基因工程的基本操作程序知识点题库

在基因工程操作的基本步骤中，没有进行碱基互补配对的是（）

A . 将目的基因导入受体细胞 B . 目的基因与运载体结合 C . 人工合成目的基因 D . 目的基因的检测表达

镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子β﹣肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常．回答下列问题：

（1）异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的序列发生改变．
（2）将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的．此操作（填“属于”或“不属于”）蛋白质工程，理由是该是该操作．
（3）用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的，以其作为模板，在酶的作用下反转录合成cDNA．cDNA与载体需在限制酶和酶的作用卜，拼接构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达．
（4）检测受体菌是否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取，用相应的抗体进行杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白．

血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值．如图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径．

（1）如果HSA基因序列未知，可以采用的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建后才能导入宿主细胞．
（2）方框中的“？”一般选用的生物是，为了提高II过程的导入成功率，通常用处理大肠杆菌．
（3）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择途径（填I或II）获取rHSA更有优势．
（4）为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA，可以用_______方法来进行检验．

A . 检验HSA基因是否导入 B . 检验细胞中是否产生相应的mRNA C . 抗原、抗体杂交 D . 检测是否有标记基因

下列有关基因工程操作的正确顺序是（）

①目的基因的检测和表达

②目的基因与运载体结合

③将目的基因导入受体细胞

④提取目的基因

A . ①②③④ B . ④③②① C . ④②③① D . ③④②①

下列有关动物基因工程的说法，错误的是（　　）

A . 将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速度 B . 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低 C . 利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题 D . 用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入的是调节因子，而不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成

在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要（）

①DNA连接酶　

②同一种限制酶　

③RNA聚合酶　

④具有标记基因的质粒　

⑤目的基因　

⑥4种脱氧核苷酸

A . ③⑥ B . ②④ C . ①⑤ D . ①②④

人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（）

A . 大肠杆菌 B . 酵母菌 C . T₄噬菌体 D . 质粒DNA

为达到相应目的，必须通过分子检测的是（）

A . 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B . 产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选 C . 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D . 21三体综合征的诊断

下列物质或过程不影响磷酸二酯键数目变化的是（）

A . RNA聚合酶、逆转录酶、Taq酶 B . DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶 C . 遗传信息的翻译、PCR中DNA解链 D . cDNA文库的构建、染色体的结构变异

下列关于核酸分子杂交和抗原-抗体杂交的叙述，正确的是（）

A . 核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交 B . 抗原-抗体杂交的原理为碱基互补配对原则 C . 核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录 D . 抗原-抗体杂交中目的基因产物常作为抗体

在下列基因工程的基本操作步骤中,未发生碱基互补配对的是（）

A . 构建cDNA文库 B . 重组质粒导入受体细胞 C . 目的基因与质粒构建重组质粒 D . 目的基因在受体细胞内表达

反义基因是通过产生的mRNA分子，与相关基因产生的mRNA进行互补，来阻断非正常蛋白质合成。图1为不同的限制酶及相应的切割位点，图2为科学实验中利用小分子量的A反义基因的实例。据图回答下列问题：

CTTAAG

（1）基因工程中，A基因可以用(仪器）合成，利用该仪器还可以合成等若想将图2中的A基因反向连接到结构甲中，应该用限制酸切割A基因和结构甲，DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，可以“缝合”平末端和黏性末端。
（2）用含A反义基因的农杆菌感染植物细胞的原生质体后，可用含有的培养基进行筛选。培养一段时间后，在高浓度的蔗糖溶液中，观察细胞来鉴别细胞壁是否再生。
（3）导入的A反义基因能转录A反义RNA，且能与正常RNA互补，抑制A基因表达过程中的。

1976年，美国的H·Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内，并获得表达，这是人类第一次获得的转基因生物。上述的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内( )

A . 能进行DNA的复制 B . 能进行转录 C . 能合成人的生长激素 D . 能控制合成人的生长抑制素释放因子

2020年3月16日，中国科学家陈薇院士团队研制的重组新冠疫苗通过临床研究注册审评，获批进入临床试验。重组新冠疫苗的制备流程如图。

回答下列问题。

（1）步骤②需要作为原料。步骤③需要的工具酶是。
（2）被用作载体的Ad5应具有的特点是（答出1点即可）
（3）步骤④是。
（4）重组疫苗注入志愿者体内后，S蛋白基因指导合成的S蛋白作为，刺激机体产生能与之相结合的抗体，抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是（填“有”或“无”）SARS-CoV-2感染史，理由是。
（5）为探究疫苗的注射剂量对志愿者产生的免疫效果，需进一步试验，请写出实验思路。

甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下：

（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，利用酶，逆转录成对应DNA后，利用技术扩增，并将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的多肽（蛋白质），因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。
（2）构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸（Uaa）。将该基因与连接后倒入宿主细胞。提取宿主细胞的进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。
（3）利用转基因宿主细胞制备疫苗。.将（1）中的重组质粒导入（2）中的转基因宿主细胞，并在补加的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特定tRNA，翻译岀改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是。
A．病毒的DNA聚合酶 B．宿主的DNA聚合酶

C．病毒的RNA聚合酶 D．宿主的RNA聚合酶
（4）上述病毒活疫苗与传统疫苗相比，具有的优点是：。

基因编辑是指将外源DNA片段导入染色体DNA特定位点或删除基因内部片段，定点改造基因，获得预期的生物体基因序列发生遗传性改变的技术。下图是对某生物B基因进行基因编辑的过程，该过程中用SgRNA指引核酸内切酶Cas9结合到特定的靶位点。下列分析不合理的是(　　)

A . 图中B基因缺失一段核苷酸序列可能导致染色体结构变异 B . 图中SgRNA1的碱基序列和SgRNA2碱基序列相同或互补 C . Cas9可识别特定的核苷酸序列使核苷酸间的磷酸二酯键断裂 D . 根据上述处理前后生物体的功能变化，可推测B基因的功能

分子生物学、生物化学等学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程，下列行为使基因工程的实施成为可能的是（）

①细菌质粒的发现 ②精子获能才具备受精能力 ③限制酶和逆转录酶的发现

④蛋白质分子结构的改造 ⑤DNA序列分析方法的发明 ⑥PCR技术的发明

A . ②③⑤⑥ B . ①③⑤⑥ C . ②④⑤⑥ D . ①③④⑥

下列有关基因工程的叙述，正确的是（）

A . 基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶 B . 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C . 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D . 只要目的基因进入了受体细胞就能成功地实现表达

人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，现可以用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）。下图甲为获取的含有目的基因（HSA基因）的DNA片段， Sau3A Ⅰ、EcoRⅠ、BamH Ⅰ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请回答下列问题：

（1）三种限制酶中能产生相同黏性末端的是；为了使目的基因与质粒定向连接，切割图甲所示DNA片段的最佳方案是选用酶，所得重组质粒（填“能””、“不能”或“不一定能”）被BamH Ⅰ切割。
（2）获取HSA基因还可以通过下列方式：首先采集人的血液，从中提取合成总cDNA，然后以cDNA为模板用PCR扩增HSA基因。与基因组文库获取的目的基因相比，利用cDNA作为导入大肠杆菌的目的基因，其特点是不含。
（3）生物技术的发展和应用使利用动物生产人的血清蛋白成为可能，下图是上海某研究所培育生产出血清蛋白奶牛的流程。请据图回答。
①此操作流程涉及的现代生物技术有基因工程、动物细胞培养、、等。
②在进行性别鉴定时，需要取囊胚的细胞做DNA分析。据图分析，小牛1、2、3的性别是性。

科学家尝试利用生物工程技术培育转基因奶牛，并设想从奶牛乳腺细胞分泌的乳汁中提取人胰岛素，其操作的基本过程是：PCR扩增胰岛素基因→导入牛的受精卵→早期胚胎培养→胚胎植人受体母牛子宫→分娩产下转基因奶牛。回答下列问题：

（1）上述转基因奶牛的培育过程应用了基因工程、等生物工程技术，其中基因工程中最核心的步骤是。
（2）对精子．卵细胞或受精卵的体外培养有严格要求，除了满足无菌、无毒的环境外，还需要一定的营养物质，以及和气体等条件，该气体条件是指。
（3）通常选用时期的胚胎进行移植，不选用原肠胚进行胚胎移植的原因是。
（4）为保证分娩产下的是转基因奶牛，需要对导入目的基因之后的早期胚胎进行。待转基因奶牛成年后，从其分泌的乳汁中提取相应的蛋白质进行实验，可确定其乳汁中是否含有人胰岛素。

基因工程的基本操作程序 知识点题库

基因工程的基本操作程序知识点题库