项目 | 间接计数法(稀释涂布平板法) | 直接计数法(显微计数法) |
原理 | 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌 | 利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 |
公式 | 每克样品中的菌落数=(C÷V)×M C:某稀释度下平板上生长的平均菌落数;V:涂布平板时所用的稀释液的体积(mL);M:稀释倍数 |
每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数×400×104×稀释倍数 |
缺点 | 当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 | 不能区分细胞死活 |
结果 | 比实际值偏小 | 比实际值偏大 |
如图所示是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列.
①为测定大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是.
A.一个平板,统计的菌落数是23
B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24
C.三个平板,统计的菌落数分别为21、5和52,取平均值26
D.四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25
②一同学在对应稀释倍数为106的培养基中,测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL).
③用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量,原因是.
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
试管编号 |
培养液/mL |
无菌水/mL |
酵母菌母液/mL |
温度/℃ |
A |
10 |
- |
0.1 |
28 |
B |
10 |
- |
0.1 |
5 |
C |
- |
10 |
0.1 |
28 |
(一)有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
实验使用的培养基,含有营养物质和。制备培养基时,应将pH调至。图中继续实验中可能包含的实验操作有、、。I.研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内,成功获得了抗虫转基因棉花,在一定程度上减少了杀虫剂的使用,减少了环境污染,提高了作物的产量和质量。
提取某细菌总RNA,经逆转录形成互补的DNA(cDNA),再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA,PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程,故反应体系中需加入酶。Ⅱ.基因编辑技术(CRISPR/Cas9技术)是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术,其原理是由一个向导RNA(sgRNA)分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割(如图)。请据图回答:
从CRISPR/Cas9系统作用示意图看,能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是。一般来说,在使用基因编辑工具对不同DNA进行编辑时,应使用Cas9和(填“相同”或“不同”)的向导RNA进行基因的相关编辑。