第三节 蛋白质工程是基因工程的延伸 知识点题库
①蛋白质分子结构合成
②DNA合成
③mRNA合成
④蛋白质的预期功能
⑤根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列．
①预期蛋白质分子结构组成 ②合成DNA ③预期蛋白质功能 ④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列．
①蛋白质分子结构设计
②DNA合成
③预期蛋白质功能
④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列
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（1） 图中③过程的主要依据是每种氨基酸都有其对应的，它位于分子上，其上的碱基与基因中的碱基配对时遵循。
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（2） 通过③过程获得的脱氧核苷酸序列不是完整的基因，要使这一序列能够表达、发挥作用，还必须在序列上、下游加上和，在这个过程中需要酶的参与。
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（3） 完成④过程需要涉及工程技术。
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（1） 图2中①-⑤所示的生物工程称为蛋白质工程.该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对的修饰或合成，对现有蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求.逆转录过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是(请将模板链上的碱基写在前面).
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（2） 若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产， 则构建基因表达载体时， 图1中序号[1]代表的是的启动子；且在图2中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体的精子.
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（3） 为获得较多的受精卵进行研究，图2中⑥过程一般需要对供体用激素处理，使其超数排卵；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对供、受体动物做处理.对早期胚胎进行 技术，可获得同卵双胎或多胎.
胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来，就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿，为临床提供充足、质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。
人胰岛素由胰岛 β 细胞合成，核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽，进入内质网腔后，信号肽被切除，形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的 C 肽区域切除，A 链和 B 链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素（如图）。
最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似，但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5％～10％出现不同程度的过敏反应，抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛 β 细胞功能产生负面影响。
随着基因工程技术的发展，重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产，采用A、B链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代，即由大肠杆菌合成胰岛素原，然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同，但无法完全模拟生理胰岛素曲线，容易导致血糖波动，甚至导致低血糖发生。
上世纪90年代，科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构，研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物，包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如，将人胰岛素 B 链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸，可有效抑制胰岛素单体的聚合，皮下注射这种速效胰岛素类似物后，起效快（10-20分钟起效）、血药浓度峰值高、药效消失快，已经在临床上广泛应用。
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（1） 用猪胰岛素进行治疗，易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体，原因是。
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（2） 人胰岛素基因有 2 个内含子。利用大肠杆菌通过胰岛素原法生产重组人胰岛素，获取目的基因时，不宜采用的方法是
a．直接从细胞内总 DNA 中分离目的基因
b．用化学方法直接人工合成目的基因
c．以 mRNA 为模板逆转录合成目的基因
d．利用 PCR 扩增人胰岛素原基因的编码序列
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（3） 与大肠杆菌相比，利用酵母菌生产胰岛素的优势有。
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（4） 重组人胰岛素工程菌构建完成后，还需要通过工程技术进行胰岛素的生产。
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（5） 正常人胰岛素的生理性分泌，可分为基础胰岛素分泌（24小时持续脉冲式分泌微量胰岛素，维持空腹状态下血糖稳定）和进餐后的胰岛素分泌。能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是（选填速效或长效）胰岛素类似物。
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（6） 请写出通过蛋白质工程，构建胰岛素类似物工程菌的基本过程。
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（1） PCR过程所依据的原理是，该过程需要加入的酶是。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有目的基因的一段已知核苷酸序列，以便根据这一序列合成。
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（2） 该技术不直接改造Rubisco酶，而通过对Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是。和传统基因工程技术相比较，PCR定点突变技术在应用方面最突出的优点是，PCR定点突变技术属于(填“基因工程”“细胞工程”或“蛋白质工程”)的范畴。
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（3） 可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，将该细胞经植物组织培养技术培育成幼苗，从细胞水平分析所依据的原理是。
