测定某种微生物的数量知识点题库

下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）

A . 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B . 取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上 C . 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时 D . 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

下列关于微生物的培养，叙述错误的是（）

A . 培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B . 培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性 C . 培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性 D . 培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件

测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基(EMB培养基)上长出的菌落星黑色。如图所示；滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基止培养→统計菌落数目。据图回答问题。

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要经过灭菌处理的是。与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。
（2）待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为。
（3）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的操作。从功能上看，EMB培养基属于培养基。
（4）无菌操作下将90mL无菌水加入到10mL待测水样中，这样就将待测水样稀释了倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为个。
（5）若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径(填“更大”或“更小”)的滤膜。

已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。

Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5 g/L）。

Ⅱ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量），X（15 g/L）。

Ⅲ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量）。X（45 g/L）。

回答下列问题。

（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是。
（2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会，其原因是。
（3） Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供和。

下列有关微生物培养的叙述，错误的是（）

A . 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B . 平板划线法和稀释涂布平板法都可对微生物进行计数 C . 培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌 D . 倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染

（1）从微生物所能利用的氮源种类来看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作为氮源的，它们能把（列举两例）等简单氮源用于合成所需要的一切氨基酸，因而可称为“氨基酸自养型生物”。
（2）伊红美蓝培养基可用于饮用水大肠杆菌数目的测定，根据培养基上黑色菌落的数目推测大肠杆菌的数量。但单位体积饮用水中大肠杆菌数量相对较少，若直接将一定体积的自来水接种到培养基中，培养后可能无法得到菌落或菌落数目太少，可通过“滤膜法”解决这个问题，其操作思路是：。除上述方法外，稀释涂布平板法和法是测定微生物数量更常用的两种方法。
（3）在固定化细胞实验中，明胶、琼脂糖、海藻酸钠等物质能作为包埋细胞载体的原因是。在工业生产中，细胞的固定化是在严格条件下进行的。
（4）为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如下图。

加酶洗衣粉中目前常用的四类酶制剂除纤维素酶外，还有（至少答两类）。根据以上实验结果，能否得出碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强，并说明原因。

以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是（）

A . 培养基中营养物质的浓度越高越好 B . 可以用稀释涂布平板法来测定某土壤溶液活菌数目 C . 任何培养基都必须添加碳源、氮源、水、无机盐 D . 制备葡萄酒的过程中，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，其目的是向瓶中通气

下列生物学研究所选择的方法中，正确的是（　　）

A . 用样方法调查蒲公英的种群密度时，应将样方中的其它植物全部拔除 B . 调查土壤小动物丰富度时，可用目测估计法统计种群的数量 C . 采用标志重捕法调查土壤动物的丰富度时，应防止标志物脱落 D . 使用血球计数板计数酵母菌数量时，应统计方格内和四边上的菌体

某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是（）

A . 采用稀释涂布平板法分离菌种 B . 以石油为唯一碳源的培养基筛选 C . 利用平板划线法对细菌进行计数 D . 称取和稀释土壤时应在火焰旁

为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

（1）培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤：计算→称量→→→倒平板。
（2）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用挑取，放在上称量。由于牛肉膏和蛋白胨，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。
（3）在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有等大肠杆菌生长所需的营养要素。
（4）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如和等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个，从而获得纯菌株。

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图1所示的实验。请据图回答：

（1）步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中以唯一碳源。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于培养基。
（2）配置好的培养基通常使用法灭菌。接种时，若在培养基表面连续进行4次划线（如图2），则需要对接种环灼烧次。
（3）为了对石油分解菌进行计数采用法，得到了如图3所示的平板。运用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目（填“偏高”或“偏低”）。将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经过适当培养后，3个平板上的菌落分别为56、58和57.据此可得出每升样品中的活菌数为个。
（4）若想要长期保存优质菌种，可以采用的方法。

[选修1：生物技术实践]

葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣）。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。

回答下列问题：

（1）皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前将原料干燥、粉碎的目的分别是，萃取效率主要取决于萃取剂的。萃取过程需要在适宜温度下进行，温度过高会导致花色苷。研究发现，萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高花色苷的提取率，原因是。
（2）为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。10⁴倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为个。
（3）皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是。培养筛选得到的醋酸菌时，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为。
（4）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。（简要写出实验步骤和预期结果）

某科研小组想探究某水样中的大肠杆菌数目是否达标，欲采用滤膜法测定大肠杆菌的总数。其原理是通过特定的培养基（EMB）对大肠杆菌进行培养和鉴定，该培养基的主要营养成分包括蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖等。滤膜法的大致流程为：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基上培养→统计菌落数目。据图回答下列问题：

（1）为了鉴别大肠杆菌，图中的EMB培养基中应加入，最终长出大肠杆菌的菌落呈现色。此外，还可以根据菌落的（答出3点）等方面特征对大肠杆菌进行鉴别。
（2） EMB培养基中的蛋白胨提供的主要营养是，NaCl的作用是。
（3）图中滤杯、滤瓶需采用法灭菌，将完成过滤之后的滤膜紧贴在上述EMB培养基上，这相当于微生物培养中的操作。
（4）某兴趣小组将90mL无菌水加入到10mL待测水样中，并通过滤膜法测得EMB培养基上的大肠杆菌菌落数为3个，则IL待测水样中的大肠杆菌数目为个，培养基上形成的总菌落数实际上远远大于3个，原因是。

下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（）

A . ①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基 B . ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C . ③到④的过程中，接种环共灼烧了5次 D . ④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连

含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。

（1）从发臭的生活污水中分离到产硫化氢的微生物的依据是。为了解某生活污水中微生物的种类和数量，应采用法进行接种，接种前培养基用（方法）进行灭菌。在普通培养基上加入硫酸亚铁铵，采用（固体／液体）培养基培养，根据即可鉴定分离得到的微生物能否产生硫化氢。
（2）某同学取0.1ml稀释的污水进行接种，在10³倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为450、542和361，经计算得每克污水中微生物的数量为4.51×10⁶个。请评价该同学统计得到的数据结果是否准确，。
（3）用穿刺接种的方法将产硫化氢的两种菌分别接种在甲、乙两个培养基内，如图所示。请推测出现图中甲、乙两种菌落分布差异的原因是。

研究小组利用微生物实验操作技术来探究某池塘中大肠杆菌数量，下列叙述正确的是(　　)

组别	部分操作过程、结论
I	进行涂布平板操作时，将10 mL菌液滴加到培养基的表面后，再用灭菌后的涂布器推匀
II	涂布完成后，在培养皿上盖上做标记，并将培养皿倒置
III	重复实验获得了四个平板，其中的菌落数分别为212、381、157、183，则平均值应为184
VI	实验组平板上有38个菌落，空白对照组有5个、则"38- 5"作为池塘中大肠杆菌数量计算的依据

A . Ⅰ B . Ⅱ C . Ⅲ D . Ⅳ

中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产某新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。请分析并回答相关问题：

（1）选种：可以用紫外线、X射线等辐射照射菌株，从而提高，获得目的菌株。为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可将目标菌株在液体培养基中培养，将蔗糖作为，并不断提高其浓度，多次传代培养。
（2）监测：培养过程中宜采用法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了10⁵倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1mL，平板上的平均菌落数为220个，则菌液中H菌的细胞数为个/mL。
（3）培养：基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了无需灭菌的培养基：盐浓度60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该设计使杂菌的生长繁殖受抑制，所以不需要灭菌，分析原因是培养基的盐浓度设为60g/L，杂菌；pH为10的条件，。
（4）应用：因菌株H能分泌酶，可以分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等），达到降低有机物污染的目的，还能降低生产成本。

以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是（）

A . 煮沸杀菌是生活中常用的灭菌方法，常用于培养皿、牛奶等的灭菌 B . 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时操作顺序为计算、称量、熔化、灭菌、调pH、倒平板 C . 用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值大 D . 以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌

北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题，努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答：

（1）根据甲图，选择培养纤维素分解菌要用状态的培养基。为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加入。为了统计样品中活菌的数目，常用方法除稀释涂布平板法进行活菌计数外，还有的方法。
（2）乙图是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是（填数字）。
（3）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，纤维素酶是一种酶，该酶是由3种组分组成的，在三种酶的作用下，纤维素最终被分解成葡萄糖，其中的酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。

含油废水可用产脂肪酶的细菌处理。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到产酶能力较高的菌株。据图示回答下列问题：

（1）将淤泥样品稀释液接种至以脂肪为唯一（填“氮源”或“碳源”）的甲培养基中进行培养，培养一段时间后，稀释涂布于乙培养基上。甲、乙培养基从功能上分类属于培养基。
（2）配制的培养基必须进行灭菌处理，常用的方法是，灭菌的目的是。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，如果要测定产脂肪酶细菌的活菌数，通常可以每隔24小时统计一次菌落数目，选取时的记录作为结果。
（4）对筛选出的目的菌株可通过射线照射处理以提高其产酶能力，该过程的原理是射线照射可引起细菌。
（5）用筛选出的目的菌株处理含油废水时，可采用技术，使菌株被反复利用，从而降低生产成本。

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