二、细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术 知识点题库
下列关于克隆技术的叙述中，错误的是( )
A . 可利用原生质体进行植物组织培养
B . 原生质体可作为转基因的受体细胞
C . 植物克隆的技术基础是植物组织培养
D . 动物克隆的技术基础是核移植
用a表示骨髓瘤细胞，b表示经相应抗原处理的B淋巴细胞，则细胞融合过程中两次筛选目的分别为（ ）
A . a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养
B . a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养
C . a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养
D . a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养
下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为 ( )
A . 抗体、T淋巴细胞
B . 抗原、T淋巴细胞
C . 抗体、B淋巴细胞
D . 抗原、B淋巴细胞
对细胞全能性的表达正确的是( )
A . 离体的植物细胞均能够表现出全能性
B . 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
C . 花粉可培育成单倍体植株是细胞全能性的表现
D . 单克隆抗体的制备依据的原理是细胞的全能性
下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的有（ ）
植物细胞工程 | 动物细胞工程 | |
特殊处理 | 酶解法去除细胞壁 | 胰蛋白酶处理配制细胞悬液 |
融合方法 | 物理方法，化学方法 | 物理方法，化学方法，生物方法 |
典型应用 | 人工种子，种间杂种植物 | 单克隆抗体的制备 |
培养液的区别 | 麦芽糖是离体组织赖以生长的成分 | 动物血清不可缺少 |
A . 0处
B . 1处
C . 2处
D . 3处
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖．将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体．请回答下列有关问题：
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（1） 生产单克隆抗体时，一般不直接利用效应B淋巴细胞，主要原因是．
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（2） ①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是．
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（3） ②过程为培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是．
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（4） ④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠内培养．体内培养与体外培养相比，其优点是．
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（5） 为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入，理由是杂交瘤细胞可利用途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖．
下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是（ ）
A . 先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞
B . 为避免病毒感染，应用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合
C . 体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素
D . 经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，该疫苗生产和抗体制备的部分流程如图。请回答：
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（1） ①过程需要使用酶，若要在体外获得大量的A基因，常采用PCR技术，该技术必须用到等酶。
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（2） 限制酶Bam HⅠ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，在构建A基因表达载体过程中， 所用的载体质粒上有该酶的一个切点。一个质粒分子经Bam HⅠ切割前后，分别含有、个游离的磷酸基团。质粒被限制酶Bam HⅠ切割后所形成的黏性末端是。
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（3） 过程③的原理为，获得的X是。
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（4） 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是。
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（5） 对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的进行特异性结合检测。
某实验室做了下图所示的实验研究，请据图回答：
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（1） 与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较。
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（2） 过程②是诱导干细胞中基因的结果。
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（3） 过程③需要用进行筛选，得到的Z细胞还需进行培养和，经多次筛选，就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
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（4） 科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂，通过基因工程技术将该基因导入待定的细胞(填细胞名称)，来制备单克隆抗体，基因导入并成功表达后，该细胞将具有的特点，在上述操作中用到了PCR扩增仪，其作用是。
《战狼2》电影中的“拉曼拉病毒”学名埃博拉病毒，冷锋注射的疫苗，是具有抗埃博拉病毒功能的血清。下图中，甲乙是两种方法制备单克隆抗体的流程图。请回答下列问题：
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（1） 甲图中将B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，常用的诱导因素有、、电激等。
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（2） 甲图中经选择性培养的①细胞，还需进行培养和检测，经多次筛选，就可获得足够数量的②细胞。
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（3） 细菌作为受体细胞进行转化时，常用处理，使其处于状态以利于吸收外部DNA分子。将重组DNA导入烟草细胞采用最多的方法是。
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（4） 乙图中将烟草细胞培养成转基因烟草植株涉及的最基本技术是，为了诱导烟草细胞生根，须设置培养基中生长素与细胞分裂素的比1（填“大于”“等于”或“小于”）。
埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题：
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（1） 基因疫苗即DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病原体的RNA并利用RNA合成DNA，构建cDNA文库，cDNA文库中的基因（选填“可以”、“不可以”、“部分”）进行物种间的基因交流。
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（2） 以GP蛋白作为疫苗比利用毒性减弱的埃博拉病毒作疫苗更安全，其原因是。为了从牛分泌的乳汁中提取GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的，驱动转录过程。
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（3） 为了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的进行操作。转基因牛是否培育成功，可以通过技术从分子水平进行检测。
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（4） 科研人员利用经EBO免疫后小鼠的与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合以形成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”抗击EBO。
在传染病的治疗中，抗体发挥着越来越重要的作用，下图表示利用现代生物科技手段生产抗体的两种途径，据图回答下列问题：
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（1） 图1和图2所示过程中，都必须用到的动物细胞工程技术是。用PCR技术扩增无限增殖基因除需要原料、能量、模板外还需要和。
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（2） 图1中②过程与植物原生质体融合的不同之处是还可用诱导，图2中B所示的细胞特点是。
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（3） 培养杂交瘤细胞时应保证被培养的细胞处于的环境。抗体在抵抗外来病原体入侵方面具有十分重要的作用，这体现了免疫系统的功能。
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（4） 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，其最大的优越性是。
生物学实验中常常遇到筛选问题，以下筛选不能够成功的是（ ）
A . 用同位素示踪技术筛选融合的原生质体
B . 用抗原—抗体杂交技术筛选特定的杂交瘤细胞
C . 含高浓度盐的培养基培养愈伤组织筛选耐盐突变体
D . 利用纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌
“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示,分析回答下列问题。
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（1） 图中A过程是从小鼠的中取得B淋巴细胞,提取该细胞之前,给小鼠注射特定的抗原,B过程与植物原生质体融合方法很相似,但其特有的诱导因素是,B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是。
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（2） 从培养基的成分来看,动物细胞培养的培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入一些天然成分,如。培养过程中,为了清除代谢物,防止其积累对细胞造成危害,应定期。
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（3） 特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有等优点。
现代人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为
RNA 病毒，该病毒表面的 A 蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
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（1） 过程⑦采用的实验技术是，在此过程中特有的诱导因素为，获得的X是。
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（2） 浆细胞和骨髓瘤细胞融合，至少需经 次筛选才能选出产生所需单一抗体的杂交瘤细胞，然后要用 技术在体外培养。培养时配置的培养基成分与培养植物相比不同的是含有葡萄糖和等。其中培养环境中的空气必须加5%的CO2 ， 目的是为了。
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（3） 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是。
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（4） 对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒的进行比较；或用图中的进行特异性结合检测。
新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵人人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒融合的粘附或人侵，故抗体药物的研发已成为治疗HAT筛选新冠肺炎的研究热点之一。图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。下列相关叙述，不正确的是（ ）
A . 研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射刺突蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞产生抗体和浆细胞
B . 杂交细胞经抗体检验后即可用于单克隆抗体的生产
C . 单克隆抗体可以制成诊断盒，用于疾病的诊断
D . 单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通常采用双抗体夹心法对抗原进行定量检测，具体过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A . 可将Myo基因导入小鼠骨髓瘤细胞，来制备抗Myo的单克隆抗体
B . 抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，用于诊断急性心肌梗塞
C . 固相抗体和酶标抗体虽都能与抗原结合，但二者仍具有不同的结构
D . 加入酶标抗体的目的是通过测定酶促反应的产物量来判断待测抗原量
单克隆抗体应用前景广阔，某科研所获取单克隆抗体的过程如图。下列叙述错误的是（ ）
A . PCR过程中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
B . 为了便于构建基因表达载体，可在引物的5′端加上限制性酶切位点
C . 检测筛选的目的是筛选出能够无限增殖又能产生专一抗体的细胞
D . 细胞A通常是对实验动物进行特定抗原注射后获取的B淋巴细胞
关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ）
A . 可以制成诊断盒．用于疾病的诊断
B . 可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C . 可以利用基因工程技术生产
D . 可以在生物体内生产，不能体外生产
新型冠状病毒是一种RNA病毒，其表面的刺突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的黏附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图，请回答下列问题：
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（1） 步骤①必须给小鼠注射，目的是，取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。
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（2） 步骤④诱导融合操作后，体系中出现多种类型细胞的原因是。
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（3） 步骤⑤培养的结果是；还需进行步骤⑥的原因是。
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（4） 步骤⑥含多次筛选，筛选依据的基本原理是，选出的杂交瘤细胞的特点是。
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