培养基概述及其分类 知识点题库

（1） 本实验中，固定化产氢菌采用的方法称为．

（2） 由图1可知，与游离的产氢菌相比，固定化的产氢菌培养后菌体浓度增加较，其主要原因是．

（3） 由图2可知，固定化产氢菌生产氢气的优势表现在氢气产率高、．

（4） 实验中使用的发酵培养液成分如下表：

培养液成分	葡萄糖	蛋白胨	牛肉膏	酵母汁	NaCl	K2HPO4	半胱氨酸	微量元素
含量（g/L）	20	4	2	1	2	1.5	0.5	适量

其中为产氢菌群提供氮源的成分有．培养基配制时，培养基灭菌采用的最适方法是，灭菌与调pH的先后顺序是．

（5） 在生产实践中，为了充分发挥固定化产氢菌的优势，除了探究固定化产氢菌发酵所需的适宜条件外，还需探究．

（1） 实验中E组的作用是，若该组的培养基表面没有菌落生长，这说明。

（2） 牛肉膏蛋白胨培养基可用于培养(填“酵母菌”“细菌”或“乳酸菌”)，培养基中的蛋白胨主要为微生物生长提供。

（3） “在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了。实验结束后，对使用过的培养基应。

（4） 该实验的单一变量(自变量)是。

（1） 发酵罐内培养酵母菌R时，培养基中添加玉米粉和豆饼的目的主要是为微生物的生长提供。

（2） 图1中，干燥过程应控制好，以防止胡萝卜素的分解；萃取过程中宜采用水浴加热，原因是。

（3） 图中A过程表示，其目的是。

（4） 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。从图2分析可知，层析后在滤纸上出现高度不同的色素带，其中色带为β-胡萝卜素。

（1） 前期准备：配置 （填“牛肉膏蛋白胨”或“麦芽汁琼脂”）固体培养基，同时将若干相同大小的圆形滤纸片放入培养皿，采用方法灭菌。

（2） 实验步骤：从下列选项中选择合适的操作，并排序。。

 a将用抑菌物质或无菌水浸泡过的滤纸片放入平板中央

 b用平板划线法接种细菌

 c用稀释涂布平板法接种细菌

d将培养皿倒置放入恒温培养箱，37℃培养24小时

e测量抑菌圈的直径

（3） 实验结果与分析：

实验菌	不同抑菌物质处理后形成的抑菌圈直径/mm
	A	B	C	D	阴性对照
金黄色葡萄球菌	21.6	22.5	23.1	32.5	0
大肠杆菌	17.0	22.3	19.7	27.0	0

注：阴性对照为无菌水

①本实验设置阴性对照的目的是。

②根据实验结果判断，物质的抑菌效果最好，理由是。为进一步确定该物质在洗手液中的最佳添加浓度，请设计实验进行探究（写出实验思路即可）。。

（1） 在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2） 筛选过程中，虽然土壤中微生物含量非常丰富，但在此培养基上长出的微生物菌落非常少，甚至有时一个培养皿中一个菌落都没有，这是因为。

（3） 通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有、、。

（1） M培养基若用于某真菌的筛选，则培养基中应加入四环素以抑制的生长，加入了四环素的培养基属于培养基。

（2） M培养基为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除碳源外还有。碳源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有（答出两点即可）。

（3） 从得到的上述真菌中分离、纯化某特定的酶，常用的方法是电泳法和凝胶色谱法。电泳法分离酶，影响电泳速度的因素有（答出两点即可）。凝胶色谱法最先分离出来的是分子量（填“大”或 “小”）的酶分子，原因是。

（4） 酶的活性指酶催化一定化学反应的能力，酶反应速度指。

（1） 要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以作为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2） 要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160 个，空白对照组平板上未出现菌落。则100 mL原菌液中有PVA分解菌个， 该方法的测量值与实际值相比一般会（填“偏大”“偏小”或“相等”）。

（3） 要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

（1） 传统发酵技术中，人们利用酵母菌酿制果酒、醋酸菌制醋、毛霉制作腐乳以及乳酸菌制作泡菜。

①可以依据是否将酵母菌、毛霉与以上其他微生物区分开。

②利用乳酸菌制作泡菜过程中，需对发酵中生成的亚硝酸盐含量进行测定，目前常用的测定方法是。

③豆腐发酵时主要利用的是微生物产生的酶等，通过发酵豆腐中营养物质的种类（填“减少”或“增多”），且更易于消化和吸收。乳酸发酵是含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是。

（2） 土壤有“微生物的天然培养基”之称。

①现从红色玉米中筛选出一种生产胡萝卜素的红酵母菌株，纯化并计数的接种方法为。要大量繁殖该菌株应选用培养基（填“液体”或“固体”）。

②若想在此菌株基础上获得多种其他未发现的新性状菌株以供实验需求，应该经过处理，该育种方式的不足是：具有一定的盲目性；需要大量处理供试材料。

（1） 将①泥样品稀释液接种至以脂肪为唯一（选填“氮源”、“碳源”）的甲培养基中进行培养，培养一段时间后，稀释涂布于乙培养基上。甲、乙培养基从功能上分类属于培养基。

（2） 配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是。

（3） 在步骤⑤的筛选过程中，如果要测定产脂肪酶细菌的活菌数，请简要写出实验思路。

（4） 对筛选出的目的菌株可通过射线照射处理以提高其产酶能力，该过程的原理是射线照射可引起细菌。

（5） 用筛选出的目的菌株用于含油废水处理时，可采用技术，使菌株被反复利用，以降低生产成本。

（1） 纯化培养时，须使用固体培养基，其原因是，所用的接种方法是。制备固体培养基的一般流程是：计算→称量→溶化→→。

（2） 富集培养和纯化培养都使用以3-PBA作唯一的选择培养基。图为不同浓度3–PBA对米曲霉干重的影响。由图可知，当培养基中的3-PBA浓度从400μmol/L 提高到800μmol/L时，降解菌干重明显增加，原因是。

（3） 米曲霉通过超声波破碎、离心等处理，制得细胞提取液。现要从细胞提取液中分离出3-PBA降解酶，可采取的方法有（答出一点即可）。

（1） 配制好的培养基通常使用法灭菌。步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是。与步骤③培养基相比，步骤④加入了凝固剂。

（2） 进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示，该接种方法是 ，出现图B结果可能的操作失误是 。

（3） 对步骤⑤中某瓶细菌计数的方法有两种，一种方法统计出的菌落数可代表活菌数；另一种方法是，该方法需要借助血细胞计数板，但此法得出的结果会偏高，原因是 。

（4） 步骤⑤后取样测定石油含量的目的是。步骤⑤需要振荡培养，原因是（答两点）。

（1） 分离微生物前，可通过选择培养来增加米诺环素降解菌的浓度，需在BP培养基中添加一定浓度的，该物质同时提供微生物生长需要的。

（2） 选择培养得到的微生物样品先稀释，再涂布到（BP/BPA/MM）培养基的平板进行培养。如果水样中降解米诺环素的微生物数量较少，为了避免分离筛选失败，可采取的措施是（回答1点）。

（3） 为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，在锥形瓶中用自然水体配制四种不同初始浓度的米诺环素溶液，进行实验。

①8h处理后，在米诺环素溶液初始浓度100ug/L的水体中，空白对照测得的米诺环素溶液浓度41.8ug/L，加入菌株DM13测得的浓度24.3ug/L，相较空白对照组，米诺环素降解菌的降解率为。

②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的MM培养基替换自然水体，这样做的目的是。

（1） 山楂果浆黏度大，含有丰富的果胶。为提高山楂果汁的产量，某兴趣小组从土壤中分离产果胶酶的微生物，并探究温度对果胶酶活性的影响，进行了下列实验。
Ⅰ.若要分离产果胶酶菌株，需配制以为唯一碳源的培养基，该培养基能分离目的菌株的原因是。
Ⅱ.将从果园采集的土壤放入适量的中，振荡混匀制成土壤悬液，备用。
①为获得均匀分布的单菌落，先将土壤悬液进行处理，然后将处理后的土壤悬液接种于（物理状态）培养基上。该方法也可用于测定产果胶酶菌的数量，但测定的菌体数量通常比实际值。
②由于酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用。因此采用固定化酶技术，固定果胶酶时，将海藻酸钠和果胶酶的混合液注入CaCl₂溶液后，形成凝胶珠，若形成的凝胶珠偏大将导致使酶的作用效率下降。

（2） 干扰素是一种糖蛋白，具有抗病毒、抗细胞分裂和免疫调节等多种生物学功能，是治疗病毒性肝炎和肿瘤的药物。传统生产干扰素的方法是从人血液中提取，产量极低，治疗费用大。下图是科学家利用大肠杆菌生产人体干扰素的操作过程如下：

Ⅲ.若干扰素基因核苷酸序列是未知的，我们可以建立一个包括目的基因在内的，从中找到想要研究的目的基因。
Ⅳ.①过程表示在人体淋巴细胞中获得干扰素mRNA后，经过程获得干扰素基因甲。
Ⅴ.②③④过程表示利用PCR（反应）技术扩增基因甲（其中②表示在95℃下，双链DNA解旋成为单链DNA），请说出利用该过程进行DNA克隆不同于体内DNA复制的方面是（说出两点）。
Ⅵ.在利用甲、乙获得丙的过程中，常用两种限制酶同时切割甲和乙，避免发生，而获得更多的所需重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌之前，需用Ca²⁺处理，使细胞处于的生理状态，称为感受态。完成导入一段时间后，从大肠杆菌细胞中提取蛋白质，采用技术进行检测，若有杂交带出现则表明干扰素基因成功表达。
Ⅶ.与传统提取的干扰素相比较，利用大肠杆菌生产的干扰素缺乏糖链的原因是。