第一节 发酵工程的培养基 知识点题库

（1） 艰难梭菌同化作用类型；培养基中加入抗生素的原因是。为获取艰难梭菌的单菌落，在该培养基上还需要添加成分。

（2） 取肠道感染人的加入到无菌水中进行稀释，通过方法分离和计数；如果换成肠道健康的人，为了获得大量的艰难梭菌需要用培养基。

（3） 为治疗这种疾病，科学家提出了两个治疗方案：一是引入健康人的肠道微生物，目的是；二是开发治疗艰难梭菌的口服细菌药片，这种药片对肠道细菌的作用是。

（1） 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、、水、无机盐四类，该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2） 微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是稀释涂布平板法还能，此外，也是测定微生物数量的常用方法。

（3） 为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。

（4） 通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和。培养基一般不使用干热灭菌的原因是。

（1） 步骤1：将枇杷果皮和果园土壤匀浆放入三角瓶中，适度稀释后放入YPD液体培养基培养，28℃摇床培养24小时。推测该步骤的主要目的是。

（2） 步骤2：将培养好的菌液稀释为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-65个梯度，每个梯度至少设计个重复，用法将0.1mL稀释液接种到TTC平板培养基上，28℃（填“静置”或“摇床”）培养2天。经统计，发现稀释梯度为10^-5的平板上平均有40个单菌落，由此可计算出每毫升菌液有个微生物。其中有产酒精能力的酵母在TTC平板上显红色，从用途上来看TTC平板属于培养基。

（3） 步骤3：将筛选出的酿酒酵母经扩大培养后，分别接种到等量的枇杷汁中，密闭培养，每隔2h观察各菌株的，筛选出发酵能力强的酿酒酵母。还可根据乙醇与试剂反应呈现灰绿色，来检验酒精的产生。

（1） 霍乱弧菌与病毒、真菌在结构上的主要区别分别是。

（2） 用含硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆酸钠、蔗糖的TCBS培养基能从天然样品中有效地分离出霍乱弧菌。这种TCBS培养基属于               。

（3） 造成霍乱弧菌这一特点的机制可能是               。

（4） 不食不洁生水和生贝壳类海产品是防止霍乱发生措施之一，这属于传染病预防措施中的。

（5） 下列各图中，能准确反映霍乱弧菌疫苗接种者血清中抗霍乱弧菌抗体的浓度随时间变化趋势的是               。

（1） 从土壤中分离地衣芽孢杆菌时，常从面粉厂周围取土样，其原因主要是此处土样中。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是。

（2） 筛选地衣芽孢杆菌时可选用平板划线法或进行接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是。实验前需要对超净工作台进行处理。

（3） 筛选地衣芽孢杆菌的培养基中，唯一的碳源物质是。通过向培养基表面滴加碘液，挑选出透明圈直径与菌落直径比值大的单菌落，以获得的菌种进行扩大培养。

（1） 选择青藏高原祁连山地区进行菌种筛选，原因是。

（2） 筛选原油降解菌的培养基中应加入作为唯一碳源；从功能上看，该培养基属于培养基。

（3） 在实验室中，玻璃和金属器材一般采用方法进行灭菌。用平板划线法纯化细菌时，第2次划线及其以后划线总是从上次划线的末端开始，目的是。

（4） 用稀释涂布平板法培养细菌，要定期取样进行菌落计数，一般选择菌落数在的平板进行计数。

（1） BTB培养基以为唯一氮源，使用法进行灭菌。待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是。 

（2） 将污泥样品梯度稀释后，使用将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在环境中培养2-3天后，挑选显色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。 

（3） 将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶空检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是。 

（4） C/N（碳氮含量比）对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示： 

 

 科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是。 

（1） 利用发酵法生产燃料酒精，是各国研究者研究的重点。请回答下列问题：
Ⅰ.若以大麦种子为发酵底物，则需将大麦种子进行处理，使其产生更多淀粉酶以利于糖化。实践生产中，通常不以粮食为发酵底物，而以植物秸秆为底物，其原因是。
Ⅱ.为筛选出能产纤维素酶的酵母菌，（可/不可）从含熊猫粪便丰富的土壤中分离。现称取1.0g某土壤样品，进行梯度稀释，将其稀释100倍的操作思路是，分别取0.1mL经100000倍稀释后的悬液涂布于固体培养基上，一段时间后每个培养基平均长出了16个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌个。该过程得到的菌株所产的纤维素酶活性较弱，在此基础上选育优良菌株的方法有（答出两种方法）。
Ⅲ.选出优良菌株后进行工业化生产燃料酒精，此时培养基中除纤维素外（需/不需）添加氮源。影响发醛效果的因素有温度，pH、培养基以及等（答出两点即可）。

（2） CAR-T疗法即嵌合抗原受体T细胞疗法，基本过程是获取患者的T淋巴细胞，装载上具有识别肿瘤抗原的受体，体外扩增后回输至患者体内，进而识别并攻击自身的肿瘤细胞。
Ⅳ.该过程选用患者自身T淋巴细胞的优点是。将患者体内分离得到的T淋巴细胞制成细胞悬液时（需/不需）经胰酶处理。
Ⅴ.利用酶获取识别肿瘤抗原的受体基因，然后将其后的产物连接到某逆转录病毒的遗传物质上。
Ⅵ.然后利用该逆转录病毒去侵染T淋巴细胞以实现转化。可利用作探针来检验目的基因是否在T细胞内成功表达并转移到细胞膜上。筛选出成功改造后的T淋巴细胞（CAR-T细胞）进行培养，需要在培养液中添加以支持T淋巴细胞的生长。为使T淋巴细胞的体外扩增更为有效，科学家研发了一种支架，在其中添加后，可模拟辅助性T淋巴细胞的功能。把扩增好的CAR-T细胞通过静脉回输到病人体内，开始进行肿瘤细胞免疫治疗。