单克隆抗体的制备过程知识点题库

老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β–淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降。某些基因的突变会导致β–淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（）

A . 胚胎移植技术 B . 胚胎干细胞技术 C . 单克隆抗体技术 D . 基因治疗技术

下列关于克隆技术的叙述中，错误的是(　　)

A . 可利用原生质体进行植物组织培养 B . 原生质体可作为转基因的受体细胞 C . 植物克隆的技术基础是植物组织培养 D . 动物克隆的技术基础是核移植

动植物细胞工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有广泛的用途。下列有关说法不正确的是（）

A . 脱离母体后，给予适宜的营养和条件是植物细胞表现出全能性的必要条件 B . 运用植物组织培养、植物体细胞杂交、动物细胞培养、转基因植物的培养技术培育生物新品种，操作过程中都能形成愈伤组织 C . 单克隆抗体可以制成诊断盒用于疾病的诊断、可以与药物结合用于病变细胞的定向治疗 D . 动物细胞培养时培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液

下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为 ( )

A . 抗体、T淋巴细胞 B . 抗原、T淋巴细胞 C . 抗体、B淋巴细胞 D . 抗原、B淋巴细胞

将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是( )

A . ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B . 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体 C . ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D . 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图分析回答问题：

（1）图中A过程之前需进行的操作是。
（2）图中B过程常用、聚乙二醇或电激等诱导完成。
（3）用于大规模培养的“细胞X”的名称是细胞，其特点是既能，又能产生。
（4）根据物理性质分类，图中体外培养所用的培养基类型为。若为合成培养基，为满足营养需要，往往还需要加入。

某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（　　）

	比较内容	植物细胞工程	动物细胞工程
A	特殊处理	酶解法去除细胞壁	用胃蛋白酶处理后制成细胞悬浮液
B	融合方法	物理方法、化学方法	物理方法、化学方法、生物方法
C	典型应用	人工种子、种间杂种植物	单克隆抗体的制备
D	培养基区别	蔗糖是离体组织赖以生长的成分	动物血清不可缺少

A . A B . B C . C D . D

“筛选”是生物技术中常用的手段，下列筛选不能成功的是（）

A . 基因工程中，在培养基中添加特定的抗生素，筛选出导入质粒的受体细胞 B . 在细胞工程中，利用双亲细胞的特性，在特定的选择培养基上，可对杂种细胞进行筛选 C . 可在棉花试验田中，设置抗虫接种实验，筛选抗虫棉 D . 基因工程中，通过抗原﹣抗体杂交实验，筛选已正确表达目的基因蛋白质的转基因生物

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品．请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是， ②过程常用的方法是．
（2） ③过程培养到阶段，然后采用技术，培育出转基因犊牛．
（3） prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是细胞，Ⅲ代表的细胞具有的特点．
（4） ⑤过程采用的技术是．此项技术遵循的原理是．

下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程，请回答下列问题：

（1）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有，目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是。对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和检测，经多次筛选获得足够数量的该类细胞。
（2）单克隆抗体制备的关键技术是技术。单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是。
（3）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中的制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或用图中的进行特异性结合检测。

制备单克隆抗体的过程中要经过两次筛选，其中第一次筛选需要在培养液中加入某些试剂，该试剂应该能够( )

A . 阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 B . 选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 C . 选择性抑制淋巴细胞DNA复制 D . 选择性抑制杂交瘤细胞的DNA复制

单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：

（1）过程③常用的方法是。
（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是，细胞Ⅱ应具有的特点是。
（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用。
（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和检测。
（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的作为疫苗。

小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达．下列相关叙述正确的是（　　）

A . 设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列 B . 用PCR方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列 C . PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶 D . 一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞

请回答下列有关生物工程方面的问题：

（1）基因工程的核心是。将目的基因导入植物细胞最常见的方法是；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是。
（2）植物体细胞杂交技术中，诱导原生质体融合的化学方法一般是用作为诱导剂。动物细胞工程中技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程的一项重要应用是制备单克隆抗体，该过程的杂交瘤细胞中发生的遗传信息流动有DNA→DNA，。
（3）胚胎工程中，为了获得产奶量高的奶牛，需取囊胚期细胞做性别鉴定。若对囊胚进行胚胎分割，要注意，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

现代生物科技中筛选是一个重要过程。请回答下列技术有关筛选问题：

（1）过程③是杂交瘤细胞的培养，在体外培养时培养基中需要提供一定浓度的CO₂ ，目的是。杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第一次筛选的目的是。
（2）过程②诱导融合运用的原理是，该过程中区别于植物原声质体融合的方法是用
处理。植物原生质体融合后，需从种两两融合的细胞中筛选出杂种细胞的原声质体。
（3）研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因，该技术是利用的原理，使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶（XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ）的切点如图所示，则用和处理两个基因后，可得到酶D基因和转运肽基因的重组基因，选用这两种酶的原因是。

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，则试管中细胞的种类数和能增殖的细胞种类数分别是（）

A . 5和1 B . 5和3 C . 3和1 D . 3和3

单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题：

（1）在制备抗HSV-1的单克隆抗体的过程中要用到技术和动物细胞融合技术。
（2）制备此单克隆抗体过程中，给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白相当于，使小鼠体内发生体液免疫，产生分泌相应抗体的B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定选择培养基进行检测，最终可获得的杂交瘤细胞。
（3）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞，体系中出现多种类型细胞的原因是。
（4）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，还需对上述杂交瘤细胞进行培养和抗体检测，最后将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠的腹腔内使其增殖，从培养液或小鼠中提取大量的单克隆抗体。
（5）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别HSV-1蛋白，其原因是该抗体具有等特性。

用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（　　）

A . 从小鼠脾脏中获取B淋巴细胞 B . 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 C . 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D . 诱导融合后筛选出杂交瘤细胞进行培养可获取单克隆抗体

新型冠状病毒是一种RNA病毒，其表面的刺突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的黏附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图，请回答下列问题：

（1）步骤①必须给小鼠注射，目的是，取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。
（2）步骤④诱导融合操作后，体系中出现多种类型细胞的原因是。
（3）步骤⑤培养的结果是；还需进行步骤⑥的原因是。
（4）步骤⑥含多次筛选，筛选依据的基本原理是，选出的杂交瘤细胞的特点是。

回答下列（一）、（二）小题：

（一）活性染料应用广泛，但其产生的废水含盐量高、有机质高、色度高，对环境污染严重。研究小组利用活性黄色染料筛选能降解活性染料的微生物菌种，以用于水体污染治理。

（1）采样：在附近采集活性污泥，加入适量的，通入氧气，促进微生物的以备使用。
（2）菌种筛选：取活性染料配置成500mg/L的培养基分装于5个锥形瓶，经后分别加入1mL的含菌种的污泥，置于中培养一段时间后，选择的锥形瓶中的微生物进一步分离提纯。
（3）纯种分离：配置相应浓度的活性染料固体培养基后，若要操作简便，可利用法筛选得到纯的菌种。
（4）菌种保存：分离得到的菌种可接种到培养基，置于4℃冰箱保存。
（5）（二）2018年非洲猪瘟病毒传至我国并对养猪业构成严重威胁，该病毒是一种双链DNA病毒，可编码多种蛋白质。非洲猪瘟病毒表面的主要结构蛋白p22蛋白，可以诱导猪产生抗体。工业上可利用转基因技术生产p22蛋白疫苗，并制备相应的单克隆抗体。请回答下列有关问题：
p22蛋白疫苗的制备和鉴定。与p22蛋白基因及质粒有关的限制酶切位点如下图所示，已知不同种限制酶切割出的黏性末端不同。

（LacZ基因能表达出β-半乳糖苷酶，使无色的半乳糖苷分解，进而使菌落呈现蓝色）

①根据p22蛋白基因的序列设计一对引物，通过技术扩增特定的DNA以获取目的基因；②构建重组DNA，利用酶（写出酶的名称）分别切割目的基因和质粒，以减少连接产物的种类并避免目的基因与质粒反向连接；③用重组质粒转化感受态细胞，并将受体细胞涂布在含氨苄青霉素的LB固体平板上，在37℃恒温培养箱培养12h，挑取的单菌落，将其转移至液体培养基扩大培养。一段时间后离心收集细胞，超声破碎后离心取上清液制备样品，利用的方法对p22蛋白进行鉴定。
（6）抗p22蛋白的单克隆抗体制备及鉴定。p22蛋白可作为对小鼠进行多次注射后，分离出小鼠脾细胞，利用的仙台病毒促进该细胞与体外培养的骨髓瘤细胞融合；融合细胞经过多次筛选后得到的杂交瘤细胞具有的特点是；将选出的杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔，待小鼠腹部膨胀明显，采集，分离提取出单克隆抗体。

单克隆抗体的制备过程 知识点题库

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