课题3 血红蛋白的提取和分离 知识点题库

（1） 实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是。洗涤红细胞时要用（填溶液）反复洗涤、离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入。

（2） 得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去。

（3） 然后通过（填方法）将样品进一步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是（填方法）。

（1） 血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：、粗分离、和．

（2） 实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．

①加入柠檬酸钠的目的是．

②以上所述的过程即是样品处理，它包括红细胞的洗涤、、分离血红蛋白溶液．

（3） 收集的血红蛋白溶液要进行粗分离，其方法是．

（4） 然后通过法将样品纯化，样品纯化的目的是．最后经进行纯度鉴定．

（5） 电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离．

（1） 将实验流程按先后顺序补充完整：、。

（2） 凝胶色谱法的基本原理是根据分离蛋白质。

（3） 洗涤红细胞的目的是去除,洗涤干净的标志是。为防止血液凝固，在采血容器中通常要预先加入（抗凝剂）。

（4） 下图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入过程的示意图,正确的加样顺序是。

（5） 在装填色谱柱时不能有气泡存在，因为，降低分离效果。如果，说明色谱柱制作成功。

（1） 在以淀粉为底物测定A₃酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是，也可采用斐林试剂检测的增加。

（2） 在A₃的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是和。

（3） 本实验中，研究人员在确定A₃的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是。

（4） 在制备A₃的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是 （答出1 点即可）。

（1） 将实验流程补充完整：A为，B为。凝胶色谱法是根据而达到蛋白质分离的有效方法。

（2） 洗涤红细胞的目的是去除；离心速度过高和时间过长会使一同沉淀，达不到分离的效果。释放血红蛋白的过程中起作用的是。

（3） 在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是。

（4） 如果红色区带，说明色谱柱制作成功。

（1） 蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步，凝胶色谱法一般用于这一步，凝胶色谱法是的有效方法；所用凝胶的化学本质大多为。

（2） 科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的、大小及形状不同，在电场中的不同而实现分离。

（3） 血红蛋白是一种含铁的蛋白质，它存在于中。若要根据某人血红蛋白的含量数据来判断其健康状况，则体检时（选填“要”或“不要”）空腹做。若某人患有慢性贫血，则体检单上会显示血红蛋白含量。

（4） 人口腔上皮细胞中（选填“含有”或“不含有”）血红蛋白，（选填“含有”或“不含有”）控制血红蛋白合成的基因，判断是否含有该基因的依据是。