酶活力测定的一般原理和方法 知识点题库

下列实验准备工作中合理的是(    )

A . 为了倒平板将已凝固的固体培养基加热熔化 B . 为了恢复干酵母的活力将其用沸水处理 C . 为观察植物有丝分裂准备洋葱鳞片叶 D . 为双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验准备沸水浴
小麦的穗发芽影响其产量和品质.某地引种的红粒小麦的穗发芽率明显低于当地白粒小麦.为探究淀粉酶活性与穗发芽率的关系,进行了如下实验.

(1)取穗发芽时间相同、质量相等的红、白粒小麦种子,分别加蒸馏水研磨、制成提取液(去淀粉),并在适宜条件下进行实验.实验分组、步骤及结果如下:

分组

步骤

红粒管

白粒管

对照管

 ①

加样

0.5mL提取液

0.5mL提取液

C

 ②

加缓冲液(mL)

1

1

1

 ③

加淀粉溶液(mL)

1

1

1

 ④

37℃保温适当时间,终止酶促反应,冷却至常温,加适量碘液显色

显色结果

+++

+

+++++

注:“+”数目越多表示蓝色越深

(1)显色结果表明:淀粉酶活性较低的品种是;据此推测:淀粉酶活性越低,穗发芽率越 .步骤①中加入的C是 ,步骤②中加缓冲液的目的是 

(2)小麦淀粉酶包括α淀粉酶和β淀粉酶,为进一步探究其活性在穗发芽率差异中的作用,设计了如下实验方案:

X处理使β淀粉酶失活的目的 .若Ⅰ中两管显色结果无明显差异,且Ⅱ中的显色结果为白粒管颜色显著 红粒管(填“深于”或“浅于”),则表明α淀粉酶活性是引起这两种小麦穗发芽率差异的主要原因.

若除酶外所有试剂均已预保温,则在测定酶活力的试验中,下列操作顺序合理的是(  )

A . 加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量 B . 加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量 C . 加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量 D . 加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量
下列关于酶工程的叙述正确的是( )

A . 加酶洗衣粉中通常含有纤维素酶和脂肪酶等 B . 尿糖试纸中含有葡萄糖水解酶和过氧化氢酶 C . 控制温度和pH值是酶的生产中保持酶活力的要素 D . 酶的固定化技术中所用的承载物易溶于水
下列不属于纤维素酶组分的是( )

A . C1 B . Cx C . 葡萄糖苷酶 D . 半乳糖苷酶
关于酶和加酶洗衣粉的描述正确的是( )

A . 清洗有血渍、奶渍衣服时,可选用含有淀粉酶的洗衣粉 B . 目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、蔗糖酶 C . 酸、碱等化学因素对酶的作用,会使酶变性,从而影响酶的活力 D . 某同学探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响时,设置20℃、30℃、40℃3组温度下洗涤同一污渍,40℃时洗涤效果最好,则说明40℃为该酶的最适温度

萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高,主要有α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶.α﹣淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6、0℃下可迅速失活,而β﹣淀 粉酶耐酸、不耐热,在70℃条件下15min后失活.根据它们的这种特性,可分别测定某种酶的催化效率.某实验小组进行了“提取小麦种子中α﹣淀粉酶并测 定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验.

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).

主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等.

实验步骤:

步骤一:制备酶溶液.

步骤二:略.

步骤三:取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按下表要求加入试剂,再观察各试管内的颜色变化(注:+表示碘液变蓝色,﹣表示碘液不变色).

试管编号

1

2

3

4

5

6

5%的可溶性淀粉溶液(mL)

8

8

8

8

8

8

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

α﹣淀粉酶保持活性而β﹣淀粉酶失去活性的溶液 (mL)

1

1

1

1

1

1

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

溶液混合,振荡后恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

加入碘液,振荡后观察颜色变化

+++

++

+

++

+++

请回答下列问题:


  1. (1) 资料表明:小麦种子发芽时,胚产生赤霉素,赤霉素扩散到糊粉层,诱导淀粉酶的合成.赤霉素诱导淀粉酶合成的主要机理是  . 选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是 .

  2. (2) 步骤二的具体操作是 .

  3. (3) 加入碘液,振荡后观察颜色变化,发现试管4中碘液不变色,能否据此推断α﹣淀粉酶的最适合温度一定是60℃? .理由是  .该实验中不能选用斐林试剂检测实验结果的主要原因是 .

  4. (4) 若要进一步研究小麦种子中β﹣淀粉酶的最适温度,则需获得β﹣淀粉酶保持活性而α﹣淀粉酶失活的酶溶液.请简要写出制备该种酶溶液的方法: .

为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性,某生物兴趣小组以三种微生物提取液(提取液中淀粉酶浓度相同)为材料进行了如下实验.



试管1

试管2

试管3

试管4




蒸馏水(ml)

2

2

2

A

pH=8缓冲液(ml)

0.5

0.5

0.5

0.5

淀粉溶液(ml)

1

1

B

1

甲生物提取液(ml)

C




乙生物提取液(ml)


D


丙生物提取液(ml)



E

37℃的水浴,保温1小时

总体积(ml)

3.8

3.8

3.8

3.8

滴加等量的碘液

实验结果

颜色深浅程度

++

+

F

注:“+”显色,“+”越多显色越深;“﹣”不显色


  1. (1) 表中A的数值为 ,F的颜色深浅程度为 (用“+”或“﹣”表示).

  2. (2) 该实验的自变量是 ,无关变量有 (写出两种即可).

  3. (3) 根据上述结果得出的结论是:不同来源的淀粉酶,虽然酶的浓度相同,但活性不同.造成实验中三种酶活性差异的根本原因是 .

为获取高性能碱性淀粉酶,兴趣小组的同学在科研人员的帮助下进行了如下实验.回答相关问题:

【实验目的】比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性

【实验原理】略.

【实验材料】科研人员提供的三种微生物淀粉酶提取液(提取液中酶浓度相同)等

【实验步骤】

(1)取四支试管,分别编号.

(2)在下表各列的字母位置,填写相应试剂的体积量(mL),并按表内要求完成操作.


试管1

试管2

试管3

试管4

蒸馏水

2

2

2

A

pH=8缓冲液

0.5

0.5

0.5

0.5

淀粉溶液

1

1

1

1

甲生物提取液

0.3




乙生物提取液


0.3



丙生物提取液



0.3


总体积

3.8

3.8

3.8

B

(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时.

(4)在上述四支试管冷却后滴入碘液.

(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅.

【实验结果】(“+”表示颜色变化的深浅,“﹣”表示不变色)


试管1

试管2

试管3

试管4

颜色深浅程度

++

+

C

请回答下列问题:


  1. (1) 填写表中的数值:A为  ,C的颜色深浅程度为 (用“+”或“﹣”表示).

  2. (2) 该实验的自变量是 ,无关变量有 (至少写出2种).

  3. (3) 除了用碘液检验淀粉的剩余量来判断实验结果外,还可以用 试剂来检测生成物.若用该试剂检验,颜色变化最大的试管是  .

  4. (4) 根据上述结果得出的实验结论是:不同来源的淀粉酶,虽然酶浓度相同,但活性不同.你认为造成实验中三种酶活性差异的根本原因是 .

某同学从温度为55~65℃的泉水中筛选出能合成脂肪酶的细菌,并从该细菌中提取了脂肪酶.回答问题:

(1)测定脂肪酶活性时,应选择 作为该酶作用的物质,反应液中应加入 溶液以维持其酸碱度稳定.

(2)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与双缩脲试剂混合,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为

(3)根据该细菌的生活环境,简要写出测定该酶催化作用最适温度的实验思路. .

为了探究从甲、乙、丙三种微生物获取的碱性淀粉酶的活性,兴趣小组的同学在科研人员的帮助下,从上述三种微生物提取了淀粉酶提取液(提取液中酶浓度相同),进行了如下实验.

第一步:取四支试管,分别编号.

第二步:按下表要求完成操作.并在表中各列的字母位置,填写相应试剂的体积量(mL).

试管1

试管2

试管3

试管4

蒸馏水

2

2

2

A

pH=8缓冲液

0.5

0.5

0.5

0.5

淀粉溶液

1

1

1

1

甲生物提取液

0.3

乙生物提取液

0.3

丙生物提取液

0.3

总体积

3.8

3.8

3.8

3.8

第三步:将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时.

第四步:取出上述四支试管,冷却后滴入碘液.

第五步:观察比较各支试管溶液颜色及其深浅.

实验结果如下:(“+”表示颜色变化的深浅,“﹣”表示不变色):

试管1

试管2

试管3

试管4

颜色深浅程度

++

+

C

请回答下列问题:

  1. (1) 填写表中的数值:A为 , C的颜色深浅程度为(用“+++”或“﹣﹣”表示).该实验作为实验组的试管是 , 设置对照实验的目的是排除变量对实验结果的干扰.
  2. (2) 该实验的自变量是 , 无关变量有(至少写出2种).
  3. (3) 除了用碘液检验淀粉的剩余量来判断实验结果外,还可以用试剂来检测生成物.若用该试剂检验,还需要对试管处理,才能据颜色变化深浅判断出实验结果.
  4. (4) 根据上述结果得出的实验结论是:不同来源的淀粉酶,虽然酶浓度相同,但不同.
若除酶外所有试剂均已预保温,则在测定酶活力的试验中,下列操作顺序合理的是(  )
A . 加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量 B . 加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量 C . 加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量 D . 加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量
根据材料答下列有关问题.

某大学科研人员利用双重固定法,即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接),海藻酸钠来包埋小麦酯酶,研究固定化酶的性质,并对其最佳固定条件进行了探究.如图显示的是部分研究结果.(注:酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶的活性和酶的数量)

  1. (1) 从图1可以看出:固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更
  2. (2) 从图2可以看出:海藻酸钠浓度为时的小麦酯酶活力最强.当海藻酸钠浓度较低时,酶活力较低的原因是
为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性,某生物兴趣小组以三种微生物提取液(提取液中淀粉酶浓度相同)为材料进行了如下实验:

试管1

试管2

试管3

试管4

实验操作

蒸馏水(mL

2

2

2

A

pH=8缓冲液

0.5

0.5

0.5

0.5

淀粉溶液(mL)

1

1

B

1

甲生物提取液(mL)

C

乙生物提取液(mL)

D

丙生物提取液(mL)

E

37℃的水浴,保温1小时

总体积(mL)

3.8

3.8

3.8

3.8

滴加等量的碘液

实验结果

颜色深浅程度

++

+

F

注:“+”显色,“+”越多显色越深;“﹣”不显色

  1. (1) F的颜色深浅程度为(用“+”或“﹣”表示).
  2. (2) 该实验的自变量是;温度属于无关变量,保持相同即可,该说法是(填“对”、“错”)的.
  3. (3) 生物体内酶的化学本质是 , 其特性有
谷物中淀粉酶活性是影响啤酒发酵产酒的重要因素.某科研小组设计实验比较小麦、谷子、绿豆萌发前后淀粉酶活性,过程及结果如下.请分析回答:①谷物的萌发:取等量小麦、谷子、绿豆的干种子,都均分为两份,一份置于适宜条件下培养,至长出芽体为止.②酶提取液的制备:分别制备三种谷物的干种子和萌发种子的酶提取液.③反应进程的控制:分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中,加入1mL1%的淀粉溶液,25℃保温5min后,立即将试管放入沸水浴中保温5min.④吸光度的测定:在试管中加入斐林试剂、摇匀、加热,当溶液由蓝色变为砖红色后,用分光光度计依次测定各试管的吸光度.⑤酶活性的计算:将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对,计算出淀粉酶活性,结果如下:

名    称

小麦

谷子

绿豆

未萌发谷物的淀粉酶活性/U•g﹣1

0.0289

0.0094

0.0074

萌发谷物的淀粉酶活性/U•g﹣1

5

1.7645

0.0395

  1. (1) ⑤表格中未萌发的小麦与萌发的谷子这两组能否对比?,原因是
  2. (2) 步骤③中立即将试管在沸水浴中保温5min的作用是,从而避免因吸光度测定先后对实验结果的影响.
  3. (3) 实验结果表明,谷物萌发过程中淀粉酶活性升高,其意义是.由本实验可知应优先选择作为啤酒发酵的原料.
(如图1是某课题组的实验结果(注:A酶和B酶分别是两种微生物分泌的纤维素酶).请回答下列问题:

  1. (1) 据图1可知,本实验研究的课题是 

  2. (2) 据图1,在40℃至60℃范围内,热稳定性较好的酶是 .高温条件下,酶容易失活,其原因是 .
  3. (3) 下表是图一所示实验结果统计表,由图1可知表中③处应是 ,⑧处应是 .
    温度(℃)
    A酶活性(mmol•S﹣13.13.85.86.35.42.90.9
    B酶活性(mmol•S﹣11.12.23.93.41.90

  4. (4) 图2表示30℃时B酶催化下的反应物浓度随时间变化的曲线,其他条件相同,在图2上画出A酶(浓度与B酶相同)催化下的反应物浓度随时间变化的大致曲线.

  5. (5) 适宜条件下,取一支试管加入A酶和蛋白酶溶液并摇匀,一段时间后加入纤维素,几分钟后加入新制斐林试剂并水浴加热,结果试管中没有产生砖红色沉淀,原因是 .
关于探究果胶酶最适用量的实验,叙述错误的是(   )
A . 配制不同浓度的果胶酶溶液,在各组中加入等量的该溶液 B . 调节pH,使各组的pH相同而且处于适宜状态 C . 用橙子做本课题实验,必须去掉橙皮 D . 各组的反应时间和过滤时间都应该相同
若要探究果胶酶的最适用量,下列叙述错误的是(  )
A . 在等量的果泥中加入等量相同浓度的果胶酶 B . 用玻璃棒搅拌加酶的果泥,搅拌时间应相同 C . 调节pH,使各组中的pH相同且处于适宜状态 D . 为了检测果胶的剩余量,应该加入95%的乙醇
某小组为了解某种加酶洗衣粉对蛋白质的水解作用,将相同大小的蛋白块置于等量相同适宜浓度的洗衣粉溶液中,蛋白块消失所需的时间与温度的关系如图所示。下列有关叙述正确的是(   )

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A . 该洗衣粉水解脂肪的最适温度也是45℃ B . B和C两点催化效率相同的原因是酶的空间结构相同 C . 若改变洗衣粉溶液的pH,则A点不会移动 D . 若减小洗衣粉的浓度,A,B,C点均向下移动
下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是(   )
A . 高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好 B . 在pH略低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用 C . 洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用 D . 洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶解在水里的污渍发挥作用