江苏省2021-2022学年高二下学期期中生物试题含解析

下列有关细胞内化合物功能的叙述，正确的是（ ）

A ．脂肪、磷脂和胆固醇都是动物细胞膜的主要成分

B ． DNA 是真核生物的主要遗传物质

C ．蛋白质是生命活动的主要承担者

D ．糖原是动物细胞内的主要储能物质

研究发现一类称做 “ 分子伴侣 ” 的蛋白质可识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽，并通过改变自身空间结构与多肽的某些部位相结合，从而帮助这些多肽折叠、组装或转运，其本身不参与组成最终产物并可循环发挥作用。下列叙述正确的是（    ）

A ．乳酸杆菌内 “ 分子伴侣 ” 发挥作用的场所可能在内质网上

B ． “ 分子伴侣 ” 介导加工的直链八肽化合物中至少含有 9 个氧原子

C ． “ 分子伴侣 ” 的空间结构一旦发生改变，则不可逆转

D ．变性后的 “ 分子伴侣 ” 不能与双缩脲试剂产生紫色反应

下列关于真核细胞结构和功能的叙述，正确的是（ ）

A ．有线粒体的细胞中一定含有叶绿体

B ．高尔基体是细胞内蛋白质合成、加工和运输的场所

C ．细胞利用核孔实现核内外大分子物质的自由转运

D ．组成细胞生物膜的基本支架都是磷脂双分子层

如图是植物叶肉细胞亚显微结构示意图，相关叙述错误的是（ ）

A ．结构 ① 中因含核仁而成为细胞代谢和遗传的控制中心

B ．结构 ② 中含有少量 DNA ，属于半自主性细胞器

C ．结构 ③ 是细胞内物质氧化分解的主要场所

D ．结构 ④ 参与细胞生物膜系统的组成

下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）

A ．基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异

B ．以大肠杆菌为受体细胞时，先要用 Ca ²⁺ 处理细胞以使其处于感受态

C ．基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源 DNA 插入

D ． DNA 连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上

下列有关单克隆抗体制备过程的叙述错误的是（ ）

A ．过程 ① 注射一种灭活病毒可使小鼠体内产生多种浆细胞

B ．过程 ② 形成的两两融合细胞只有图中的 3 种类型

C ．过程 ③ 采用抗原 - 抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选

D ．过程 ④ 获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体

下列关于高等哺乳动物受精过程的叙述，正确的是（ ）

A ．透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道屏障

B ．获能的精子穿越透明带的同时释放顶体酶水解卵细胞膜

C ．精子被卵细胞膜表面的微绒毛抱合后立即发生卵细胞膜反应

D ．精子入卵后立即与卵细胞核发生融合并马上开始有丝分裂

有关胚胎移植技术的叙述，正确的是（ ）

A ．受体母畜对移植胚胎会发生排斥

B ．胚胎必须发育到原肠胚阶段才能移植

C ．是克隆两栖类动物必需的最后一道 “ 工序 ”

D ．人工辅助生殖的技术之一，为不孕不育夫妇带来福音

为了给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究了甘薯茎尖大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如下表所示，相关叙述错误的是（ ）

A ．为防止细菌污染，应对外植体进行灭菌处理

B ．再分化时，应给予适宜光照诱导基因表达

C ．不同的培养阶段要调整培养基中激素的比例

D ． 0.3 ～ 0.5mm 大小的茎尖有利于培养脱毒甘薯苗

下图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程，相关叙述正确的是（ ）

A ．嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性

B ．过程 ① 中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层

C ．过程 ② 中可利用聚乙二醇诱导卵裂球细胞发生融合

D ．过程 ③ 操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理

某同学用泡菜坛（如图）进行果酒发酵，相关叙述错误的是（ ）

A ．水槽加水并扣上坛盖，可隔绝空气，防止微生物入侵

B ．果酒发酵过程产生的 CO ₂ 可通过水槽以气泡形式排出

C ．若观察到瓶中有白色浑浊物漂浮，则可能被杂菌污染

D ．用酸性重铬酸钾溶液可测定发酵液中的酒精浓度

在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图。有关叙述错误的是（ ）

A ．接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌

B ．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落

C ．接种过程中至少需要对接种环灼烧 4 次

D ．甲中 d 区域为划线的起始位置

提取与鉴定蚕豆组织细胞 DNA 的相关实验操作中，不影响最终获得 DNA 总量的是（    ）

A ．蚕豆组织的类型和质量

B ．向 DNA 的溶液中加入蒸馏水量

C ．玻璃棒搅拌的方向和力度

D ．加入二苯胺试剂的量

根据下列实验操作及结果得出的结论中，正确的是

A ． ① B ． ② C ． ③ D ． ④

如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，下列叙述正确的是（ ）

A ．此图中细胞还没有分化，图中 ①②③ 依次为透明带、滋养层、内细胞团

B ．此图为卵裂期，遗传物质未发生改变

C ．进行胚胎分割时，取 ③ 中的细胞做性别鉴定

D ．胚胎从 ① 中伸展出来的过程叫做孵化

下列关于生物学中常见的几种酶的叙述，正确的是（ ）

A ． DNA 连接酶将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间的碱基黏合

B ．用限制性核酸内切酶从质粒上切下一个目的基因需消耗 4 个水分子

C ．限制酶能专一性破坏双链 DNA 分子中碱基之间的氢键来切割 DNA 分子

D ． T ₄ DNA 连接酶只能连接双链 DNA 片段互补的黏性末端

下列关于微生物培养和利用的叙述，错误的是（ ）

A ．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌

B ．接种时连续划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释获得单个菌落

C ．接种前要了解固体培养基是否被污染可接种蒸馏水来培育检测

D ．利用刚果红培养基上是否形成透明圈可筛选纤维素分解菌

图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（　　）

A ．利用装置甲进行果酒发酵时，通过排气管可排出 CO ₂

B ．利用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀 a 、阀 b

C ．图乙中曲线 ① 、 ② 可分别表示装置甲中 O ₂ 浓度，酒精含量

D ．发酵过程中酵母菌细胞内产生 CO ₂ 和酒精的场所相同

“ 雀嘴茶 ” 是由樟叶越桔的幼嫩叶芽制成，不仅含有多种营养物质，而且具有美容功效。为了保护野生资源，科研人员以樟叶越桔幼嫩叶片为外植体，建立细胞悬浮培养体系，获得细胞生长曲线（如图），确定樟叶越桔细胞悬浮果培养较适宜的传代周期为 15d 。相关叙述错误的是 (    )

A ．细胞悬浮培养前，应先诱导幼叶细胞脱分化形成愈伤组织

B ．细胞悬浮培养液中应含植物激素纤维素酶、无机盐等

C ．初始接种量、摇床转速、培养基 pH 值等会影响实验结果

D ．培养 15d 后，营养物质减少、有害代谢产物积累等使细胞增殖减慢、容易变异

为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图实验，相关叙述错误的是 (    )

A ．过程 ① 中选择 M II 中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复

B ．过程 ② 重组细胞培养经历了卵裂、桑椹胚、原肠胚和囊胚等过程

C ．过程 ③ 的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达

D ．过程 ④ 对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能

化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A ，研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及一些微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌（目的菌），实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是（    ）

A ．该培养基中化合物 A 可能既作碳源又作氮源

B ．实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触

C ．实验操作过程中，获得纯净 “ 目的菌 ” 的关键是防止外来杂菌污染

D ．将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种

图是某同学绘制的单克隆抗体制备过程及原理图，其中抗原决定簇是指抗原表面或内部能决定抗原性的基团，骨髓瘤细胞是一种营养缺陷型细胞。有关叙述错误的是（ ）

A ．动物免疫的原理是一种抗原诱导形成一种浆细胞

B ．选用营养缺陷型骨髓瘤细胞有利于筛选杂交瘤细胞

C ．细胞融合也可能发生在不同类型淋巴细胞之间

D ． a 融合杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞增殖

草甘膦是一种低毒性的广谱除草剂，能非特异性侵入并杀死所有的植物，其除草机制是抑制植物体内 EPSPS 酶的合成，最终导致植物死亡。科学家从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出 EPSPS 基因（控制 EPSPS 合成酶合成的基因）转入小麦，以提高其对草甘膦的耐受性。下列有关叙述正确的是（ ）

A ．要筛选出含 EPSPS 基因的突变菌株，应在培养基中加入 EPSPS 酶

B ．可用抗原 — 抗体杂交的方法检测细胞中是否有 EPSPS 基因的表达产物

C ． EPSPS 基因转录时以 DNA 的两条链同时作为模板，提高转录的效率

D ． EPSPS 基因导入小麦叶肉细胞的叶绿体后，该性状可随传粉过程遗传

蛋白质工程中，对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的原因是（ ）

A ．改造基因易于操作且改造后能够遗传

B ．蛋白质的相对分子质量大

C ．缺乏改造蛋白质所必需的工具酶

D ．蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大

关于果酒、果醋的制作，下列叙述正确的是（ ）

A ．应先去除葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底

B ．为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶

C ．红葡萄皮中的色素进入发酵液，使葡萄酒呈深红色

D ．果酒发酵后可以接着果醋发酵，但是要将发酵温度降低一些

做 “ 微生物的分离与培养 ” 实验时，下列叙述错误的是（    ）

A ．高压灭菌加热结束时，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖

B ．若要用血细胞计数板方法计数微生物，实验结果往往偏大

C ．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D ．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底

通过细胞工程技术，可利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势，培育高产耐盐的杂种植株，实验流程如图所示。有关说法错误的是（ ）

A ． ① 是纤维素酶和果胶酶， ② 是融合的原生质体

B ． ② 到 ③ 过程中高尔基体活动明显增强

C ．将愈伤组织包埋在人工种皮中，就形成了人工种子

D ．杂种细胞 ③ 培育成目的植株说明杂种细胞 ③ 具有全能性

下列有关植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程的比较，正确的是（ ）

A ．原理都涉及细胞膜的流动性

B ．均可用电激、灭活的病毒诱导融合

C ．两者成功的标志都是形成融合细胞核

D ．结果均可得到杂种个体

以洋葱为材料进行 DNA 的粗提取与鉴定实验，相关叙述错误的是 ( )

A ．研磨洋葱时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞壁，有利于细胞破裂

B ．向含 DNA 的滤液中加入 2mol·L ^{－ 1} 的 NaCl 溶液有利于去除杂质

C ．向含 DNA 的滤液中加入嫩肉粉有利于去除蛋白质，获得较纯净 DNA

D ．用二苯胺试剂鉴定 DNA 时进行沸水浴，有利于显色反应的发生

在培育 “ 乳腺生物反应器 ” 的过程中，可能涉及 (    )

A ．导入外源基因 B ．诱导细胞融合

C ．挑选雌性胚胎 D ．胚胎移植

农杆菌中的 Ti 质粒是植物基因工程中常用的运载体，相关叙述正确的是（    ）

A ． Ti 质粒是能够自主复制的双链环状 DNA

B ． Ti 质粒中磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接

C ．重组 Ti 质粒的受体细胞只能是植物愈伤组织细胞

D ． Ti 质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上

下图为某生态农业的模式图 , 下列有关叙述正确的是

A ．该生态农业涉及的原理有物质循环再生原理和整体性原理等

B ．池塘生态系统中 , 鱼的放养量控制在 K /2 左右可获得最大经济效益

C ．施用河泥不仅能够提高土壤肥力，也能增加环境中 CO ₂ 浓度 , 有利于农作物增产

D ．沼气池实现了物质和能量的多级利用，减少了环境污染 , 提高了能量传递效率

某生物兴趣小组完成了 “ 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 ” 的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）

A ．在酒精灯火焰附近称取土壤并将其倒入锥形瓶中

B ．梯度稀释时可用移液管或微量移液器进行操作

C ．振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度

D ．由图示菌落计数结果可知 10 克土样中的菌株数约为 1 ． 6×10 ⁷ 个

通过设计引物，运用 PCR 技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物 1 序列中含有一个碱基 T 不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物 1 和引物 2 的 5′ 端分别设计增加限制酶 a 和限制酶 b 的识别位点。有关叙述正确的是（    ）

A ．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入

B ．在 PCR 反应体系中还需要加入 4 种游离核苷酸、解旋酶、 Taq 酶等

C ．第 3 轮 PCR ，引物 1 能与图中 ② 结合并且形成两条链等长的突变基因

D ．第 3 轮 PCR 结束后，含突变碱基对且两条链等长的 DNA 占 1/2

如图为利用某原种植株培育新品种的示意图。下 列有关叙述正确的是（ ）

A ．子代植株 I 可维持原种植株遗传性状的稳定性

B ．子代植株 III 的培育过程通常需经多代自交选育完成

C ．需要利用植物组织培养技术获得的是子代植株 I 和 II

D ．获得子代植株 IV 的过程中，还可能发生染色体变异

下图为某生态工程模式图，有关叙述错误的是

A ．生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系

B ．沼渣、沼液作为肥料还田，为农作物提供物质和能量

C ．该工程通过建造沼气池，实现了物质和能量的循环利用

D ．该生态工程的建立，提高了各营养级的能量利用效率

CAR-T 疗法即嵌合抗原受体 T 细胞免疫疗法，其治疗过程：首先从患者体内分离具有癌症杀伤潜力的 T 细胞，通过基因工程改造让其带上一种 癌症抗原特异性的嵌合性受体，使它们可以发现和攻击癌细胞，将这些细胞在体外扩增后再输入到患者体内。下列有关叙述正确的是（    ）

A ．借助嵌合抗原受体， T 细胞能定向杀伤肿瘤细胞

B ．基因改造后， T 细胞内的 RNA 和蛋白质种类增多

C ．体外扩增 CAR-T 细胞时，需要用选择培养基进行筛选

D ． CAR-T 细胞输回体内后，能有效激活各类肿瘤细胞的溶酶体酶活性

梅花鹿属于单胎动物，季节性发情，育种工作者希望通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列有关叙述错误的是（ ）

A ．胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力

B ．培养早期胚胎的培养液中含有维生素、激素等多种能源物质

C ．当受体数量有限时，可采用胚胎分割技术获得更多的后代

D ．梅花鹿的胚胎形成后一直处于游离状态，为胚胎收集提供可能

下列对四种微生物的相关叙述，正确的是（ ）

A ． 和 分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需能源来自 的氧化

B ． 和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需能源来自太阳光能

C ．糖类和 是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需能源来自乳酸的氧化分解

D ．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但 一定不是酵母菌的碳源

为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株，科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国 “ 实践八号 ” 育种卫星，卫星返回后进行筛选，其主要流程如下图，其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答：

（ 1 ）步骤 ② 进行富集培养的目的是 ______ 。与步骤 ② 相比，步骤 ③ 的培养基成分还含有 ______ 、 ______ 。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是 ______ 。

（ 2 ）步骤 ③ 进行平板浇注时，培养基的温度应该控制在 ______ 左右为宜。步骤 ③ 中，应在 ______ 附近倒平板，不采用涂布接种的原因是 ______ 。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌。若对步骤 ④ 中的菌种进行长期保存，则可以采用 ______ 法。

（ 3 ）科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到下表所示结果（单位： g·L ^-1 ），最终确定卫 10 为最优菌株，依据是 ______ 。

（ 4 ）若要进一步探究卫 10 发酵的最适木糖浓度，试写出实验思路： ______ 。

土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株 Q 。下图 1 表示制备固体培养基过程中的某操作，图 2 是科研人员从土壤中分离出菌株 Q 的部分过程示意图。请回答下列问题：

（ 1 ）图 1 所示操作称为 ___________ ，待平板冷凝后 _________ ，以防止 _______________ 。

（ 2 ）图 2 所示接种方法是 _______________________ ，在涂布平板过程中要利用的器具是 ________ 。在 3 个平板上分别接入 0 ． 1 mL 稀释液，经适当培养后， 3 个平板上菌落数分别是 38 、 42 、 40 ，则 1 g 土壤中的活菌数约为 __________________ 个。

（ 3 ）统计菌落种类和数量时要每隔 24h 观察一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致 ________________ ，或培养时间太长导致 ____________________ 。

（ 4 ）图是某同学利用不同于图 2 方法分离菌株 Q 的示意图。下列对其操作及结果的叙述错误的有 _______ 。

a ．操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理

b ．划线时沾有菌种的接种环不能插入培养基中

c ．只有在 5 区域中才能得到所需菌落

d ．整个过程需要对接种环进行 6 次灼烧

（ 5 ）固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株 Q 的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如下图所示），透明圈直径（ D ）与菌落直径（ d ）的比值（ D/d ）代表微生物溶解难溶磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

根据实验结果分析，溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是 ______________ 。该菌种分离纯化后，常用 ______________________ 法进行长期保存。

如图为真核细胞中三种结构的示意图。关于结构乙和丙的起源，现在主要存在一种 “ 内共生起源学说 ” 的观点，该观点认为：乙和丙分别起源于原始真核细胞内共生的好氧细菌和自养的蓝细菌（蓝藻）。请回答：

（ 1 ）结构甲、乙、丙中具有双层膜的结构是 ______ ，具有少量 DNA 和 RNA 的结构是 ______ ，能产生 ATP 的结构是 ______ ，处于有丝分中期的洋葱根尖细胞具有的结构是 ______ 。唾液腺细胞中会合成多种物质，如 ATP 、 NADH （ [H] ）、 mRNA 、唾液淀粉酶等，既能合成 NADH （ [H] ）、 ATP ，又能合成 mRNA 的结构是图中的 ______ 结构。

（ 2 ）结构甲中的 c 与 ______ （填一种细胞器）的形成直接有关，结构乙和丙分别通过图中的 ______ 来增加膜面积，从而为许多重要生化反应需要的 ______ 提供更多的附着场所。

（ 3 ）下列叙述中，可以成为结构乙和丙的 “ 内共生起源学说 ” 证据的是 ______ （填序号）。

① 乙和丙的基因组与细菌基因组具有明显的相似性

② 乙和丙具备相对独立、完整的蛋白质合成系统

③ 结构乙的 e 和结构丙的 g 蛋白质与脂质的比值分别远大于 d 、 f ，接近细菌质膜的成分

④ 乙和丙均以二分裂的方式繁殖

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：

① 豆浆变质处理  将 2 种市售豆浆 A 、 B 和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的 250mL 三角瓶中，密封、 37℃ 条件下，放置 7d 后，豆浆发生变质。

② 腐败细菌的初步分离和计数  取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表：

③ 比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在 37℃ 下放

置 35d 后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如右图。

请回答下列问题：

（ 1 ）步骤 ① 中三角瓶的常用灭菌方法是 ______ ，步骤 ② 中培养基的常用灭菌方法是 ______ 。

（ 2 ）步骤 ② 中区分菌落种类的依据是 ______ 。统计菌落种类和数量时要每隔 24h 观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止 ______ 。

（ 3 ）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由 34 个氨基酸组成的多肽。步骤 ③ 结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是 ______ ；为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在 ______ 左右。

（ 4 ）为了解乳酸链球菌素对细菌的作用方式是抑制细菌生长、溶菌性杀死细菌（细胞破裂）还是非溶菌性杀死细菌，科研人员将乳酸链球菌素加入细菌菌液中，随着发酵时间的延长，检测细菌的活菌数、除去菌体的上清液中核酸含量，实验结果如图所示。以上实验表明乳酸链球菌素对细菌的作用方式为 ______ ，理由是 ______ ； ______ 。

（ 5 ）乳酸链球菌素作为天然防腐剂，但不会改变人体肠道中的正常菌群，也不会进入内环境，推测可能的原因是 ______ 。

PCR 技术是模拟体内 DNA 复制的方式在体外选择性地将 DNA 某个特殊区域进行扩增的技术。 DNA 扩增过程的产物有长产物片段和短产物片段两种，其形成过程如下图所示。请回答下列问题：

（ 1 ） DNA 分子具有方向性，通常将其羟基末端称为 3 端，磷酸基团末端称为 5 端。 DNA 复制时子链延伸的方向是 __________ （填 “5′→3′” 或 “3′→5′” ）。由于 DNA 聚合酶不能直接催化两个单核苷酸之间反应，因此 DNA 复制需要一段单链 DNA 或 RNA 作为 ___________ 。

（ 2 ）下图为某环状 DNA 分子中的一段已知序列片段，现欲通过 PCR 技术扩增出未知序列，以进行基因测序，请从下表列出的引物中选出一对合适的引物 ___________ 。

5′- GACCTGTGGAAGC…… CATACGGGATTG-3′

3′- CTGGACACCTTCG…… GTATGCCCTAAC-5′

（ 3 ）下面为某同学利用 PCR 仪进行 PCR 的操作步骤请完善相关步骤内容。

a ．按配方准备好各组分。 b ．用微量移液器向微量离心管中依次加人各组分：模板 DNA 、 4 种脱氧核苷三磷酸、 __________ 、引物、缓冲液等。 c ．进行 _________ ，使反应液集中在微量离心管底部。

d ．将微量离心管放入 PCR 仪设计好 PCR 仪的循环程序。 e ．进行 PCR 反应。

（ 4 ） PCR 的产物片段中，只有 ______________ 才是符合要求的目标产物。若将一个源 DNA 进行 PCR 反应，从理论上推测第 30 轮循环产物中不符合要求的 DNA 片段有 ___________ 个。

海洋石油污染正引起广泛关注，利用基因工程菌进行生物降解具有巨大的应用潜力。 P450 是石油降解的关键酶，用 Sal I 和 Nde I 联合酶切获得的 P450 基因，与甲图所示的质粒（ pCom8 ）重组，导入土著菌种 Y9 ，获得了基因工程菌 P450/Y9 。甲图中 mel 是黑色素合成基因，其表达能使白色的菌落变成黑色， aac Cl 是庆大霉素（一种抗生素）抗性基因，限制酶 Nde I 、 Xho I 和 Ssp I 在原质粒上均只有一个酶切位点，数字表示酶切位点间的碱基对数。乙图表示几种限制酶的识别序列和切割位点。

（ 1 ） Sal I 切割目的基因形成的黏性末端是 ______ 。

（ 2 ）原质粒需用限制酶 ______ 作用后，才能与 ______ 在 DNA 连接酶作用下形成重组质粒。

（ 3 ）经测定原质粒为 7.6kb （ 1kb 为 1000 个碱基对），重组质粒经 Nde I 、 Ssp I 联合酶切后获得了 6.0 和 1.2kb 的两个片段，则目的基因的长度为 ______kb 。

（ 4 ）由于重组质粒导入受体细胞的成功率很低，所以需要经过筛选才能获得工程菌。操作的大致思路是：

第一步，配制培养基。除了微生物生长所需的营养物质和琼脂外，还必须添加 ______ 。

第二步，待检菌液用 ______ 法接种在第一步配制的培养基上。

第三步，选择 ______ 色菌落扩大培养即可获得所需的工程菌。

（ 5 ）为检测基因工程菌降解石油的能力，科研人员做了如下 4 组实验，测定不同时间各组的石油降解率，实验结果见右图。

A 组：单独使用 Y9

B 组：单独使用 P450/Y9

C 组：联合使用 Y9 、 W3 、 F9 、 X1 四种菌种

D 组：联合使用 P450/Y9 、 W3 、 F9 、 X1 四种菌种。据图分析以下说法正确的是 ______ （填序号）。

① 单独使用 P450/Y9 对石油的降解能力比单独使用 Y9 略强

② 作用时间越长， P450/Y9 对石油降解的能力越强

③ 联合使用时， P450/Y9 能显著增加四种菌的整体降解石油的能力

④ 为达到更好的效果，最好单独使用基因工程菌 P450/Y9

为研究肝癌致病机理，科研工作者利用下图所示的差异杂交法和基因工程获取相关癌基因以作进一步研究。请据图回答问题：

（ 1 ） D 过程需要回收 __________ （填 “ 未杂交 ” 或 “ 杂交分子 ” ）的含 ³² P 的 cDNA 单链，继而通过人工合成，获得 __________ ， 并用其构建基因文库。用该种方法构建的基因文库与基因组文库相比，不同之处在于 ①__________________ ； ②___________________

（ 2 ）从图 1 构建的基因文库中获取的目的基因，一般还需进行人工改造后才能用于基因表达载体的构建，改造需在基因两端添加 __________ ，以便其随载体导入到受体细胞后，能正常调控表达过程；同时还需添加 ______________ ，以便目的基因与运载体的成功连接。

（ 3 ）上图 2 为改造后的目的基因。图 3 为两种质粒，其中 Amp ^r 为氨苄青霉素抗性基因， Tet ^r 为四环素抗性基因， lacZ 为蓝色显色基因，其表达产物可使底物 X-Gal 呈蓝色。 EcoRⅠ （ 0.7Kb ）、 NotⅠ （ 1.2Kb ）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离（ 1kb=1000 个碱基对）。

① 图 3 中能作为载体的最理想的质粒是 __________ （填 “X” 或 “Y” ），用选定的质粒与图 2 的目的基因构建基因表达载体时，应选用的限制酶是 __________ 。为筛选出成功导入目的基因的受体细胞，培养基中应适量添加 __________ 。

② 若用 EcoRⅠ 完全酶切上述 ① 中获得的重组质粒，并进行电泳观察，可出现四种长度不同的片段，其长度分别为 1.7kb 、 5.3kb 、 __________ 。

泡菜古称菹，是指为了利于长时间存放而经过发酵的蔬菜，早在《诗经》中有 “ 中田有庐，疆場有瓜。是剥是菹，献之皇祖 ” 。泡菜制作简单、风味独特但其中含有亚硝酸盐，人体摄入的亚硝酸盐达到一定量时，会引起中毒，严重时会引起死亡。图 1 是某兴趣小组制作泡菜和测定硝酸盐、亚硝酸盐含量的流程图，图 2 是实验结果，请回答：

（ 1 ）泡菜发酵所用菌种和果酒发酵所用菌种在细胞结构上最本质的区别在于 __________

（ 2 ）泡菜在食用前需用 ______ 法进行亚硝酸盐含量检测，为此最好选择色素含量少或不含色素的新鲜蔬菜，理由是 _________ 。

（ 3 ）应选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛，原因是 _______________

（ 4 ）配制的盐水需煮沸，目的有 _________

（ 5 ）发酵初期，硝酸盐还原菌将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，与此同时，蔬菜中的某些物质也会将亚硝酸盐还原，总体来看，相同时间内生成的亚硝酸盐大于被还原的亚硝酸盐。据此判断图 2 中曲线 _________ 表示泡菜发酵液中亚硝酸盐含量的变化；发酵后期，硝酸盐还原菌的活动受到抑制，可能的原因有 _________ 、 _________ 等。

（ 6 ）进一步研究发现，泡菜制作中添加适量的食醋能降低亚硝酸盐含量的峰值。为了进一步探究食醋浓度对亚硝酸盐含量峰值的影响，实验的主要思路如下：

① 将适量的新鲜蔬菜均分为若干组，并进行编号；

② 向每组中依次加入等量的盐水、调味料和 ____________ ，其他按上述流程操作；

③ 为得出结论，需要 _______________________ 。

PCR 是利用体内 DNA 复制的原理，进行生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。请回答有关问题：

（ 1 ） PCR 反应的基本步骤是 ______________ 。

（ 2 ）科学家研究发现 DNA 聚合酶只能催化 ______________ 方向的聚合反应。图 1 表示细胞内染色体 DNA 的复制过程，有一条子链是先合成短的 DNA 片段（称为冈崎片段），再形成较长的分子，可推测参与以上过程的酶有 ______________ 。在 PCR 过程中无冈崎片段形成的原因是 ______________ 。

（ 3 ）双脱氧核苷三磷酸（ ddNTP ）与脱氧核苷三磷酸（ dNTP ）的结构如图 2 所示。已知 ddNTP 按碱基互补配对的方式加到正在复制的子链中后，子链的延伸立即终止。某同学现有一些序列为 5’- GCCTAAGATCGCA-3’ 的 DNA 分子单链片段，通过 PCR 技术获得以碱基 “C” 为末端（ 3’ 为碱基 C ）不同长度的子链 DNA 片段，将以上子链 DNA 片段进行电泳分离可得到 ______________ 种不同长度的子链 DNA 片段。为使实验顺利进行，在 PCR 反应管中除了单链模板、引物、 DNA 聚合酶和相应的缓冲液等物质外，还需要加入下列哪组原料： ______________ 。

A ． dGTP 、 dATP 、 dTTP        B ． dGTP 、 dATP 、 dTTP 、 dCTP 、 ddCTP

C ． dGTP 、 dATP 、 dTTP 、 dCTP       D ． ddGTP 、 ddATP 、 ddTTP 、 ddCTP

（ 4 ）以下为形成单链 DNA 后，再进行 PCR 扩增示意图。据图分析回答

催化 ① 过程的酶是 ______________ ；核酸酶 H 的作用是 ______________ 。如果某 RNA 单链中一共有 80 个碱基，其中 C 有 15 个， A 与 U 之和占该链碱基含量的 40% ，经过以上若干过程后共获得 8 个双链 DNA ，此过程中至少需加入 G 参与组成的核苷酸数量为 ______________ （以上过程不考虑引物）。

2016 年 4 月世界首个核移植 “ 三亲婴儿 ” 在美国诞生。其培养过程如下图，请据图回答下列问题：

（ 1 ）在卵母细胞的获取过程中，需要对女性进行 _________________ 处理，该处理的方法是给女性注射 _________________ 激素，该处理可能会带来的危害有： ①______________________________________ ； ②________________________________ 。

（ 2 ）细胞 A 的培养过程 ③ 所需气体主要有 O ₂ 和 CO ₂ ， CO ₂ 的主要作用是 _______________ 。

（ 3 ）卵子与精子在发生上的重要区别是 _______________________________ ；对采集到的精子要先经过 __________ 处理，才能用于体外受精；过程 ④ 受精完成的标志是 __________________ 。

（ 4 ）为了提高已有胚胎的利用率，可采用 _________________ 技术。若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意的问题是 __________________________________ 。

（ 5 ）设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行 __________________________________ 。