第二节纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得知识点题库

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了和。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是和。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种
作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越。

苯磺隆是我国北方麦田经常使用的一种除草剂，它能被土壤中某些微生物降解，从而减轻对环境的污染，如图是从土壤中分离降解苯磺隆菌株的操作流程图．

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有四类，该实验所用的选择培养基是．

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加的激素有，这些植物激素在添加使用时，如果要达到使细胞既分裂又分化的目的，正确的做法是．

（3）使用接种环进行划线的目的是，划线的操作要求是．

（4）某研究小组采用透明圈法对另一种除草剂甲嘧磺隆的降解菌进行分离筛选，该透明圈是指，对得到的符合要求的菌株应当

请回答下列与生物技术实践相关的问题：

（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取．科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶．
①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到培养基上（功能），可得到能分解纤维素的细菌．
②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、
（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒．果汁发酵后是否产生酒精，可以用来检验，在酸性条件下该物质与酒精反应呈现的颜色为；用染料使染色体着色，发现一酵母菌细胞核中有17条染色体，该酵母菌是倍体．
（3）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有、、等．

焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼，是当前焦化行业环保治理的难点．某同学通过查阅资料发现可通过微生物降解方法处理焦化厂污染物．下列有关分析错误的是（）

A . 应该从农田土壤中筛选目的菌 B . 配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选 C . 利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化 D . 逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到能高效降解污染物的优质菌株

欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（）

A . 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B . 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C . 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D . 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

回答有关微生物的培养与应用的问题：

（1）在微生物培养过程中，灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外；常对玻璃器皿采用的灭菌方法为；在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是。
（2）常用的微生物接种方法有两种，但只有可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际结果（填“高”或“低”）。
（3）能将作物秸秆中的纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即。
（4）分离尿素分解菌时，使用固体培养基的原因是；在培养基中加入指示剂，尿素分解菌的菌落周围会出现红色。

玉米秸秆含有大量的纤维素，用纤维素酶分解秸秆后的产物可以生产酒精．研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．请分析回答：

（1）纤维素酶至少包括、、三种组分，在这三种酶的作用下，纤维素最终被水解成．
（2）培养基中加入的化合物A是，为微生物的生长提供碳源，这种培养基属于培养基，对培养基进行灭菌时常用的灭菌法为．
（3）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用染色法；如果培养基某部位出现现象，则说明存在纤维素分解菌．
（4）用获得的糖液发酵生产乙醇，常用的微生物是，在发酵液中，该菌可以生长繁殖，而绝大多数其他生物受到抑制．常用法对该菌进行计数，检测是否产生酒精的常用试剂是，会变为色．
（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后才能倒掉，这样做的目的是保护环境．

尿素分解菌能分解尿素是因为可以合成（）

A . 尿素酶 B . 脲酶 C . 蛋白酶 D . 细菌酶

某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按如表处理：

组别	处理
A组	打开培养皿盖，距地面0.3米处暴露15分钟
B组	打开培养皿盖，距地面0.6米处暴露15分钟
C组	打开培养皿盖，距地面0.9米处暴露15分钟
D组	打开培养皿盖，距地面1.2米处暴露15分钟
E组	不打开培养皿盖

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目．回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是．若E组的培养基表面有菌落生长，说明了．
（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供和．“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了．
（3）实验过程特别强调温度控制，请简要说明下列温控措施的目的：
①“待培养基冷却至室温”的目的有．
②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是．
（4）培养微生物时将培养皿倒置的目的是．实验结束后，对使用过的培养基应进行处理．

下列说法错误的是( )

A . 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离 B . 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C . 在统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D . 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

今年我国猪肉价格持续上升与非洲猪瘟有着密切联系。该疫病传染性强，致死率高，且目前没有特效药和疫苗，故及时检出病猪后扑杀为当前工作之首要。

（1）非洲猪瘟病毒是一种DNA病毒。请在答题纸的图中用方框标出DNA的基本单位。若以图中的甲链为模板转录RNA，其碱基序列是。（写在答题纸图空格中）

（2）下表为某培养基配方，该培养基可用于培养微生物。试分析该培养基是否可用于猪瘟病毒培养？（是/否），为什么？。

KH₂PO₄

NaHPO₄

MgSO₄·7H₂O

葡萄糖

琼脂

营养成分溶解后，

自来水定容至1000mL

1.4g

2.1g

0.2g

10.0g

15g

抗原抗体检测目前普遍用于评价人和动物的免疫功能。现常见的检测样品种类包括检测抗原和抗体两种。

（3）对送检样品进行抗原、抗体检测依赖于（抗原与抗原/抗原与抗体/抗体与抗体）发生的特异性结合。检测时用的抗体可以利用的方法来制备。
（4）某同学体检时检测出乙肝病毒抗体，经了解，该同学之前并未接种过相应的疫苗，他获得的免疫来自于_________。

A . 人工免疫 B . 天然免疫 C . 先天免疫 D . 后天获得免疫
（5） DNA疫苗是直接将编码保护性抗原的基因，通过体外重组与质粒结合，直接注射，从而使动物体获得免疫力。若将来研发出猪瘟病毒的DNA疫苗，接种疫苗的猪是否可以称为转基因猪？（是/否），为什么？。

若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为90个,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL,稀释液的稀释倍数为10⁵,则每克样品中的活菌数约为(　　)

A . 9×10⁸个 B . 9×10⁷个 C . 9×10⁵个 D . 9×10⁶个

现代工业生产中往往采用规范的流程进行发酵生产以提高生产效率,如图是发酵工程生产产品的流程图。据图回答下列问题。

（1）在啤酒生产中,使用①改造的啤酒酵母,可以加速发酵过程,缩短生产周期,①是;高产青霉素菌种是通过②培育的,②是;③是细胞工程。
（2） ④表示,⑤表示。
（3）整个过程的中心阶段是发酵,在此阶段需要随时取样、检测等,以了解发酵进程,还要及时添加,同时严格控制。
（4）若发酵所得产品是单细胞蛋白,则⑥是往往采用的方法进行提取。

研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌（目标菌），并对其进行研究。回答下列问题：

（1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氨源、水、无机盐和。
（2）进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是。
（3）从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B和C三种菌落（如图1所示）。如果要得到淀粉酶活力最高的菌株，应该选择（填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，据此说明A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是。
（4）经筛选获得了一菌株，能同时产两种不同的淀粉酶X和Y，其相对分子量分别为45000和58000。采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离时，先洗脱出来的是淀粉酶（填“X”或“Y”），其原因是。
（5）在研究过程中获得了三种淀粉酶，其酶活性与反应温度和pH值有关（如图2和图3所示），假如要选择一种耐酸耐高温的淀粉酶进行后续研究，应该选择淀粉酶（填“甲”“乙”或“丙”），理由是。

《本草纲目》记载：“橘皮，苦能泄、能燥。”柑橘的果皮不仅可以用于中药材，还可以用于提取芳香油，果肉可以吃、榨汁。回答下列问题：

（1）中药服用前至少经过15分钟以上沸水煎煮，该过程也起到（填“消毒”或“灭菌”）作用。实验室常用的灭菌方法有（写出两种即可）。
（2）腐烂的橘皮表面呈现青绿色，是因为表面长出了青霉的菌落。若要对青霉进行分离纯化，应该选用的接种方法更简便的是。纯化培养基中除碳源外，还需要添加的物质有（写出三种即可）。
（3）用柑橘果肉榨取果汁，加入适量果胶酶的目的是。探究果胶酶的用量实验中，判断果胶酶用量是否合适的因变量是。
（4）提取橘皮精油不宜采用的方法，以免原料焦糊和有效成分水解。压榨过程中，为了使橘皮油易与水分离，需要分别加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO₃和5%的，并调节pH为7~8。

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）

①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐

A . ①③⑤⑧ B . ②④⑥⑧ C . ①③⑤⑦ D . ①④⑥⑦

下列关于微生物的培养与分离操作，叙述错误的是（　　）

A . 在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风 B . 牛肉膏应和称量纸一起放入烧杯中溶化 C . 玻璃器皿可用干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法灭菌 D . 涂布器通过灼烧灭菌后，待其冷却后再涂布菌液

木质素广泛存在于植物细胞壁，是自然界含量仅次于纤维素的有机化合物。利用微生物降解木质素对于造纸工业废水处理、生产乙醇燃料具有重要意义。科研人员开展相关研究，从秸秆堆积处地表下筛选出高效分解木质素微生物，初筛培养基成分见下表。回答以下问题：

成分	木质素	硝酸铵	硫酸镁	磷酸二氢钾	磷酸氢二钠	琼脂	蒸馏水
含量	2.0g	1.33g	0.5g	1.0g	0.2g	20g	1000mL

（1）该培养基从功能上来看属于培养基，其依据是。
（2）该培养基的灭菌方法是。为进一步分离纯化，在含有愈创木酚的鉴别培养基上进行接种的方法是。
（3）该类微生物会产生分解木质素的漆酶，利用凝胶色谱法可以提纯该酶，其原理是。
（4）研究发现CU²⁺对漆酶活性有影响，其结果见下图所示，据图分析可以得出的结论是。

下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（　　）

A . 利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物 B . 酵母菌酿酒时，不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒 C . 果胶经过果胶酶和果胶甲酯酶水解后的产物是半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯 D . 尿素固体培养基在灭菌并完全冷却后再加入经过滤灭菌的尿素溶液

银杏是我国特有珍贵的古老树种，被称为“活化石”。秋天金黄色的银杏叶既是一道美丽的风景，也有极高的药用价值。其中的黄酮类化合物具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。回答下列问题：

（1）利用萃取法对银杏叶中的黄酮类活性成分进行提取，在萃取之前需要对银杏叶进行粉碎和干燥处理，原因是。
（2）通常可用对提取物进行纯度鉴定。
（3）研究发现，95%乙醇提取物对黑曲霉、黄曲霉、杜青霉、草酸青霉和灰绿曲霉的生长有抑制作用。为了检测这些霉菌对提取物的敏感性，将菌种充分稀释后采用（接种方法）接种到平板上培养时一般（填“需要”或“不需要”）将平板倒置，请说明理由。

第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 知识点题库

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