第一章无茵操作技术实践知识点题库

下列有关平板划线操作的叙述，错误的是（）

A . 在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧 B . 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C . 蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D . 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

请回答下列有关生物技术方面的问题。

（1）果酒是人们喜爱的健康饮品。果酒是酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵而产生的，其反应式为；酒精的产生与否可用来进行检测。
（2）牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基，其中的蛋白胨为微生物的生长提供了等营养物质。人类饮用水的安全与人体健康关系密切，欲将所取的南河水样品进行大肠杆菌的分离与计数，可用法来完成。在用平板划线法接种时，在第二次及以后的划线操作时，总是从开始划线，原因是。
（3）植物组织培养基同样需要防止杂菌污染，为检验制备的培养基是否感染杂菌，可采取的方法是将的培养基在适宜条件下培养，观察有无菌落生长

下列是对土壤微生物开展探究活动的三个案例，请在相应的空白处作答。

（1）案例Ⅰ：探究落叶是否是在土壤微生物的作用下腐烂（分解）。

设计思路：

组别

对照组

实验组

处理情况

不做处理的带落叶的土壤

进行过处理的带落叶的土壤

将等量的带落叶的土壤,用带有编号的相同的塑料袋分别包扎好，并埋在 5cm深的土壤中

对实验组土壤应该进行处理，尽可能排除的作用。

（2）案例Ⅱ：探究土壤微生物对淀粉的分解作用。
实验步骤：
将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间。
另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊。在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯中加入。
在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10 mL；从B烧杯中取20mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10 mL；
在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入，并进行处理。
观察各试管的，记录实验结果。
（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌。实验过程中，应将土壤浸出液接种在以为唯一碳源的培养基上，并用（试剂）加以鉴别。

下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )

A . 植物组织培养常用的是固体培养基 B . 可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 C . 在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 D . 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌

美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌，可缩小铀污染的范围，而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存．科学家为了研究这种地杆菌的生理特性，需对其进行分离和培养．请回答：

（1）培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、等．制备培养基时常用的灭菌方法是灭菌．接种时使用的接种环灭菌方法是灭菌．

（2）为分离出能够还原铀的地杆菌，可在培养基中加入，从用途上看，这种培养基称为培养基．

（3）对地杆菌计数时，常采用的方法是法．在稀释倍数为10⁶倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL），统计菌落数分别为240、250、260，则稀释前1mL菌液中所含细菌为个．

（4）获取地杆菌后如要临时保存，可将其接种在培养基上，等长成菌落后放在4℃的冰箱中保存．

关于微生物培养基的说法正确的是（）

A . 牛肉膏不能提供碳源 B . 培养硝化细菌不加有机碳 C . 刚果红使纤维二糖染色 D . 酵母菌酿酒时需持续供氧

自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对水体有一定的净化作用．请回答：

（1）培养硝化细菌时，将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是．培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于培养基．

（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的．若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行处理．

（3）实验：探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小．取含铵盐的液体培养基均分成等分，其pH值可依次调节为，培养相同的时间后，可通过测定培养基中的来判断硝化细菌分解能力的大小．

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基土，固体培养基中必须加入，从功能上讲，该培养基属于培养基．
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和．
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力．
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有、灼烧灭菌和．

日前微博传言手机细菌比马桶多．如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果．回答下列相关问题：

（1）该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、．
（2）据图，两电视台均采用法接种，该方法需要（多选）
A．接种环 B．酒精灯 C．移液管 D．涂布器 E．无菌水
（3）通过观察菌落的，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物．两电台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：．
（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10²的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为个/平方厘米．该实验对照组该如何设置．

实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示．从实验结果分析以下叙述，不正确的是（　　）

A . 链霉素能阻止结核菌的生长 B . 链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效 C . 链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D . 链霉素可以用于治疗伤寒病人

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等．某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图．（注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供适合的和条件；另一方面需要确保无处不在的其它微生物无法混入，如培养皿和培养基都可以用法进行灭菌．
（2）据图，研究小组采用的是法分离和计数金黄色葡萄球菌．由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管，并编号1﹣4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是．
（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%﹣15%NaCL的肉汤中生长；本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长
（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确．据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为．

2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉一坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维菌素，其衍生产品降低了河盲症和淋巴丝虫病的发病率，同时还能有效对抗其他寄生虫病，治疗效果显著．聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，在实验室内通过成千上万链霉菌培养物筛选出一些较有发展前途的菌株，这就是阿维菌素的来源．

（1）制备链霉菌培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是
（2）图①是在纯化过程中通过法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，共需要灼烧接种环次．图②表示的是用法接种培养后得到的结果．
（3）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现表明菌已分离．在此过程中，正确的操作是　　

A . 每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次 B . 划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种 C . 在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风 D . 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连．

某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

组别	处理
A组	打开培养皿盖，距地面0.3米处暴露15分钟
B组	打幵培养皿盖，距地面0.6米处暴露15分钟
C组	打开培养皿盖，距地面0.9米处暴露15分钟
D组	打开培养皿盖，距地面1.2米处暴露15分钟
E组	不打开培养皿盖

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了。
（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供和。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了。
（3）实验过程特别强调温度控制，请简要说明下列温控措施的目的：
①“待培养基冷却至室温”的目的有。
②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是。
（4）培养微生物时将培养皿倒置的目的是。实验结束后，对使用过的培养基应进行处理。

下列实验所用主要试剂及仪器对应正确的一组是（）

A . 观察植物细胞的质壁分离及复原——清水、盐酸、光学显微镜 B . 观察细胞的有丝分裂——解离液、清水、甲基绿、光学显微镜 C . 探究酵母菌种群数量的动态变化——酵母培养液、血球计数板、光学显微镜 D . 分离以尿素为氮源的微生物——MS培养基、酚红、涂布器、酒精灯

微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：

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（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和B：、A：等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是。
（2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D：，其中需用接种环进行操作的是。
（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的，培养基中加入指示剂培养后，若变红则其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E：和F：过程，一般通过观察的有无挑选出所需菌种。

某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

(NH₄)₂SO₄	NaCl	MgSO₄_·7H₂O	K₂HPO₄	1%橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4ml	定容至100ml	7.0g

（1）在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是。
（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落。
（3）菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是。
（4）研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明。

为了验证胰岛素具有促进动物细胞摄取葡萄糖和细胞增殖的作用，请根据以下提供的实验材料，完善实验思路，并预测实验结果。

实验材料：培养瓶、动物细胞培养液、小鼠肝细胞（具增殖能力）、葡萄糖测定仪、显微镜、血细胞计数板、生理盐水、用生理盐水配制的一定浓度的胰岛素溶液等。

实验思路：①取培养瓶若干个，分为甲、乙两组，每组设置若干个重复样品。甲组中的每个培养瓶加入_____________作为对照组；乙组中的每个培养瓶则加入_____________。测定每组培养瓶中的初始数据。

②将各样品在适宜条件下培养合适的时间后，_____________，求每组平均值并进行统计分析。

请回答：

（1）完善实验思路。
（2）将预测的实验结果在下列双纵轴坐标系中用柱形图的形式呈现。
（3）分析与讨论：
①用血细胞计数板计数时，压在方格线上的细胞只计上的细胞数。本实验也可以采用测量的方法反映培养液中的细胞数量变化。

②胰岛素作用于肝细胞，可促进肝细胞，抑制肝细胞。

野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变而无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，数字代表培养基，ABC表示操作步骤。有关说法错误的是（）

A . ①②为完全培养基，③④为基本培养基 B . A操作的目的是提高突变菌株的浓度 C . B操作可用涂布器蘸取菌液均匀的涂布在②表面 D . 经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到高效降解化合物A的细菌（目的菌），实验的主要步骤如下图所示。下列有关叙述错误的是（）

A . 该培养基中化合物 A 可能既作碳源又作氮源 B . 实验需要振荡培养，由此推测目的菌呼吸作用的类型是有氧呼吸 C . 培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量显著降低的培养液接种 D . 若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用平板划线法进行计数

纤维素酶能将纤维素降解成葡萄糖，可用于处理造纸厂排放的污水。研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种到MEA培养基上，经过一系列分离纯化，最终筛选出了高产纤维素酶的真菌。请回答下列问题：

（1）在MEA培养基中加入链霉素用于真菌的筛选，根据培养基的用途划分，该培养基属于培养基。
（2）接种后倒置培养一段时间，MEA培养基上会观察到菌落，菌落是指。
（3）实际生产中，通过培养真菌获取的纤维素酶蛋白往往与其它物质混合在一起。因此，得到纤维素酶的粗提取物后，先要通过进行粗分离，再将粗分离得到的纤维素酶加入中进行洗脱、收集、纯化，最后常通过的方法鉴定纤维素酶的纯度。
（4）用于生产实践前，还需要测定纤维素酶的活性。纤维素酶的活性以来表示。
（5）游离的纤维素酶易受温度、pH等因素的影响，且不易分离和回收。为了提高纤维素酶的重复使用率，降低生产成本，请根据所学知识提出一项解决措施：。

第一章 无茵操作技术实践 知识点题库

第一章无茵操作技术实践知识点题库