单克隆抗体的制备过程知识点

单克隆抗体：由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子。
抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
原理：一种浆细胞产生一种抗体，浆细胞在体外不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖；浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
过程：

优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
应用：用单克隆抗体可以快捷、准确地诊断和治疗一些疾病。
单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”（借助单克隆抗体的导向作用），也有少量用于治疗其它疾病。

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生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂 (　　)。

A . 能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制 B . 能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C . 选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 D . 能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成

单克隆抗体（单抗）实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是

A . 单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位 B . 单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术 C . 在单抗的制备过程中必须经过至少两次细胞筛选 D . 只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞

产生专一抗体的杂交瘤细胞，通过大规模培养，就可以获取大量的单克隆抗体．下列有关这项技术的分析，错误的是

A . 单克隆抗体的最主要优点就是特异性强，灵敏度高，能够大量制备 B . 单克隆抗体最广泛的用途是作为“生物导弹”治疗癌症 C . 单克隆抗体作为诊断试剂，具有快速、高效、简易、准确的优点 D . 运用同位素标记的单克隆抗体可以定位诊断癌症、心血管畸形等疾病

利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(　　)

A . 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B . 体外培养单个效应B细胞(浆细胞)可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C . 将等量效应B细胞(浆细胞)和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D . 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β－淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β－淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是

A . 胚胎移植技术 B . 胚胎干细胞技术 C . 单克隆抗体技术 D . 基因治疗技术

单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出目的细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞 (　　)
①B淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融合细胞　
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　⑤杂交瘤细胞

A . ①②③④ B . ①③⑤ C . ②④ D . ②③

关于现代生物技术应用的叙述错误的是（）

A . 蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B . 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C . 植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D . 动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养

将小鼠骨髓瘤细胞与一种浆细胞融合，融合的细胞经培养产生单克隆抗体，下列相关叙述错误的是（）

A . 浆细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 B . 浆细胞与骨髓瘤细胞融合常在聚乙二醇或灭活的病毒诱导下完成 C . 获取浆细胞前，要给小鼠注射相应的抗原 D . 如果细胞为两两融合，则培养液中一共可以收集到3种不同的融合细胞

某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是（　　）

A . 过程①诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变 B . 过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养 C . 丙细胞既能持续分裂又能分泌单一的抗体 D . 过程③、④所用的培养基都含有聚乙二醇

应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品，请据图回答：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是、，②过程常用的方法是。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有。
（3） prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是细胞，Ⅲ代表的细胞具的特点是。
（4）在抗虫棉培育过程中，经④过程，重组Ti质粒使目的基因进入受体细胞，并整合到该细胞的上。

牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是( )

A . H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B . 应选用原肠胚做雌雄鉴别 C . 鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D . 用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体

有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交过程中要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用．下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

（1）若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上．具有一对隐性纯合基因（rr或hh）的个体，在光照强度大于800lx时都不能生长．要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是．
（2）若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是，这种育种方法的优点是．
（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞，则d细胞特点是．由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有的特点．生产上一般不能通过直接培养浆细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是
（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解．请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来．

有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是（）

A . 用固体培养基培养 B . 用滋养层细胞支持生长 C . 能进行传代培养 D . 需要对细胞进行研磨破碎获得产物

下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。下列相关叙述正确的是（）

A . 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键 B . Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞 C . 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测 D . 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术

为解决人类治疗时出现如人体免疫系统识别而产生人抗鼠抗体等问题，科学家们通过构建人免疫蛋白（Ig）转基因小鼠来生产单克隆抗体。

（1）构建人免疫蛋白转基因小鼠时，为避免小鼠细胞自身Ig基因表达而产生的免疫排斥，要选择自身Ig基因缺陷的小鼠细胞作为受体细胞，并通过操作导入重组DNA。将经筛选后受体细胞进行、再将胚胎移植到处理的代孕鼠子宫内，经代孕母鼠分娩后培育、筛选获得人免疫蛋白（Ig）转基因小鼠。
（2）制备单克隆抗体时，取经抗原免疫的转基因小鼠脾细胞和，电刺激使之融合，筛选出杂交细胞后进行抗体检验，然后培养能产生抗体的阳性细胞并再次进行抗体检验，筛选出的阳性克隆可称为单抗细胞株。
（3）检测受体细胞是否合成抗体的方法是；基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比，最突出的优点是。
A.纯度高 B.亲合力强 C.非异源性 D.稳定性高

多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。请回答问题。

（1）科研人员将纤维蛋白作为注射到小鼠体内，激活过程产生抗体。
（2）科研人员利用上述小鼠制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8），请说明制备的基本技术流程。
（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物，但当吞噬细胞中的ROS大量产生并释放时，会毒害周围神经元。NADpH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究单克隆抗体5B8的作用机制，研究人员检测了5B8处理后，吞噬细胞中NADpH氧化酶和ROS的含量，结果如图。

①由于细胞中GADpH蛋白，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比组检测结果，可知纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADpH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。

③另有试验结果显示，单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因。

“筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列有关叙述错误的是（　　）

A . 基因工程育种时，需要筛选出含有目的基因的受体细胞 B . 单倍体育种时，需要对F₁的花药进行筛选后才可继续组织培养 C . 胚胎移植前，需要对来自供体母牛子宫内的胚胎进行质量筛查 D . 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞

新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道粘膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请判断下列表述正确的是（）

A . 研制中必需先注射完整的新冠病毒免疫小鼠以激活免疫细胞 B . 细胞X为免疫后获得的记忆T细胞 C . 研制过程中需用S蛋白筛选所需的杂交瘤细胞 D . 研制的单克隆抗体可以与ACE2受体结合，以防止新冠病毒入侵

在抗击新冠疫情的战斗中，中国科研人员在新冠病毒的检测、疫苗研制等方面取得了举世瞩目的成就。请回答相关问题。

（1）抗体血清学检测具有血液标本更易获取、操作简单快捷、降低了医护人员在标本采集和检测过程中被感染的风险等优势。抗体血清学检测的原理是。但是感染初期的患者不能检测到阳性，其原因是。
（2）在制备单克隆抗体时，相应的B淋巴细胞不能无限增殖，必须与细胞融合成杂交瘤细胞。
（3）新冠病毒核酸检测可采用荧光定量PCR方法。由于病毒的RNA稳定性差，需要加入逆转录酶得到病毒的。PCR扩增前需要根据N蛋白基因(靶标区域)的核苷酸序列设计合成两种以及能与靶标区域互补的荧光探针(该探针结构完整时不产生荧光)。在PCR扩增时还需要加入和酶，退火时荧光探针会和DNA一条链结合，在延伸时荧光探针会被相关酶降解而产生荧光。据此推断阳性被检测者在相同PCR循环后荧光(更强或更弱)。
（4）腺病毒载体疫苗是用经过改造后无害的腺病毒作为载体，拼接上新冠病毒的S蛋白基因。在此过程中不能用噬菌体作为载体的原因是。

2022年3月11日，国务院应对新型冠状病毒肺炎联防联控机制综合组印发《关于印发新冠病毒抗原检测应用方案（试行）的通知》显示，在核酸检测基础上，增加抗原检测作为补充。随后国家药监局批准多款抗原检测试剂盒上市，其中一种很重要的方法就是胶体金法，如图所示。将胶体金标记试剂（胶体金标记抗体或单克隆抗体）吸附在连接垫上，当待检样本加到试纸条一端的样品垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解连接垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗体区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，会呈现肉眼可见的红色。请回答以下问题

（1）胶体金检测法中，如果检测线和质检线都变红，则结果为阳性，如果检测线不变红，质检线变红，则结果为阴性。如果检测线变红，质检线不变红，则结果为（填“阳性”“阴性”或“不能确定”）
（2）此方法可以检测抗原或者抗体，其原理是。根据（1）问对于结果的描述，推测检测线上固定的物质能与结合（填“待测物”或“被胶体金标记的物质”），质检线上的物质能与结合（填“待测物”或“被胶体金标记的物质”）。
（3）此方法所用单抗的制备过程，需要和融合，这个过程发生的变异类型为。融合之后的细胞需要经过次筛选。
（4）如果用此方法检测新冠抗体，连接垫上放被胶体金标记的新冠抗原，检测线上（填“可以”或“不可以”）也放新冠抗原，原因是。

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