培养基概述及其分类知识点

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乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注．利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程如图所示：

（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．
（2）从以下哪些生物中可以提取上述酶（多选）．
A．酿制果醋的醋酸菌 B．生长在腐木上的酶菌
C．制作酸奶的乳酸菌 D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌
E．反刍动物瘤胃中生存的某些生物
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为（按功能分），培养基中的碳源为．
（4）发酵阶段需要的菌种是，在产生酒精时要控制的必要条件是．

成都高新区某中学高二一班的同学学习选修1中所要求的个实验后，就自主地分了几个学习小组，有的成功，有的失败了．小王和小刘同学根据同学们的实验设计了以下问题．

（1）实验过程中，第一小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，他们采用的解决方法是用相关酶处理果汁．活细胞内合成该酶的原料是．
（2）第二小组要将酵母菌从其他细菌中分离出来，常采用向培养基中添加青霉素的方法，这种培养基叫做培养基，配制培养基时常用的灭菌方法为．
（3）在酸性条件下，可用（试剂）来检测发酵产物中是否有酒精产生．若想进一步检测所得果酒中酵母菌的数量，可采用法．
（4）发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级长期使用，可将菌液用的方法保存．

下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是（）

成分	含量	成分	含量
NaNO₃	3g	FeSO₄	0.01g
K₂HPO₄	1g	葡萄糖	30g
琼脂	15g	H₂O	1000mL
MgSO₄•7H₂O	0.5g	青霉素	0.1万单位

A . 依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基 B . 由培养基的原料可知，所培养微生物代谢类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉 C . 本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求 D . 若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO₃ ，并应加入尿素

下表为某种培养基的配方，根据表格可以判断出（）

成分	含量	成分	含量
K₂HPO₄	2g	(NH₄)₂SO₄	1.4g
MgSO₄·7H₂O	0.3g	CaCl₂	0.3g
纤维素粉	20g	琼脂	20g
水	1000mL	pH	5.5

A . 此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种 B . 此培养基因原料来源广泛，可用于工业生产 C . 此培养基可以用来筛选自生固氮菌 D . 此培养基中含有微生物所必需的五类营养要素

酿酒酵母普遍应用于白酒、红酒、啤酒和果汁饮料的生产，其生物合成过程会形成多种多样的代谢产物，从而对食品风味产生重要影响。以下是从酒曲样品中分离出酵母菌的过程：

处理酒曲样品→过滤→系列稀释至10^-2—10^-7→选择适宜稀释度→涂布固体培养基→28℃下培养48h→挑取典型菌落→镜检→菌种鉴定→菌种保藏。请回答下列有关问题：

（1）制备固体培养基时，采用法灭菌15min~20min。
（2）通过稀释涂布平板法可以统计样品中活菌的数目。为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成。涂布平板操作时应在附近进行。
（3）菌种鉴定后要进行菌种保藏，具体方法是：将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法保存的时间不长，菌种容易。若想长期保藏，可以采用的方法，放在的冷冻箱中保存。
（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在，常用检测发酵后是否有酒精产生。

下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)，检测重组质粒是否导入大肠杆菌。下列相关叙述正确的是（）

A . 导入大肠杆菌的重组质粒中有特殊的标记基因 B . 影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养 C . 培养基A和培养基B的化学成分不完全相同 D . 培养基A和B中的1菌落的类型并不相同

学习“分离和纯化大肠杆菌”时,甲、乙两同学就“大肠杆菌的细胞呼吸类型”产生了争论。甲认为是厌氧型,因为大肠杆菌生活在人或其他动物的大肠中,是缺氧环境。乙则认为是需氧型,因为卫生部门对餐馆卫生检查时,会对餐具、消毒柜等暴露在空气中部位进行取样。老师建议他们通过实验来验证,两位同学在完全相同条件下选择LB培养基(培养大肠杆菌):蛋白胨10 g,酵母膏5 g,NaCl 10 g,加蒸馏水定容到1 000 mL,进行实验。下列有关说法错误的是(　　)

A . “蛋白胨”和“酵母膏”主要是为大肠杆菌提供碳源、氮源和特殊营养物质 B . 两位同学进行实验时,要用到的培养基类型有固体培养基、鉴别培养基 C . 两位同学需要用干热灭菌法对培养基进行灭菌,稀释涂布平板法进行接种 D . 两位同学在培养大肠杆菌时都得到了菌落,说明大肠杆菌属于兼性厌氧型生物

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中错误的是（）

A . 实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉 B . 利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数 C . 观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验 D . 培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源

下列关于培养基的叙述的错误是（）

A . 配制细菌培养基一般用添加蔗糖的豆芽汁 B . MS 培养基中含大量的无机营养 C . 并非所有的培养基都需要经过高压蒸汽灭菌法灭菌 D . 菌种的暂时保存用斜面培养基

某科研人员欲从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株X，为消除石油污染提供微生物资源。下列叙述错误的是（）

A . 若上图中A~C以“多环芳烃菲”为唯一碳源的选择培养基进行培养，可提高降解菌的浓度 B . 本实验用到的固体培养基在接种前是不透明的，周围有透明圈的菌落即为目的菌落 C . 在接种前，可将灭菌后的空白平板先培养一段时间，目的是检测培养基平板灭菌是否合格 D . 可用平板划线法或稀释涂布平板法对分离出的菌种进行纯化，并用甘油管藏法进行临时保藏

[生物—选修1：生物技术实践]

世界环境日为每年的6月5日，环境保护和卫生健康是国家重点关注项目，我国正在普遍推行垃圾分类制度，其中易腐垃圾（以厨余垃圾和餐饮垃圾为主）是我国城乡生活垃圾的主要成分。回答下列问题：

（1）为获得能分解易腐垃圾的微生物，应从的环境中处去寻找。
（2）从化学组成上看，厨余垃圾的主要成分包括纤维素、淀粉、脂肪和蛋白质等。为了筛选能同时降解这四种成分的微生物，某兴趣小组提供了如下实验思路：首先，将微生物样品接种在以纤维素为唯一碳源的培养基上，多次接种培养筛选出纤维素分解菌；其次，，筛选出能同时降解纤维素和淀粉的菌种；以此类推，最后筛选获得能同时降解四种成分的
微生物（假设为菌种A）。

① 从功能上划分，该兴趣小组使用的培养基应属于培养基。

② 在筛选纤维素分解菌的过程中，需要在培养基中加入刚果红染料，以便能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选，该方法中刚果红能与培养基中的纤维素形成。在筛选纤维素分解菌时，科研人员通过观察产生透明圈的菌落认为该土壤中存在多种纤维素分解菌，

其依据是。为了进一步确定得到的是纤维素分解菌，还要进行的实验。
（3）若要利用（2）中筛选的菌A就近就地处理厨余垃圾，在确定处理厨余垃圾的方案时，通常需要考虑的因素有（至少答2点）。

某科研小组想探究某水样中的大肠杆菌数目是否达标，欲采用滤膜法测定大肠杆菌的总数。其原理是通过特定的培养基（EMB）对大肠杆菌进行培养和鉴定，该培养基的主要营养成分包括蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖等。滤膜法的大致流程为：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基上培养→统计菌落数目。据图回答下列问题：

（1）为了鉴别大肠杆菌，图中的EMB培养基中应加入，最终长出大肠杆菌的菌落呈现色。此外，还可以根据菌落的（答出3点）等方面特征对大肠杆菌进行鉴别。
（2） EMB培养基中的蛋白胨提供的主要营养是，NaCl的作用是。
（3）图中滤杯、滤瓶需采用法灭菌，将完成过滤之后的滤膜紧贴在上述EMB培养基上，这相当于微生物培养中的操作。
（4）某兴趣小组将90mL无菌水加入到10mL待测水样中，并通过滤膜法测得EMB培养基上的大肠杆菌菌落数为3个，则IL待测水样中的大肠杆菌数目为个，培养基上形成的总菌落数实际上远远大于3个，原因是。

某同学从植物中提取了W物质，并研究其抑菌效果。在平板中央处打孔后加入提取物W，测量抑菌圈的大小和计算抑菌圈平均增幅速率，实验方法和结果如下图所示。下列分析错误的是（）

A . 将一定量菌液与刚灭菌的培养基混匀后，冷却并倾倒平板可得到试验菌平板 B . 在平板上打孔的钢管需要灼烧灭菌，目的是防止微生物污染平板 C . 抑菌圈直径的大小与菌体浓度、提取物W的浓度和预扩散时间密切相关 D . 在本实验时间内，加入提取物W后的24小时可获得最佳抑菌效果

下列与微生物有关的叙述，正确的是（）

A . T₂噬菌体的遗传物质是单链DNA B . 引发人体患炭疽病的病原体没有核膜 C . 酵母菌在生态系统的成分中属于消费者 D . 小球藻培养液中通常需要添加有机碳源

下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关的叙述中不正确的是（）

A . 实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基 B . 图中Ⅰ、Ⅱ过程实现了对目标微生物的稀释 C . 统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数 D . 在⑤处培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型

野生草本植物多具有根系发达、生长较快、抗逆性强的特点，除用于生态治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收获后剩余的菌渣可作肥料或饲料。相关叙述错误的是（）

A . 用作培养基的草本植物可以给食用菌提供碳源和氮源 B . 种植此类草本植物可以减少水土流失 C . 菌渣作为肥料或者饲料体现了其间接价值 D . 菌渣作饲料实现了物质在植物、真菌和动物间的转移

反硝化细菌在无氧环境中能将硝酸盐转化为N₂（在转化过程中不断消耗H⁺），在处理工业污水、治理水体富营养化方面具有重要作用。科研人员欲从某污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提高温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如图所示。回答下列问题：

注：BTB培养基初始pH=6.8．BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色

（1）筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌所用的BTB培养基以为唯一氮源，对该培养基可以使用法进行灭菌。
（2）待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是。图中①②步骤将污泥样品接种到BTB培养基上使用的方法是。
（3）接种好的培养基应该放在的环境中培养2~3天，然后挑选显色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
（4）若将获得的纯反硝化细菌菌株进行临时保藏，其操作及保藏的具体方法是。

下表为1000mL培养大肠杆菌的伊红美蓝琼脂培养基的营养构成，回答下列相关问题。

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂HPO₄	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）该培养基为大肠杆菌生长提供氮源的物质是。培养大肠杆菌需要将培养基的pH调到中性或微碱性，再用法对培养基灭菌。
（2）根据该培养基的用途分类，该培养基属于培养基。实验室筛选目的菌株的原理是。
（3）某同学检测某种矿泉水的大肠杆菌含量，通常采用法计数每升矿泉水中大肠杆菌的活菌数，接种方法如图所示。

使用日益广泛的手机，在方便人们通讯联络的同时也成为细菌等病原体传播的途径。为了解手机上细菌的情况，某兴趣小组进行了如下实验，请回答相关问题：

（1）取附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行系列梯度稀释的目的是。

（2） A平板上生长的菌落有多种形态，说明附着在手机细菌有种。若要使菌落能在A平板上生长，下列培养基组分中最合理的是(选填 “甲、乙、丙”) ，原因是。可采取来检测培养基A制备是否合格。

培养基编号	培养基组分
甲	蔗糖、NaCl、琼脂、水
乙	牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水
丙	蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

（3）初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落。然后用伊红-美蓝染液对C进行染色，根据染色后D中出现的结果，可判断平板B中 ( 选填图中数字)是大肠杆菌的菌落。
（4）某同学采用平板划线法进一步纯化大肠杆菌，接种培养一段时间后，发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此情况的可能原因。

下列实验中有关NaCl使用的叙述，正确的是（）

A . 制作泡菜时加入NaCl的目的就是抑制所有细菌的生长 B . 牛肉膏蛋白胨培养基中，加入高浓度NaCl溶液可用于筛选耐盐细菌 C . 将目的基因导入大肠杆菌时，要提高转化率应用NaCl溶液处理细胞 D . 在DNA粗提取时，用2mol/L的NaCl溶液可析出溶液中的DNA

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