基因工程知识点题库

下列有关生物工程的叙述正确的是

A . 应用基因诊断技术，可检测受体细胞中的目的基因是否表达 B . 筛选产生抗体的细胞需要使用抗原—抗体杂交法 C . 茎尖细胞具有很强的分裂能为，离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株 D . 将牛的体细胞核移植到去核卵细胞中，获得克隆牛是一种培育新品种的方式

如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E—F区域（0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2（）

A . 既能被E也能被F切开 B . 能被E但不能被F切开 C . 既不能被E也不能被F切开 D . 能被F但不能被E切开

科学家将豌豆染色体片段导入玉米细胞，培育出具有豌豆优良性状而染色体数目不变的玉米新品种．下列有关叙述正确的是（）

A . 新品种玉米能表现出玉米和豌豆的所有性状 B . 新品种玉米的培育原理是基因突变和染色体变异 C . 新品种玉米自交后代不一定都具有豌豆的优良性状 D . 新品种玉米表现出的豌豆性状一定是单基因控制的性状

实验者利用基因工程技术将高抗旱基因R成功转入到抗旱能力弱的植株的染色体上，并得到如图所示的三种高抗旱类型．下列说法中不正确的是（）

A . 图Ⅲ类型自交产生的后代中，高抗旱性植株占 $\text{[math]}$ B . Ⅰ和Ⅱ杂交产生的后代中高抗旱性植株所占比例为100% C . Ⅱ和Ⅲ杂交产生的后代中高抗旱性植株所占比例为 $\text{[math]}$ D . Ⅰ和Ⅲ杂交产生的后代中高抗旱性植株所占比例为100%

如图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白（HSA）的流程．回答下列问题：

（1） PCR扩增HSA基因使用的酶是，构建含有人HSA基因表达载体时所用的工具酶有．
（2）图中培育转基因动物属于（填“有性”“无性”）繁殖，过程①常用的方法是．在过程②进行之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取胚胎细胞进行DNA分析，其采用的基因探针来自（填“常”“性”）染色体．
（3）检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技术，但在转基因牛乳汁中却没有检测到HSA的存在，若从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是．

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（）

A . 将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B . 将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌 C . 将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌 D . 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长

浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题。

（1）获得油菜素内酯合成酶基因的方法有、、。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指。
（2）图中导入重组质粒的方法是，在导入之前应用处理受体细菌。
（3）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入可将含有目的基因的细胞筛选出来。
（4）请你为该课题命名：。

下列关于核酸分子杂交和抗原-抗体杂交的叙述，正确的是（）

A . 核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交 B . 抗原-抗体杂交的原理为碱基互补配对原则 C . 核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录 D . 抗原-抗体杂交中目的基因产物常作为抗体

玫瑰有5000多年的人工栽培历史，迄今已培育出2500多个品种。玫瑰没有生成蓝色翠雀花素所需的“黄酮类化合物3，5—氢氧化酶”的基因，因此蓝玫瑰被认为是不可能培育成功的。但日本科研人员将蓝三叶草中的蓝色素基因植入普通玫瑰而成功培育出了蓝玫瑰，这株玫瑰的花瓣中所含的色素为蓝色。下列有关叙述正确的是( )

A . 蓝色翠雀花素分布于蓝玫瑰花瓣细胞的液泡和叶绿体中 B . 培育蓝玫瑰用到的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶 C . 蓝色素基因在所有玫瑰细胞中都能控制合成蓝色翠雀花素 D . 蓝玫瑰的培育成功意味着人类创造了一个新的物种

人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶(ADA)的基因，导致体内缺乏腺苷酸脱氨酶。随着基因工程的不断发展，科学家利用基因治疗治愈了人类复合型免疫缺陷症，过程如下图所示。

回答下列问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，图中①代表的步骤是。
（2）图中③表示目的基因的检测与鉴定。检测ADA基因是否存在T细胞中，用PCR技术进行扩增时，应提取T细胞中的(填“mRNA”“总“RNA”或“DNA”)作为PCR模板，从而筛选出含ADA基因的T细胞。检测ADA基因是否转录时，未出现ADA基因转录的mRNA，从基因表达载体的构建角度推测，最可能的原因是。
（3）含ADA基因的T细胞必需要能产生，才能注入患者体内，达到治疗疾病的目的。这种治疗方法属于基因治疗，基因治疗是指。
（4）基因工程中常用的载体，除上图所示以外，还有和。

下列关于基因工程的叙述，正确的是( )

A . 通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理质粒的DNA B . DNA连接酶和运载体是构建重组质粒必需的工具酶 C . 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D . 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器

2018年 11月一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，也意味着中国在基因编辑技术用于疾病预防领域实现历史性突破。但同时也带来了伦理上的争论。这次基因手术利用CRISPR/Cas9“敲除”CCR5基因中的部分序列，CCR5（白细胞上的一种蛋白）是HIV病毒入侵机体细胞的主要辅助受体之一，且CCR5缺失的个体拥有正常的免疫功能和炎症反应。请回答以下问题：

（1）修改基因，用到的工具酶是，该项技术属于生物工程的工程。
（2）修改的基因采用法转入受体细胞，受体细胞最好选择（精子，卵子，受精卵，体细胞），为什么？。
（3）若改造基因后的人细胞在体外要发育到阶段可以移植到受体体内。
（4）有人认为这对双胞胎并没有获得抵抗 HIV的能力，为什么？。

有关“转基因猴”、“克隆猴”和“试管猴”的说法合理的是（）

A . 三种猴都继承了双亲的优良性状 B . 三种猴培育过程都体现了动物细胞的全能性 C . 三种猴培育过程都应用了早期胚胎培养技术和胚胎移植技术 D . 为提高繁殖效率三者都可采用原肠胚期的胚胎进行胚胎分割

疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的传染病。研究发现，海参体液中含有一种能溶解人血的蛋白质X。按蚊体内含有这种蛋白质时，疟原虫会因缺乏某种营养物质而死亡。科学家据此培育抗疟原虫的按蚊。回答下列问题：

（1）使用PCR技术体外扩增目的基因时，需要种引物；该技术的原理是。
（2）编码蛋白质X基因与质粒构建表达载体时，所需的酶有；为了使转录在所需要的地方停下来，则需在表达载体上添加。为了便于筛选含有目的基因的细胞，需要在之间添加标记基因。
（3）为探究改造过的按蚊是否抗疟原虫，科学家让100只分别吸食疟疾患者的血液，之后检测两组。

下列过程中，很可能没有发生生物膜融合的是（　　）

A . 植物体细胞杂交 B . 细胞杂交 C . 受精过程 D . 目的基因导入大肠杆菌

采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是( )

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A . ①② B . ②③ C . ③④ D . ①④

[选修3：现代生物科技专题]

采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF₁）基因导入受试植物，并检测了相关指标。回答下列问题：

（1）为获取YCF₁基因，将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体称为。
（2）将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是。
（3）进行前期研究时，将含有YCF₁基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是。研究者进一步获得了转YCF₁基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是。
（4）将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。
（5）已知YCF₁特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是。相较于草本植物，采用杨树这种乔木作为Cd污染土壤修复植物的优势在于（写出两点即可）。

利用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的实验步骤中，不需要的是（）

A . 用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B . 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融合 C . 用选择培养基筛选导入目的基因的细胞 D . 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽

肠道病毒EV7₁是RNA病毒，其表面蛋白为VP₁～VP₄ ，分别由V₁～V₄基因控制。为研究VP₁～VP₄的抗原性，从中筛选出EV7₁的疫苗抗原，研究人员利用基因工程技术生产了上述4种蛋白质。如图是制备V₁基因表达载体的过程示意图，请回答下列问题：

（1）以RNA为模板，通过4组RT-PCR可分别获取V₁～V₄基因（DNA）。RT-PCR 所需要的酶有，
该过程中子链延伸时所需的能量较为特殊，一般来自。
（2）为方便目的基因与质粒的连接，通常将限制酶的切点设计在引物上。引物一般为单链DNA，新合成子链的延伸方向为5^’→3^’。PCR 获取V₁基因时，引物中限制酶切点的碱基序列应设计为上游引物 3^’……5^’ ，下游引物 3^’……5^’。
（3）用相关限制酶处理质粒和V1基因后，再与酶混合，加入大肠杆菌温育。一段时间后，将菌液涂布在含有和的平板上，经培养，在平板上长出白色和蓝色两种菌落，其中菌落含有V1基因表达载体，判断依据是。

（4）通过基因工程制备了VP₁～VP₄抗原后，需对4种抗原进行检测。检测1：将4种抗原分别注射小鼠，检测小鼠能否产生相应抗体。检测2：这些抗体能否中和EV71病毒（和病毒形成沉淀），结果如下表。

抗原	检测项目
抗原	检测1	检测2
VP₁	﹢	﹢
VP₂	﹣
VP₃	﹣
VP₄	﹢	﹣
“﹢”表示能，“﹣”表示不能

检测结果表明，可用作 EV71的疫苗抗原。其他3种不能作为 EV71疫苗抗原的理由是。

阅读下列材料，完成下面小题。

为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，可采取如下措施：

①基因策略：包括提高杀虫基因的表达量、向棉花中转入多种杀虫基因等。例如，早期种植的抗虫棉只转入了一种Bt毒蛋白基因，抗虫机制比较单一；现在经常将两种或两种以上Bt基同时转入棉花。

②田间策略：主要是为棉铃虫提供底护所。例如我国新疆棉区，在转基因棉田周围种植一定面积的非转基因棉花，为棉铃虫提供专门的庇护所：长江、黄河流域棉区多采用将转基因抗虫棉与高粱和玉米等其他棉铃虫寄主作物混作的方式，为棉铃虫提供天然的庇护所。

③国家宏观调控政策：如实施分区种植管理等。

（1）关于上述基因策略，下列叙述错误的是（）

A . 提高Bt基因的表达量，可降低抗虫棉种植区的棉铃虫种群密度 B . 转入棉花植株的两种Bt基因的遗传不一定遵循基因的自由组合定律 C . 若两种Bt基因插入同一个T-DNA并转入棉花植株，则两种基因互为等位基因 D . 转入多种Bt基因能提高抗虫持久性，是因为棉铃虫基因突变频率低且不定向
（2）关于上述田间策略，下列叙述错误的是（）

A . 转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因的突变率 B . 混作提高抗虫棉的抗虫持久性，体现了物种多样性的重要价值 C . 为棉铃虫提供底护所，可使敏感棉铃虫在种群中维持一定比例 D . 为棉铃虫提供庇护所，可使棉铃虫种群抗性基因频率增速放缓

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