________________.

(6)在构建基因表达载体时，除了插入目的基因外，基因表达载体中还需含有___________，在该番茄薪品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做___________。

8．(13分)目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗。菜生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。

实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管，培养皿等。

(1)其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）

a．取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用___________处理，使其分散开来，配制成细胞悬液，将其均匀分成5份，置于5个培

养皿中培养，分别编号。

b．取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号l、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入__________，作为__________组。

c．将步骤b中的配制的溶液分别置于5个培养皿中，摇匀后，在冰箱中培养一段时间。

d．从5个培养皿中吸取适量的培养液置于_____________内，在显微镜下计数，记录数据。

(2)请你纠正上面这位同学操作上的错误

①__________________________________________________________________________;

②__________________________________________________________________________.

(3）另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如下：

a.在该实验中，自变量是__________________________________________.

b．根据实验结果，你能得出的结论是___________________________________.

(4)在体外培养肿瘤细胞时，除了给予一定量的以维持细胞呼吸外，提供_________气体以维持PH值，还需要提供__________环境，合成培养基需特别添加_____________.

（5）若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴（设三次的“一滴”等量）观察，发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为__________h。