动物细胞培养技术 知识点题库
实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
实验小鼠 
皮肤组织 
皮肤细胞 
培养细胞1 
培养细胞2
步骤1：用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间．
步骤2：取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200ng•mL﹣1）的培养基继续培养24h．
步骤3：对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（
×100%），结果如图1．
步骤4：分别提取TSA浓度为0ng•mL﹣1、25ng•mL﹣1、50ng•mL﹣1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl﹣2）和β﹣肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2．
分析回答：
（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是 ．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 ．
（2）步骤2中，设置0ng•mL﹣1 TSA实验的主要目的是 ．
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是
（4）图1所示结果表明 ．
（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡．
-
（1） 糖尿病在现代社会中的发病率越来越高，主要是由于患者胰岛B细胞受损，胰岛素分泌不足引起的．对此，某同学根据所学知识提出了用转基因动物生产胰岛素的治疗方法．
基本程序：①获取目的基因→②基因表达载体的构建→③将目的基因导入受体细胞→④目的基因的检测与鉴定．其中①和②的操作中需要用的相同的工具酶作用于键．利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在酶的作用下延伸形成DNA．
-
（2） 植物细胞工程中，科学家采用体细胞杂交方法终于获得“番茄﹣马铃薯”超级杂种植株，该过程中可诱导原生质体融合的物理方法有、和电激等，获得的杂种细胞还需经技术培养成杂种植株．
-
（3） 动物细胞培养中，通常需要用处理动物组织块，使之分散成单个细胞；克隆动物的获得是利用了的全能性．
选项 | 方案 | 目的 |
A | 诱导人胰岛B细胞和奶牛卵细胞融合 | 培育转基因克隆奶牛 |
B | 将外源基因导入受体植物叶绿体中 | 防止外源基因扩散 |
C | 通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞 | 制备单克隆抗体 |
D | 用胃蛋白酶处理剪碎的动物组织块 | 制备动物细胞悬浮液 |
实验材料：癌细胞悬液(含培养液)、蓝莓花青素(浓度200 μg/mL)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。
(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜)
-
（1） 实验思路：
-
（2） 请设计一个表格用于记录实验数据。
-
（3） ①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用测定癌细胞培养液的浑浊度。
②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？。
A．保留，继续求平均值
B．舍弃，其他组别求平均值
C．重新实验得到实验数据
D．取中间值
-
（1） 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是，这种微生物生活在土壤中，能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力；1994年科学家利用经过修饰的作载体，成功的将治疗遗传性囊性纤维化病的正常基因转入患者肺组织中，这种方法叫体内基因治疗。
-
（2） 动物细胞融合方法区别于植物原生质体融合方法是生物法，生物法用进行促融；在制备单克隆抗体的过程中，已获得杂种细胞特点是既能无限增殖，又能产生专一的抗体，对上述经选择培养的杂交瘤细胞，还需进行培养和，经多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
-
（3） 胚胎发育：合子形成后即在内进行有丝分裂，开始发育。早期胚胎发育分为桑椹胚、囊胚、原肠胚阶段，随着胚胎发育，胚胎内部出现囊胚腔，囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做，原肠胚时期的滋养层发育为胎儿的。
-
（4） 我国西北地区年降雨量小于450mm，只是适宜种植灌木和草的地区，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，以致到处都是杨家将，成为半死不活的“小老头”状，远不如当地树种那样有较高的生态适应性，结果防护林成了残败的“灰色长城”，这里主要违反了生态工程应该遵循的原理是，而我国传统的“无废弃物农业”取得了辉煌的成就，是生态工程最早和最生动的一种模式，它主要遵循了生态工程的原理。
-
（1） 据图判断，在肿瘤细胞外，铁必须先和结合，再通过方式进入细胞。因肿瘤细胞增长快速，其需要的铁元素增加，因此肿瘤细胞表面TfR表达量（填上升或下降）。利用单克隆抗体技术，制备抗TfR抗体，它们与TfR特异性结合，进而影响肿瘤细胞增长。
-
（2） 制备抗TfR单克隆抗体，可将免疫接种过TfR的小鼠的B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。细胞融合实验完成后，融合体系除杂交瘤细胞外，可能还含有未融合的细胞和其他种类的融合细胞，体系中出现多种细胞类型的原因是。因此，在诱导融合后需经两次筛选，第一次筛选获得多种，第二次筛选利用原理筛选得到分泌抗TfR抗体的杂交瘤细胞。
-
（3） 克隆培养杂交瘤细胞时，需将杂交瘤细胞放入含有5%CO2的混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是。
