基因工程 知识点题库
下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 （ ）
A . 细菌质粒
B . 噬菌体
C . 动植物病毒
D . 细菌核区的DNA
不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）
A . 能复制
B . 有多个限制酶切点
C . 具有标记基因
D . 它是环状DNA
下列关于DNA连接酶的作用，叙述正确的是
A . 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接
B . 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键
C . 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
D . 连接两条DNA链上碱基之间的氢键
下列关于基因工程应用的叙述，正确的是
A . 基因治疗是把缺陷基因诱变成正常基因
B . 基因诊断的基本原理是碱基互补配对原则
C . 一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D . 利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因来自于人体效应B细胞的DNA
科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草．图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．请分析回答下列问题：
（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用 技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是、酶、原料、模板，该技术必须用 酶；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有 ．
（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是 ．图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割．
（3）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是
如图表示一项重要生物技术的关键步骤，X是获得外源基因并能够表达的细胞．下列说法不正确的是（ ）
A . X是能合成胰岛素的细菌细胞
B . 质粒通常有多个标记基因和多个限制酶切点
C . 基因与运载体的重组只需要DNA连接酶
D . 该细菌的性状被定向改造
在基因工程中用来构建基因表达载体需要的工具是（ ）
A . 限制酶和DNA连接酶
B . 限制酶和水解酶
C . 限制酶和运载体
D . DNA连接酶和运载体
我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质．图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答：
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（1） 铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用法获得此目的基因或用扩增目的基因．
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（2） 构建重组Ti质粒时，通常要用分别切割．将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入．
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（3） 将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得；培养基3与培养基2的区别是．检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻．
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（4） 为研究外源基因的遗传方式，将To代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性．在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1，此结果说明外源基因的遗传符合．有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是．
人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
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（1） 步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是。科研人员还在两种引物的一端分别加上了和序列，以便于后续的剪切和连接。
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（2） 过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需结构还有，过程③中需先用处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
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（3） 过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是。
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（4） 治疗中发现，用于口服的α-干扰素在胃中会受到一定程度的破坏影响其功效，需要利用技术加以改造，以达到满意效果。
1987年，美国科学家将萤火虫的萤光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达。长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明（ ）
①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同
②萤火虫与烟草植物共用一套遗传密码
③烟草植物体内合成了萤光素
④萤火虫和烟草植物合成蛋白质的方式基本相同
A . ①和③
B . ②和③
C . ①和④
D . ①②③④
如图是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段．下列的叙述中，正确的是（ ）
A . 以上DNA片段是由3种限制酶切割后产生的
B . 用DNA聚合酶可以把相应片段连接起来
C . 限制酶和DNA连接酶作用的部位不同
D . 上述①④是能用DNA连接酶连接起来的两个片段
应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是（ ）
A . 用于检测疾病的医疗器械
B . 用放射性同位素标记的目的基因
C . 基因表达载体上的标记基因
D . 用放射性同位素标记的相应抗体
基因工程的核心步骤必须用到的工具酶有( )
A . 限制酶、DNA聚合酶
B . DNA聚合酶、DNA连接酶
C . 限制酶、DNA连接酶
D . Taq、RNA聚合酶
甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（ ）
A . 甲方法可建立该细菌的基因组文库
B . 乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C . 甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D . 乙方法需要逆转录酶参与
中国科学家通过构建携带人类自闭症基因MeCP2的转基因猴模型及对MeCP2转基因猴进行分子遗传学与行为学分析，发现MeCP2转基因猴表现出类似人类自闭症的刻板与社交障碍等行为。回答下列问题：
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（1） MeCP2基因表达的MeCP2蛋白主要通过与DNA特定部位结合从而抑制某些基因的表达，推测MeCP2蛋白的作用机理是抑制相关基因的
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（2） 将目的基因导入哺乳动物受精卵最有效的方法是。研究人员使用动物病毒作为载体将MeCP2基因转入食蟹猴的基因组中，一般作为基因工程载体的动物病毒应为。源病毒（如腺病毒）或具有 功能的RNA病毒。
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（3） 研究人员利用技术检测，确认MeCP2基因能在神经系统中成功表达。基因在生物体内选择性表达主要是由位于基因首端的决定的，它是识别和结合的部位。研究人员对转基因猴进行了体征记录以及多项行为学测试，这属于的鉴定。
利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类需要的产品。下列各项中最能说明目的基因在受体细胞中完成了表达的是（ ）
A . 番茄细胞中检测到鱼的抗冻蛋白基因
B . 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNA
C . 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
D . 山羊乳腺细胞中检测到人凝血酶DNA序列
目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（ ）
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的合成
④表达出蓝色荧光蛋白
A . ①②③④
B . ②①③④
C . ②③①④
D . ④②①③
获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是（ ）
①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A . ①③
B . ①④
C . ②③
D . ②④
RGA是一种具有抑制植物生长作用的蛋白质，生长素能通过赤霉素使RGA降解，无赤霉素时，生长素不能引起RGA降解。研究者向拟南芥赤霉素合成缺陷型突变体中转入绿色荧光蛋白（GFP）基因与RGA基因的融合基因，获得转基因拟南芥植株，借助荧光显微镜可以观察转基因拟南芥幼苗根尖细胞中GFP—RGA融合蛋白的表达情况。回答下列问题：
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（1） 融合基因是将两个或多个基因首尾相连，置于同一套调控序列控制之下而构建的。调控序列包括能驱动基因转录出mRNA的和能使转录在所需要的地方停下来的。在GFP—RGA融合基因中，GFP基因的作用是作为基因。
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（2） 构建融合基因需要等工具酶，将融合基因导入拟南芥细胞时常用法。
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（3） 转融合基因拟南芥细胞具有性，因而通过技术能使其发育成转基因植株。根据题意，写出从细胞或个体水平检测融合基因是否导入成功的方法。
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（4） 将成功导入融合基因的拟南芥赤霉素合成缺陷型幼苗均分成甲、乙、丙三组，对其进行下 表所示处理，已知GFP—RGA融合蛋白中，GFP随RGA的分解而分解，预期能观察到绿色荧光的是组。
组别
甲组
乙组
丙组
处理
保持完整
去幼芽、幼叶
去幼芽、幼叶+生长素
用适宜浓度的赤霉素溶液处理4 h后，用荧光显微镜观察幼苗根尖是否出现绿色荧光
有些人体内缺乏足够的乳糖酶（LCT），无法充分消化牛奶中的乳糖，会导致喝奶后产生腹泻等不良反应。我国科研人员利用转基因技术和克隆技术培育出了可产低乳糖牛奶的拉克斯牛，培育过程如图所示，A～C表示操作步骤。（图中胚胎成纤维细胞是由胚胎干细胞经分裂分化后产生的一类仍具有分裂能力的细胞）
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（1） 通过步骤A获取重组质粒T时，除需要限制酶BamHI外，还需要等酶的参与。实现步骤B常用的方法是，步骤C中的技术被称为。
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（2） 动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞，而在拉克斯牛的培育过程中选择胚胎成纤维细胞作为受体细胞，此举有何意义：。
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（3） 在现有的技术条件下，还不能直接将重组细胞1培养成一个新个体，而必须获取重组细胞2后才能发育成新个体，你认为原因最可能是 。A . 重组细胞2的细胞核才具有全能性 B . 重组细胞2的核DNA与重组细胞1不同 C . 重组细胞2中核基因的表达情况与重组细胞1不同 D . 卵细胞较大，便于操作
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（4） 下列对拉克斯牛的分析中正确的有 。A . 拉克斯牛体内的神经、肌肉和乳腺细胞中均含有乳糖酶基因 B . 除乳糖酶基因外，拉克斯牛的核基因与图中黑白花奶牛相同 C . 对图中拉克斯牛进行克隆繁育，无法获得雄拉克斯牛 D . 导入了乳糖酶基因的重组细胞2，一定能培育出拉克斯牛
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（5） 科研人员发现，拉克斯牛所产的牛奶除乳糖含量低之外，还含有高活性的乳糖酶，可用于生产工业用乳糖酶。在此生产过程中，用于将乳糖酶与乳清蛋白分离的操作技术是。
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