实验材料:白萝卜.
实验用具:粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻棒、镊子、载玻片、天平、纱布.
实验药品及试剂:蒸馏水、NaCl、95%酒精、甲基绿染液(遇DNA呈蓝绿色)、双缩脲
试剂、蛋白质标准样品.
请你根据所提供的条件参与实验设计并回答问题:
①向经纱布过滤得到的滤液中加入 , 直至沉淀析出.经滤纸过滤,将滤纸上的沉淀物放入试管中,加入1mL蒸馏水,振荡,用于鉴定.
②除去蛋白质的滤液中,加入 , 用玻棒轻轻搅拌,有白色絮状沉淀产生.
经滤纸过滤,用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片,用于鉴定.
①在用于蛋白质鉴定的试管中,加入双缩脲试剂,产生紫色反应;同时将和1mL蒸馏水放入另一试管,加入双缩脲试剂,产生紫色反应.观察到两支试管中颜色基本一致,说明 .
②在用于DNA鉴定的载玻片上,滴加甲基绿染液,白色絮状沉淀呈现蓝绿色,说明 .
③通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测,说明 .
上述操作过程正确的顺序是( )
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份.每份10g.剪碎后分成两组,一组置于20℃、
另一组置于﹣20℃条件下保存24h.
DNA粗提取:
第一步:将上述材料分别放人研钵中,各加入l5mL研磨液,充分研磨.用两层纱布过滤.
取滤液备用.
第二步:先向6只小烧杯中分别注人10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精
溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上.
第三步:取6支试管,分别加入等量的2mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物.
DNA检测:在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂.混合均匀后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表.
材料保存温度 |
花菜 |
辣椒 |
蒜黄 |
20℃ |
++ |
+ |
+++ |
﹣20℃ |
+++ |
++ |
++++ |
分析上述实验过程,回答下列问题:
①结论1:与20℃相比,相同实验材料在﹣20℃条件下保存,DNA的提取量较多.
结论2:.
②针对结论I.请提出合理的解释:.
①0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液
②2.00mol/L的NaCl溶液
③0.14 mol/L的NaCl溶液
④体积分数为95%的酒精溶液
( 1 )步骤一中向鸡血细胞溶液中加入防止血液凝固,向鸡血细胞液中加入并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
( 2 )步骤二:过滤后收集含有DNA的滤液。
( 3 )步骤三、四的操作原理是,步骤四通过向溶液中加入调节NaCl溶液物质的量浓度为mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
( 4 )步骤七:向步骤六过滤后的滤液中,加入等体积的冷却的静置2~3 min,溶液中会出现色丝状物,这就是粗提取的DNA。
( 5 )步骤八:DNA遇二苯胺试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈色。二苯胺试剂要否则会影响鉴定的效果。