第4章 基因工程 知识点题库

（1） 目的基因的获取：为在短时间内大量获得目的基因，可用扩增的方法，其原理是．

（2） 基因表达载体的构建：基因表达载体的组成，除具有复制原点、目的基因外，还必须具有启动子、、标记基因等．启动子是一段有特殊结构的DNA片段，是识别和结合的部位．标记基因的作用是为了．

（3） 将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入某单子叶植物细胞，常采用的方法是；将目的基因导入动物细胞，常采用的受体细胞是；将目的基因导入大肠杆菌，大肠杆菌应先用处理，使其处于能吸收周围DNA的状态．

（4） 目的基因的检测与鉴定：检测目的基因是否表达，在分子水平上可采用的检测办法是；在个体水平上，如抗虫棉，需要做．

（1） 在FPP合成酶基因表达过程中，完成过程①需要酶催化，过程②在核糖体上进行，需要的物质有、ATP、tRNA等．

（2） 根据图示代谢过程，科学家在设计培育能生产青蒿素的酵母细胞过程中，需要向酵母细胞中导入等基因．

（3） 实验发现，酵母细胞导入相关基因后，这些基因能正常表达，但酵母合成的青蒿素仍很少，根据图解分析原因可能是FPP合成了固醇，为提高酵母菌合成的青蒿素的产量，通过基因改造，使FRG9酶活性．

（4） 利用酵母细胞生产青蒿素与从植物体内直接提取相比较，明显的优势有、成本低、适合各地生产等．

（1） 系谱分析表明，发育型青光眼最可能是单基因显性遗传病．根据上面系谱推测，致病基因应位于染色体上，其遗传时遵循定律．

（2） 检查发现，发育型青光眼患者角膜小梁细胞中M蛋白异常．为研究其病因，研究者用含绿色荧光蛋白基因G或红色荧光蛋白基因R的质粒、正常人M蛋白基因（M⁺）或青光眼患者M蛋白基因（M^﹣），构建基因表达载体，分别导入Hela细胞中进行培养，一段时间后检测培养液和细胞中荧光的分布情况，实验分组及检测结果如表（ 示只含荧光蛋白基因的质粒片段； 示含荧光蛋白基因和M蛋白基因的质粒片段，此时两基因表达的产物是一个整体）．

		1组	2组	3组	4组	5组	6组
导入Hela细胞的质粒（局部）							和
荧光检测	细胞内	有红色荧光	有绿色荧光	有红色荧光	有绿色荧光	有红色荧光	有红色荧光和绿色荧光
	培养液	无荧光	无荧光	有红色荧光	有绿色荧光	无荧光	无荧光

①构建基因表达载体时必需的工具酶是 ．

a．解旋酶     b．DNA连接酶    c．Taq酶    d．限制酶    e．逆转录酶

②荧光蛋白在此实验中的作用是 ．

③据上表推测，发育型青光眼的病因是 ， 最终导致小梁细胞功能异常．

（3） 表中第实验可以为“发育型青光眼是显性遗传病”这一结论提供重要证据．

（4） 为进一步研究M蛋白出现异常的原因，研究者提取了M^﹣基因进行测序，然后与M⁺基因进行比对，其结果如图2：分析可知，患发育型青光眼的根本原因是基因中的碱基对由变成了 ， 最终导致M蛋白的发生了改变．

（1） 为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的_______。

（2） 水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过过程，培养出愈伤组织，然后用法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。

（3） 为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明。

（4） 将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的 NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若则说明转基因植株获得了耐盐特性。

（1） 目前，基因工程中使用的限制酶主要是从生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA 文库”的过程中需要使用 DNA 连接酶的是(填基因组文库、cDNA 文库或基因组文库和 cDNA 文库）。               

（2） 在培育转基因克隆绵羊过程中，运用方法除去卵母细胞的细胞核，通过化学试剂使该细胞与供体细胞融合，进而构建重组胚胎。

（3） 培育过程中，科研人员将 omega—3 合成酶的基因片段转移到了该羊基因组中使其发生进行转化，转化指的是。利用 PCR 技术进行扩增目的基因的前提是。

（4） 建造海底人工鱼礁，其目的是改善海洋环境，是实现海洋渔业可持续发展的举措之一，这体现了生态工程所遵循的    原理。十九大提出“绿水青山就是金山银山”，要实现这一目标不仅需要对破坏的生态环境进行恢复，还要考虑当地人的经济发展和生活需要，这主要遵循了生态工程的原理。

（1） 为了获得大量的SARS冠状病毒N蛋白目的基因，可以采用PCR技术在体外扩增，该技术还需要dNTP、酶以及引物等，扩增三轮需要的引物数量为个。

（2） 若双链DNA几乎具有等量的净电荷，且在高于等电点的pH溶液中带负电荷。利用琼脂糖凝胶电泳进行分离和纯化DNA分子主要依据不同，采用外加电场使其分开。在电泳槽中还需要加入作为参照物进行鉴定。

（3） 小鼠被抗原蛋白免疫后，可以从中获取细胞Ⅰ。细胞Ⅰ中可能包含多种能产生抗体的细胞，原因是。

（4） 为了分离出只能产生mAb的细胞Ⅱ，需要用技术对杂交瘤细胞进行筛选。目前可将图中的作为疫苗，预防SARS冠状病毒引发的疾病。

（1） 图中切割花色基因C和质粒的限制酶应选择。基因工程中，目的基因和载体通常用相同的限制酶进行切割，其原因是。

（2） 图中①过程利用农杆菌转化法。当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的，吸引农杆菌移向这些细胞。图中构建基因表达载体时，需要将花色基因C插入质粒的T—DNA中，其主要原因是。检测构建的基因表达载体是否成功导入叶肉细胞，需在培养叶肉细胞的培养基中加入。

（3） ②过程的目的是让已经分化的细胞失去其特有的而转变成未分化细胞。③过程主要是将②过程得到的愈伤组织转接到培养基上进行培养，诱导出甲。若甲可以作为制造人工种子的材料，则甲可表示。

（1） 使用方法一时，在细菌细胞中合成的胰岛素原需在（填“蛋白酶”“DNA酶”或“脂肪酶”）的作用下才能变成具有活性的胰岛素；为使胰岛素基因能顺利进入细菌细胞，应用处理细菌细胞，被处理后的细胞称为细胞。

（2） 方法二将目的基因导入受体细胞常用的方法是要确保人胰岛素基因只在牛的乳腺动物中表达，应该采取的措施是在人胰岛素基因的首端加上。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品，因而称为。

（3） 用基因工程生产的胰岛素被注射到患者血液中容易被分解，治疗效果会受到影响。科学工作者以胰岛素的结构规律为基础，对胰岛素基因进行修饰，从而对传统胰岛素进行改造，生产出不易被分解的高效胰岛素，这属于生物工程中的范畴。