动物细胞培养技术知识点题库

下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是(　　)

A . 培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B . 原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C . 动物细胞培养都能够传到40～50代 D . 动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞

下列关于动物细胞培养的叙述，说法正确的选项有几个
①动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性　②需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理　③传代培养的细胞不会发生接触抑制④恒温条件下，核型始终不改变　⑤传代培养的细胞因为以有丝分裂方式增殖，所以在传代过程中其遗传物质保持不变　⑥只要培养条件适宜，细胞都可在体外无限繁殖　⑦可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白　

A . 1 B . 2 C . 3 D . 4

图中a表示基因工程，c表示胚胎工程，d表示克隆技术，则e和b分别表示（）

A . 胚胎移植和细胞培养 B . 显微注射技术和细胞培养 C . 细胞培养和花粉离体培养 D . 显微注射技术和花粉离体培养

关于生物工程和技术的说法正确是（）

A . 从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子 B . 单倍体育种需要细胞分裂素、生长素、秋水仙素等激素的参与 C . 动物细胞培养过程中，培养箱中需含5%的CO₂刺激细胞呼吸 D . 为统计某水样中活菌的数目，可采用平板划线法进行接种

植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（）

A . 植物组织培养和动物细胞培养﹣﹣细胞的全能性 B . 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养﹣﹣细胞增殖 C . 原生质体融合和动物细胞融合﹣﹣生物膜的流动性 D . 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理﹣﹣酶的专一性

在现代生物工程技术中，下列研究方案能实现其目的是（）

选项	方案	目的
A	通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞	制备单克隆抗体
B	体外诱导胚胎干细胞分化	培育供移植的组织器官
C	将胰岛素基因导入大肠杆菌，进行培养	大量生产人胰岛素
D	用胰蛋白酶处理剪碎的动物组织块	制备动物细胞悬浮液

A . A B . B C . C D . D

用动植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（）

A . 都需用CO₂培养箱 B . 都需用液体培养基 C . 都要在无菌条件下进行 D . 都可体现细胞的全能性

动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）

A . 动物细胞培养 B . 动物细胞融合 C . 单克隆抗体 D . 胚胎核移植

关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（）

A . 动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 B . 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 C . 烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D . 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒

关于生物技术的叙述，错误的是（）

A . 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间，才能进行转录 B . 目的基因与荧光标记的DNA探针进行分子杂交，能形成磷酸二酯键 C . 烟草叶片可离体培养产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D . 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒

关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是（）

A . 动物细胞培养与动物组织培养均需使用胰蛋白酶制备体细胞悬液 B . 植物有性杂交和体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍 C . 转入到油菜的抗除草剂基因，不可能通过花粉传入环境中造成基因污染 D . 植物组织培养中生长素和细胞分裂素的配比会影响组织分化

关于现代生物技术的应用叙述，不正确的是（）

A . 植物组织培养技术可用于转基因植物的培育 B . 动物细胞培养技术可以克隆出动物个体 C . 单克隆抗体技术可用于制备“生物导弹” D . 蛋白质工程可以改造自然界现有的蛋白质

下列技术或方法与原理相符的是（）

A . 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B . 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C . 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D . 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组

神经纤毛蛋白-1（NRP-1）是血管内皮生长因子的新型受体，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为NRP-1单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，运用技术获得MCF7细胞用于后续实验。用重组的人蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1 MAb）。
（2）提取正常组织细胞和MCF7细胞的总蛋白，设置空白对照，加入NRP-1 MAb进行蛋白质免疫印迹，实验结果如下：

该实验结果说明了。
（3）将MCF7细胞制成单细胞悬液，等量注入4组裸鼠右前腋下，接种后3天开始给药，共给药7次。每隔5天测算一次肿瘤的体积，如下图所示：

对照组注射，从上图中可以看出。
（4）结合题干信息，综合以上研究请你推测NRP-1 MAb抑制肿瘤的作用机理是。
（5）注射不同剂量NRP-1 MAb 33天后，剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：

从该结果中可以看出。综合比较（3）和（5）的实验结果，可见中高剂量和低剂量的NRP-1 MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现了不一致性。
（6）基于以上研究，科学家们对该抗体的用药方式有两种观点：谨慎用药和适宜浓度用药。你支持哪个观点，并说出理由。

[选修3：现代生物科技专题]

M 基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：

（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为（答出两点即可），功能上具有。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M 基因是否失活的实验思路。

为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如下图所示。下列有关叙述错误的是（）

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A . 对照组中应加入与实验组等体积的无菌蒸馏水 B . 细胞培养液中通常需要加入血清、血浆等天然成分 C . 可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数 D . 根据实验结果，可以初步判断药物X的抗癌效果较好

下图为某种哺乳动物体细胞核移植过程图。回答下列问题：

（1）卵母细胞在体外培养到时进行去核。①处需用等处理，然后分瓶继续培养。
（2）培养重组细胞时为防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的；在使用合成培养基时，通常还需加入等天然成分；提供的气体中，CO₂的作用是。
（3）对重组细胞培养一般不会超过10代，原因是。激活重组细胞除了用电刺激的方法，还可以用（写一种实际方法）。
（4）动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植的原因是。

下列有关细胞工程技术在生产实践中应用的叙述，正确的是（）

A . 愈伤组织细胞分裂能力强，包上人造种皮即可获得人工种子 B . 脱毒草莓和转基因抗病毒草莓的培育都需要使用植物组织培养技术 C . 细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO₂刺激细胞呼吸 D . 转基因羊和克隆羊“多莉”的培育克服了远缘杂交不亲和性障碍

科学家研究发现，两种名为SOX2和OCT4的重要转录因子浓度的波动能决定胚胎干细胞转变的细胞类型。研究者在胚胎干细胞上敲入了几个“报告”基因，这些“报告”基因附在相关基因附近，当细胞中靶向基因表达时，其就会产生荧光信号。利用这种方法，研究人员就能在活体细胞中监测SOX2和OCT4的波动情况，同时还能阐明这些波动如何影响胚胎干细胞的命运。请回答下列问题。

（1）胚胎干细胞具有性，所以可以发育成任何一种细胞。向胚胎干细胞培养液中加入一些转录因子，一段时间后镜检发现培养的细胞呈胰岛样细胞的变化，发生这一变化的根本原因是。
（2）在体外培养胚胎干细胞时，需要在合成培养基的基础上添加等天然成分。同时为了维持培养液的pH值，需要提供的气体环境是。
（3）敲入基因就是将外源基因重组到另一种DNA分子上。在胚胎干细胞上敲入的“报告”基因其实是一种荧光蛋白基因，科学家用同一种限制酶切割荧光蛋白基因和胚胎干细胞的DNA是为了在将“报告”基因“敲入”到胚胎干细胞的DNA上时，还需要用酶连接荧光蛋白基因和胚胎干细胞的DNA之间的键。
（4）请指出本研究在实践应用方面的一个意义。

植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（）

A . 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B . 植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C . 植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D . 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂

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