酶活力测定的一般原理和方法 知识点题库

下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是(　　)。

回答有关微生物的问题．

Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．

（1）枯草芽孢杆菌的芽孢是 ．

A．休眠体    B．营养繁殖体    C．孢子        D．营养体

（2）图1所示的b过程的目的是为 ， 接种用的平板培养基在制备时需注意的是 （多选）．

A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理

C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖

D．待平板冷却凝固约5﹣10min后将平板倒过来放置

Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果．

（3）据图2所示，酶催化能力最强的是 组，而各组酶催化能力存在差异的原因是 

（4）A₂、A₅组酶活力与A₀组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：．

①同学甲：A₂、A₅组芽孢杆菌可能未发生基因突变，用 技术检测即可证实．

②同学乙：A₂、A₅组与A₀组酶活力虽然相同，但也可能存在不同的基因突变，理论上的解释是．

实验目的比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性

实验原理略．

实验材料：三种微生物淀粉酶提取液（提取液中酶蛋白浓度相同）等．

实验步骤：

a．取四支试管，分别编号；

b．按右表内要求进行操作；

c．将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时；

d．在上述四支试管冷却后滴入碘液；

e．观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅；

实验结果（注：“+”显色，“++”显色更深；“﹣”不显色）

回答下列问题：

（l）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 ．

（2）果醋制作往往在果酒制作的基础上进行，其相关的反应式为： ．

实验目的：比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性．

实验材料：三种微生物（A～C）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同．

实验步骤：

（1）取四支试管，分别编号．

（2）在下表各列的英文字母位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操作．

（3）将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时．

（4）在上述四支试管中分别加入等量本尼迪特试剂摇匀，在沸水浴中煮沸2﹣3min

（5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅．

实验结果：

分析讨论：

（1）该实验中的自变量是 ，因变量 ， 因变量的呈现方法是 ．

（2）上述结果表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同．若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异，仅从酶结构上考虑，原因有 ．

（3）你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是 ．

主要试剂及仪器：麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等．

实验步骤：

步骤一：制作麦芽糖梯度液．取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2min，取出后按试管号顺序排列．

步骤二：萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液．

步骤三：将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却．

步 骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液（忽略其中含有的少量麦 芽糖）和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温 10min．

步骤五：取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管，然后向E、F试管分别加入　         ， 　                              ， 观察颜色变化．

结果分析：将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较，获得该试管中麦芽糖浓度，并计算出α﹣淀粉酶催化效率．

请分析回答：

【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性．

【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小；用呈色反应表示葡萄糖的生成量．

【实验材料】三种微生物（A、B、C）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同．

【实验步骤】

（1）取四支试管，分别编号．

（2）按照如表所列添加相应试剂．

（3）将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时．

（4）检验葡萄糖的生成量，在上述四支试管中分别加入 ，摇匀后，进行水浴加热．

（5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色深浅．

【实验结果】

【分析讨论】

①表格中实验添加试剂的量X、Y分别是 、 ．

②该实验中的对照组是 号试管，实验的自变量是 ，因变量是  ， 无关变量是 　（至少3个）

③实验组试管均呈现的颜色是 ，但深浅不同．

④将上述四支试管放入37℃的水浴，保温目的　 

⑤你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是微生物 ．

①谷物的萌发：称取等量小麦、谷子、绿豆三种谷物的干种子，都均分为两份，其中一份浸泡2.5h，放入25℃恒温培养箱，至长出芽体为止．

②酶提取液的制备：将三种谷物的干种子和萌发种子分别里于研钵中，加入石英砂和等量蒸馏水研磨、离心，制备酶提取液．

③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中，加入1mL1%的淀粉溶液，25℃保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．

④吸光度的测定：在试管中加入_________、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光光度计依次测定各试管的吸光度．

⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对，计算出淀粉酶活性，结果如表：

实验目的比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性

实验原理略．

实验材料：三种微生物淀粉酶提取液（提取液中酶蛋白浓度相同）等．

实验步骤：

a．取四支试管，分别编号；

b．按右表内要求进行操作；

c．将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时；

d．在上述四支试管冷却后滴入碘液；

e．观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅；

实验结果（注：“+”显色，“++”显色更深；“﹣”不显色）

回答下列问题：